一种抗MXR7抗体及其应用制造技术

本发明专利技术涉及生物医药技术领域，特别是涉及一种抗MXR7抗体及其应用，所述抗MXR7抗体代号为B174

【技术实现步骤摘要】
一种抗MXR7抗体及其应用


[0001]本专利技术涉及生物医药
，特别是涉及一种抗MXR7抗体及其应用。

技术介绍

[0002]肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是肝癌(liver cancer)中最常见的组织学亚型，是第六大常见癌症，也是导致癌症相关死亡的第四大原因。
[0003]目前，HCC的临床管理还存在相当大的挑战。只有15％
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20％的HCC病例在早期被诊断出可能适合于治愈性治疗，例如手术切除、肝脏移植、经皮乙醇注射局部消融、微波消融和射频消融等。与此同时，大多数HCC患者存在潜在的慢性肝病，这类人群的手术切除治疗充满了各种潜在并发症的可能性。此外，还有很多患者被诊断为无法手术切除的晚期HCC。HCC患者5年生存率只有大约18％，如果癌细胞已经扩散到周围组织或身体的远端部位，则5年生存率会分别降低到大约11％和5％。
[0004]磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(Glypican
‑
3,GPC3，别称MXR7)是硫酸乙酰肝素蛋白聚糖家族的一员，可在控制细胞分裂和生长调节方面发挥作用。MXR7在健康组织中很少表达，但在很多实体瘤如HCC中高度表达。在HCC中，MXR7常被用作诊断和预后的生物标志物。MXR7在肿瘤组织中的特异性表达，其可接近的表面位置以及其在肿瘤转化中涉及的各种信号传导途径中的作用使其成为包括HCC在内的几种实体瘤的免疫治疗的理想靶点。
[0005]目前，处于临床前与临床阶段的靶向MXR7的HCC疗法主要包括多肽疫苗、单克隆抗体以及嵌合抗原受体T细胞免疫疗法等。
[0006]嵌合抗原受体T细胞(Chimeric antigen receptor T cells,CAR
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T)疗法是近年来一种革命性的癌症免疫细胞疗法。通过基因转导的方法使T细胞表达嵌合抗原受体，得到具有肿瘤特异性的CAR
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T细胞，特异性地追踪识别并杀伤肿瘤细胞，达到治疗肿瘤的目的。
[0007]因此，将抗MXR7的嵌合抗原受体基因通过基因转导方法导入T细胞所制备的MXR7CAR
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T，可特异性识别表达MXR7的HCC细胞并将其杀死，从而实现其抗肿瘤作用，对靶向MXR7的免疫治疗方法具有较大的临床转化价值。

技术实现思路

[0008]鉴于以上所述现有技术的缺点，本专利技术的目的在于提供一种抗MXR7抗体及其应用，用于解决现有技术中的问题。
[0009]为实现上述目的及其他相关目的，本专利技术提供一种抗MXR7抗体，代号为B174
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V18(或MXR7
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VHH
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B174
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V18)以及B174
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V32(或MXR7
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VHH
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B174
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V32)，所述抗MXR7抗体包括重链可变区，所述抗MXR7抗体具有如下技术特征中的一个或多个；
[0010]<1>重链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的CDR
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H1；
[0011]<2>重链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID No.2所示的CDR
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H2；
[0012]<3>重链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID No.3所示的CDR
‑
H3。
[0013]本专利技术还提供一种分离的多肽，所述多肽包括跨膜域、胞内域和胞外域，所述胞外
域包括所述的抗MXR7抗体。
[0014]本专利技术还提供一种嵌合抗原受体免疫细胞，所述嵌合抗原受体免疫细胞表达膜结合的所述的分离的多肽。
[0015]如上所述，本专利技术的抗MXR7抗体及其应用，具有以下有益效果：
[0016](1)本专利技术的抗MXR7抗体仅包括重链可变区具备高亲和力和特异性，能够高效靶向MXR7抗原，且结构简单，易于制备；
[0017](2)本专利技术中，利用所述抗MXR7抗体构建嵌合抗原受体，所述嵌合抗原受体能够高效靶向MXR7；
[0018](3)本专利技术的嵌合抗原受体细胞能够特异性识别MXR7阳性肿瘤细胞，并进行高效杀伤，同时还能释放细胞因子如IFN
‑
γ因子等发挥细胞杀伤作用。
附图说明
[0019]图1A显示为Biacore检测抗MXR7抗体(GPC3
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VHH
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B174
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V18)的亲和力结果图；
[0020]图1B显示为Biacore检测抗MXR7抗体(GPC3
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VHH
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B174
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V32)的亲和力结果图；
[0021]图2显示为抗MXR7纳米抗体识别MXR7抗原的FACS检测结果图；
[0022]图3显示为靶向MXR7的嵌合抗原受体慢病毒载体质粒图谱；
[0023]图4显示为实施例4中表达抗MXR7的嵌合抗原受体结构示意图；
[0024]图5显示为T淋巴细胞的嵌合抗原受体(GPC3
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VHH
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B174
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V18和GPC3
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VHH
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B174
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V32)表达率的流式检测结果图；
[0025]图6A显示为本专利技术CAR
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T细胞对293T细胞杀伤效果图；
[0026]图6B显示为本专利技术CAR
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T细胞对Huh7
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GPC3细胞杀伤效果图；
[0027]图6C显示为本专利技术CAR
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T细胞对HepG2细胞杀伤效果图；
[0028]图7显示为CAR
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T细胞(GPC3
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VHH
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B174
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V18和GPC3
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VHH
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B174
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V32)的IFN
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γ细胞因子分泌水平图。
具体实施方式
[0029]本专利技术提供一种抗MXR7的抗体，所述抗MXR7抗体包括重链可变区，所述抗MXR7抗体具有如下技术特征中的一个或多个；
[0030]<1>重链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的CDR
‑
H1；
[0031]<2>重链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID No.2所示的CDR
‑
H2；
[0032]<3>重链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID No.3所示的CDR
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H3；
[0033]GFTLDYYA(SEQ ID N本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗MXR7抗体，其特征在于，所述抗MXR7抗体包括重链可变区，所述抗MXR7抗体具有如下技术特征中的一个或多个；<1>重链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的CDR
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H1；<2>重链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID No.2所示的CDR
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H2；<3>重链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID No.3所示的CDR
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H3。2.根据权利要求1所述的抗MXR7抗体，其特征在于，所述重链可变区还包括框架区，所述框架区包括框架区FR1～FR4，所述框架区FR1～FR4的氨基酸序列选自SEQ ID No.4～7或SEQ ID No.23中任意所示的序列。3.根据权利要求2所述的抗MXR7抗体，其特征在于，所述抗MXR7抗体包括如下特征：<1>重链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的CDR
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H1；<2>重链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID No.2所示的CDR
‑
H2；<3>重链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID No.3所示的CDR
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H3；<4>框架区FR1～FR4的氨基酸序列如SEQ ID No.4～7所示；或，<5>重链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的CDR
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H1；<6>重链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID No.2所示的CDR
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H2；<7>重链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID No.3所示的CDR
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H3；<8>框架区FR1～FR4的氨基酸序列如SEQ ID No.4、5、7、23所示。4.根据权利要求1所述的抗MXR7抗体，其特征在于，所述重链可变区的氨基酸序列如SEQID No.8或SEQ ID No.24所示。5.根据权利要求1所述的抗MXR7抗体，其特征在于，所述抗MXR7抗体为纳米抗体或单链抗体。6.权利要求1～5任一所述的抗MXR7抗体在制备或筛选肿瘤治疗药物中的用途。7.根据权利要求6所述的用途，其特征在于，所述肿瘤为表达MXR7的肿瘤；优选...

【专利技术属性】
技术研发人员：狄升蒙，石磊，赵佐瞬，余学军，范艳秋，李照润，
申请(专利权)人：华道上海生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：