【技术实现步骤摘要】
一种用于福廷瓶头霉的荧光原位杂交鉴定探针及鉴定方法
[0001]本专利技术属于基因检测领域,具体涉及一种用于福廷瓶头霉(Phialocephala fortinii)的荧光原位杂交鉴定探针及鉴定方法。
技术介绍
[0002]深色有隔内生真菌(Dark septate endophytes,DSE)泛指一群定殖于植物根内的小型土壤真菌,其在不同植物根中均具有较为明显的相似特征,一般菌丝颜色较深、能够观察到明显的横隔,常存在于健康植物根的表皮、皮层甚至维管束组织的细胞内或细胞间隙,可以观察到穿梭的菌丝,并且能够在植物细胞内或细胞间隙形成“微菌核(microsclerotia)”,是研究较为广泛的一类内生真菌,也是植物内生真菌的主要类群。福廷瓶头霉(Phialocephala fortinii)是分离频率较高的一种深色有隔内生真菌,它有助于增加植物生物量、叶绿素含量、相对含水量(RWC)等,提高抗氧化酶活性,增强植物的适应干旱的能力,提高宿主的抗逆性。
[0003]植物内生真菌种类众多,当前较多研宄围绕着分离具有促生或抗逆 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种用于福廷瓶头霉的荧光原位杂交鉴定探针,其特征在于所述探针的序列如下:5'Cy3
‑
ACGCATGGTAAAATTGCAAGA
‑
3'。2.根据权利要求1所述的一种用于福廷瓶头霉的荧光原位杂交鉴定探针,其特征在于所述的探针是基于福廷瓶头霉的基因扩增的IGS1片段设计得到的;所述的IGS1片段是通过上游引物LR12R和下游引物5SRNA,以福廷瓶头霉的基因组为模板,通过PCR扩增得到;所述的上游引物LR12R和下游引物5SRNA序列如下:上游引物LR12R:CTGAACGCCTCTAAGTCAGAA;下游引物5SRNA:ATCAGACGGGATGCGGT。3.根据权利要求2所述的一种用于福廷瓶头霉的荧光原位杂交鉴定探针,其特征在于所述的PCR扩增的PCR体系如下:PCR扩增条件:94℃预变性5min;94℃变性1min,56℃退火50s,72℃延伸100s,34个循环,最后72℃延伸10min。4.如权利要求1所述的一种用于福廷瓶头霉的荧光原位杂交鉴定探针的应用,其特征在于所述的探针用于福廷瓶头霉的定殖检测。5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于所述的探针用于福廷瓶头霉的定殖检测,具体操作如下:步骤一、取侵染有福廷瓶头霉的样品,进行预处理;步骤二、将预处理后的样品进行预杂交、探针变性、杂交、冲洗后即完成所述的定殖检测。6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于所述的预处理为切片杂交预处理和全组织杂交预处理;其中,切片杂交是将10μ...
【专利技术属性】
技术研发人员:李丽丽,杨洪一,吴佳育,张建瑛,周志军,张海峰,刘忠玲,田新华,王洪梅,王鑫,
申请(专利权)人:东北林业大学,
类型:发明
国别省市:
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。