多糖蛋白缀合物制造技术

本发明专利技术涉及多糖蛋白缀合物，具体地，本发明专利技术提供一种具有免疫原性的多糖蛋白缀合物，含有式(I)和/或式(II)所示的肺炎克雷伯菌荚膜多糖以及与其缀合的载体蛋白。本发明专利技术的多糖蛋白缀合物可以有效地提高克雷伯荚膜多糖的免疫原性，诱导针对肺炎克雷伯菌荚膜多糖特异性抗体。抗体。

【技术实现步骤摘要】
多糖蛋白缀合物


[0001]本专利技术属于疫苗领域，具体涉及荚膜多糖蛋白缀合物及其应用。

技术介绍

[0002]肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)是一种具有荚膜包被的革兰氏阴性菌(G
‑
)。根据荚膜多糖结构的不同，肺炎克雷伯氏菌可以分成至少77个血清型，荚膜多糖也被称为K抗原或K型。肺炎克雷伯菌主要定植于消化道、呼吸道，当机体抵抗力降低时可引起肺部感染、泌尿道感染、甚至血流感染，也是导致院内呼吸道感染最常见的细菌之一。荚膜多糖是肺炎克雷伯菌的主要毒力因子，是治疗或预防肺炎克雷伯菌感染的重要保护性抗原。
[0003]肺炎克雷伯菌引发的感染目前已成为全球严重的公共卫生问题之一。据统计，肺炎克雷伯菌感染的病死率极高，肺炎克雷伯菌引起的血流感染的病死率为20％至30％，而肺炎克雷伯菌血症合并肺炎的病死率可达50％以上。肺炎克雷伯菌的治疗主要依靠抗生素，但近年来由于各种抗菌药物的广泛使用，产超广谱β
‑
内酰胺酶以及碳青霉烯酶的肺炎克雷伯菌对几乎所有可用的β
‑
内酰胺类(包括碳青霉烯类)药物都具有抗性。在过去10年中，耐碳青霉烯的肺炎克雷伯氏菌(CRKP)比率在世界范围内急剧增加。因此，开发一种新型治疗或预防药物或生物制品，对耐药性肺炎克雷伯菌的防控及临床应用具有重要的意义。
[0004]肺炎克雷伯菌的荚膜多糖是胸腺非依赖性抗原，免疫原性低，没有免疫记忆和免疫加强作用，特别是对于免疫力弱的人群免疫效果更低，因而不能起到免疫保护作用。由于肺炎克雷伯菌荚膜多糖分子量大、结构复杂不均一以及多糖
‑
蛋白化学偶联反应的复杂性，载体蛋白的选择、多糖
‑
蛋白的偶联方法将直接影响结合物的免疫效果及其保护作用。本领域仍需提高肺炎克雷伯菌荚膜多糖免疫原性和保护力的新方法。

技术实现思路

[0005]为了解决肺炎克雷伯菌荚膜多糖免疫原性低和保护力差问题，以及肺炎克雷伯菌荚膜多糖与载体蛋白难结合及免疫原性低问题，本专利技术提供了一种保护哺乳动物不受肺炎克雷伯菌感染的免疫原性组合物。
[0006]本专利技术第一方面提供一种免疫原性组合物，含有式(I)和/或式(II)所示的肺炎克雷伯菌荚膜多糖和载剂：
[0007][
→
4)
‑
α
‑
D
‑
GlcA
‑
(1
→
3)
‑
α
‑
D
‑
Manp
‑
(1
→
3)
‑
β
‑
D
‑
Glcp
‑
(1
→
4)
‑
[(4,6
‑
(S)
‑
pyruvat e)
‑
β
‑
D
‑
Glcp
‑
(1
→
2)]‑
[α
‑
L
‑
Rhap
‑
(1
→
3)]‑
α
‑
D
‑
Manp
‑
(1
→
]m
[0008](I)，
[0009][
→
3)
‑
β
‑
D
‑
Galp
‑
(1
→
4)
‑
[β
‑
L
‑
Rhap
‑
(1
→
4)
‑
β
‑
D
‑
GlcA
‑
(1
→
3)]‑
α
‑
L
‑
Rhap
‑
(1
→
]n
[0010](II)。
[0011]在一个或多个实施方案中，所述多糖的平均分子量为50
‑
800kD，优选 100
‑
700kD，更优选150
‑
650kD。
[0012]在一个或多个实施方案中，m为50
‑
800的数字，优选100
‑
700，更优选 150
‑
650；n为80
‑
1200的数字，优选160
‑
1100，更优选250
‑
1000。
[0013]在一个或多个实施方案中，所述载剂选自盐水、林格氏溶液和磷酸盐缓冲盐水中的一种或多种。
[0014]在一个或多个实施方案中，所述免疫原性组合物还含有佐剂。
[0015]在一个或多个实施方案中，所述佐剂包括选自氢氧化铝、磷酸铝、单磷酰基脂A、QS21、CpG、硬脂酰酪氨酸和弗氏佐剂的中的一种或多种。
[0016]本专利技术还提供一种具有免疫原性的多糖蛋白缀合物，含有式(I)和/或式 (II)所示的肺炎克雷伯菌荚膜多糖以及与其缀合的载体蛋白，
[0017][
→
4)
‑
α
‑
D
‑
GlcA
‑
(1
→
3)
‑
α
‑
D
‑
Manp
‑
(1
→
3)
‑
β
‑
D
‑
Glcp
‑
(1
→
4)
‑
[(4,6
‑
(S)
‑
pyruvat e)
‑
β
‑
D
‑
Glcp
‑
(1
→
2)]‑
[α
‑
L
‑
Rhap
‑
(1
→
3)]‑
α
‑
D
‑
Manp
‑
(1
→
]m
[0018](I)，
[0019][
→
3)
‑
β
‑
D
‑
Galp
‑
(1
→
4)
‑
[β
‑
L
‑
Rhap
‑
(1
→
4)
‑
β
‑
D
‑
GlcA
‑
(1
→
3)]‑
α
‑
L
‑
Rhap
‑
(1
本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种免疫原性组合物，含有式(I)和/或式(II)所示的肺炎克雷伯菌荚膜多糖和载剂：[
→
4)
‑
α
‑
D
‑
GlcA
‑
(1
→
3)
‑
α
‑
D
‑
Manp
‑
(1
→
3)
‑
β
‑
D
‑
Glcp
‑
(1
→
4)
‑
[(4,6
‑
(S)
‑
pyruvat e)
‑
β
‑
D
‑
Glcp
‑
(1
→
2)]
‑
[α
‑
L
‑
Rhap
‑
(1
→
3)]
‑
α
‑
D
‑
Manp
‑
(1
→
]
m
(I)，[
→
3)
‑
β
‑
D
‑
Galp
‑
(1
→
4)
‑
[β
‑
L
‑
Rhap
‑
(1
→
4)
‑
β
‑
D
‑
GlcA
‑
(1
→
3)]
‑
α
‑
L
‑
Rhap
‑
(1
→
]
n
(II)，优选地，所述多糖的平均分子量为50
‑
800kD，和/或m为50
‑
800的数字，和/或n为80
‑
1200的数字。2.如权利要求1所述的免疫原性组合物，其特征在于，所述载剂选自盐水、林格氏溶液和磷酸盐缓冲盐水中的一种或多种，和/或所述免疫原性组合物还含有佐剂；优选地，所述佐剂包括选自氢氧化铝、磷酸铝、单磷酰基脂A、QS21、CpG、硬脂酰酪氨酸和弗氏佐剂的中的一种或多种。3.一种具有免疫原性的多糖蛋白缀合物，含有式(I)和/或式(II)所示的肺炎克雷伯菌荚膜多糖以及与其缀合的载体蛋白，[
→
4)
‑
α
‑
D
‑
GlcA
‑
(1
→
3)
‑
α
‑
D
‑
Manp
‑
(1
→
3)
‑
β
‑
D
‑
Glcp
‑
(1
→
4)
‑
[(4,6
‑
(S)
‑
pyruvat e)<...

【专利技术属性】
技术研发人员：祝先潮，陈华根，何平，李颖，张诗琴，石星辉，
申请(专利权)人：上海博钒生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：