一种超高效液相色谱串联质谱的检测方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种超高效液相色谱串联质谱的检测方法和应用。本发明专利技术的方法采用超高效液相色谱

【技术实现步骤摘要】
一种超高效液相色谱串联质谱的检测方法和应用


[0001]本专利技术涉及药物分析
，特别涉及一种超高效液相色谱串联质谱的检测方法和应用。

技术介绍

[0002]目前针对同时检测奈玛特韦、莫诺拉韦、达卡他韦这三种药物的液质联用检测方法并未有国家标准发布，也未见文献报道，因此亟需建立检测上述抗病毒药物的定性及定量方法。

技术实现思路

[0003]本专利技术旨在至少解决现有技术中存在的上述技术问题之一。为此，本专利技术的目的在于提供一种通过超高效液相色谱
‑
串联质谱联合分析的技术手段，从而建立同时分析奈玛特韦、利托那韦、达卡他韦的定性定量检测方法，为有效监管药品安全提供技术支持。
[0004]为了实现上述目的，本专利技术所采取的技术方案是：
[0005]本专利技术的第一个方面提出了一种超高效液相色谱串联质谱的检测方法。
[0006]本专利技术的第二个方面提出了一种超高效液相色谱串联质谱的检测方法的应用。
[0007]根据本专利技术的第一个方面，提出了一种超高效液相色谱串联质谱的检测方法，所述方法包括如下步骤：
[0008](1)配制奈玛特韦、莫诺拉韦和达卡他韦的混合标准溶液；
[0009](2)使用超高效液相色谱串联质谱对混合标准溶液和前处理后的检测样品溶液进样分析，根据标准曲线计算得到检测样品中奈玛特韦、莫诺拉韦和达卡他韦的含量；其中，所述质谱的条件包括：
[0010]离子化模式：电喷雾离子源(ESI)，正离子模式扫描，多反应监测(MRM)模式激发二级质谱全扫(MS2)；
[0011]气帘气(CUR)：20～40psi；
[0012]碰撞气(CAD)：Medium；
[0013]离子化电压(IS)：4500～5500V；
[0014]离子源温度(TEM)：400～600℃；
[0015]雾化气(GS1)：40～60psi；
[0016]辅助气(GS2)：40～60psi；
[0017]去簇电压(DP)：90～120V；
[0018]入口电压(EP)：10.0V；
[0019]碰撞能量(CE)：20～80V；
[0020]碰撞室出口电压(CXP)：10～15V；
[0021]二级质谱全扫范围(amu)：50～750。
[0022]在本专利技术的一些实施方式中，(1)中所述奈玛特韦、莫诺拉韦和达卡他韦的混合标
准溶液的浓度为0.6ng/mL～80ng/mL，也即混合标准溶液中奈玛特韦、莫诺拉韦和达卡他韦浓度相同，且任意一种的浓度均为0.6ng/mL～80ng/mL。
[0023]在本专利技术的一些实施方式中，(1)中所述混合标准样品的具体配制包括：
[0024]S1：使用甲醇分别配制奈玛特韦、莫诺拉韦和达卡他韦的标准储备液；
[0025]S2：用S1所述标准储备液配制混合中间标准溶液，甲醇稀释至所需浓度得到混合标准溶液。
[0026]在本专利技术的一些优选的实施方式中，(1)中所述混合标准样品的具体配制包括：
[0027]S1：精确称取奈玛特韦、莫诺拉韦和达卡他韦对照品各10mg，分别置于10mL容量瓶中，用甲醇溶解稀释置刻度，配置成1mg/mL的标准储备液，于
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20℃保存；
[0028]S2：分别精确移取各标准品储备液，用甲醇配制成1μg/mL的混合中间标准溶液，于
‑
20℃保存；使用时将混合中间标准溶液恢复至室温(15℃～30℃)，用甲醇稀释至0.6ng/mL、2ng/mL、5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL、50ng/mL、80ng/mL，得到混合标准样品，现用现配。
[0029]在本专利技术的一些优选的实施方式中，离子化模式：电喷雾离子源(ESI)，正离子模式扫描，多反应监测(MRM)模式激发二级质谱全扫(MS2)；
[0030]气帘气(CUR)：30.0psi；
[0031]碰撞气(CAD)：Medium；
[0032]离子化电压(IS)：5500.0V；
[0033]离子源温度(TEM)：550.0℃；
[0034]雾化气(GS1)：55psi；
[0035]辅助气(GS2)：55psi；
[0036]去簇电压(DP)：120.0V；
[0037]入口电压(EP)：10.0V；
[0038]碰撞能量(CE)：20～80V；
[0039]碰撞室出口电压(CXP)：13.0V；
[0040]二级质谱全扫范围(amu)：50～750。
[0041]在本专利技术的一些优选的实施方式中，(2)中所述检测样品溶液的前处理包括：将检测样品与甲醇混合，涡旋，超声，定容，滤膜过滤。
[0042]在本专利技术的一些优选的实施方式中，(2)中所述检测样品溶液的前处理包括：精确称取0.200g检测样品置50mL具塞离心管中，加入30mL甲醇，涡旋30s，70kHz，250W超声15min，放冷至室温(15℃～30℃)后，定容至50mL，使用前经0.22μm尼龙滤膜过滤。
[0043]在本专利技术的一些优选的实施方式中，(2)中所述超高效液相色谱的洗脱系统为甲醇
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甲酸水溶液梯度洗脱；进一步为甲醇
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0.05～0.1％(V/V)甲酸水溶液梯度洗脱；更进一步为甲醇
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0.1％(V/V)甲酸水溶液梯度洗脱。
[0044]在本专利技术的一些优选的实施方式中，(2)中所述超高效液相色谱的条件包括：
[0045]色谱柱：C18色谱柱；
[0046]流动相：A相为甲酸水溶液，B相为甲醇；
[0047]梯度洗脱程序：0～2min，95％A；2～4min，95％～10％ A；4～7min，10％A；7～10min，95％A；
[0048]流速：0.2～0.4mL/min；
[0049]柱温：30～45℃；
[0050]进样量：2～20μL。
[0051]在本专利技术的一些更优选的实施方式中，(2)中所述超高效液相色谱的条件包括：
[0052]色谱柱：C18色谱柱；
[0053]流动相：A相为甲酸水溶液，B相为甲醇；
[0054]梯度洗脱程序：0～2min，95％A；2～4min，95％～10％ A；4～7min，10％A；7～10min，95％A；
[0055]流速：0.3mL/min；
[0056]柱温：40℃；
[0057]进样量：2μL。
[0058]在本专利技术的一些优选的实施方式中，所述奈玛特韦、利托那韦、莫诺拉韦的对应质谱参数为：
[0059][0060]其中，*为定量子离子。
[0061]在本专利技术的一些优选的实施方式中，(2)中所述C18色谱柱的规格为：柱长100mm，柱内径2.1mm，填料粒径2.6μm。
[0062]在本专利技术的一些优选本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种超高效液相色谱串联质谱的检测方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：(1)配制奈玛特韦、莫诺拉韦和达卡他韦的混合标准溶液；(2)使用超高效液相色谱串联质谱对混合标准溶液和前处理后的检测样品溶液进样分析，根据标准曲线计算得到检测样品中奈玛特韦、莫诺拉韦和达卡他韦的含量；其中，所述质谱的条件包括：离子化模式：电喷雾离子源，正离子模式扫描，多反应监测模式激发二级质谱全扫；气帘气：20～40psi；碰撞气：Medium；离子化电压：4500～5500V；离子源温度：400～600℃；雾化气：40～60psi；辅助气：40～60psi；去簇电压：90～120V；入口电压：10.0V；碰撞能量：20～80V；碰撞室出口电压：10～15V；二级质谱全扫范围：50～750。2.根据权利要求1所述的超高效液相色谱串联质谱的检测方法，其特征在于，(2)中所述超高效液相色谱的洗脱系统为甲醇
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甲酸水溶液梯度洗脱。3.根据权利要求2所述的超高效液相色谱串联质谱的检测方法，其特征在于，所述超高效液相色谱的条件包括：色谱柱：C18色谱柱；流动相：A相为甲酸水溶液，B相为甲醇；梯度洗脱程序：0～2min，95％A；2～4min，95％～10％A；4～7min，10％A；7～10min，95％A；流速：0.2～0.4mL/min；柱温：30～45℃；进样量：2～20μL。4....

【专利技术属性】
技术研发人员：庄玥，罗卓雅，黄艳婷，邱蕴绮，
申请(专利权)人：广东省药品检验所广东省药品质量研究所，广东省口岸药品检验所，
类型：发明
国别省市：