唾液来源的蛋白质在脓毒症中的应用制造技术

本发明专利技术涉及一种AACT、CRP和/或MGP作为生物检测标志物在制备检测脓毒症感染者或SIRS的产品中的应用，本发明专利技术基于iTRAQ蛋白质组学分析发现脓毒症组、SIRS组、健康人群组唾液中差异表达的蛋白，筛选并通过蛋白质印迹试验、酶联免疫吸附试验进一步验证，发现唾液中潜在的脓毒症生物标志物以及全身炎症反应综合征生物标志物，可以通过检测唾液中AACT、CRP和/或MGP基因或蛋白，就可以利用无创手段检测是否为脓毒症感染者，早期诊断脓毒症和及时治疗干预对改善临床结局和降低死亡率至关重要的。干预对改善临床结局和降低死亡率至关重要的。干预对改善临床结局和降低死亡率至关重要的。

【技术实现步骤摘要】
唾液来源的蛋白质在脓毒症中的应用


[0001]本专利技术属于生物医药
，涉及唾液来源的蛋白质在脓毒症中的应用。

技术介绍

[0002]脓毒症是感染引起的严重的致命性疾病，具有高发病率、高死亡率特点，据统计，全球每年约有1900万脓毒症患者，特别是在重症医学科，约有20％的患者可感染脓毒症，90天死亡率约为35.5％。给社会带来的严重的负担。早期识别并及时干预治疗脓毒症，有助于改善脓毒症患者的预后及避免抗生素滥用导致的严重后果。且由于多种因素，如人口老龄化、侵入性操作的几率增加以及抗生素耐药微生物的不断出现，脓毒症的发病率处于上升水平。如不早期识别脓毒症并及时治疗，可发展至脓毒性休克、多器官衰竭甚至死亡。因此，早期诊断脓毒症和及时治疗干预对改善临床结局和降低死亡率至关重要。由于脓毒症非特异性体征和症状，其诊断十分复杂。血培养方法花费时间长，微生物生长到可检测水平需要6小时至5天，药物敏感度测试需要额外的24
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48小时，且在检验前可能已经经验性使用抗生素治疗，导致容易假阴性出现。
[0003]目前，关于脓毒症诊断通过临床症状及评分来实现，早期诊断脓毒症的方法存在一定的局限性。研究表明，脓毒症生物标志物在脓毒症的诊疗及评判预后中有不可忽视的作用。其中，在血液研究最为广泛，常见的生物标志物有C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)、白细胞介素等，但对于血清标志物的获取，需要进行有创操作。亟需探索唾液中脓毒症诊断的生物标志物，为脓毒症早期筛查及诊断提供新的参考值指标及无创操作方式。
专利
技术实现思路

[0004]有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种检测AACT、CRP和/或MGP的试剂在制备检测全身炎症反应疾病的产品中的应用。还提供全身性炎症反应蛋白标志物的应用。
[0005]为达到上述目的，本专利技术提供如下技术方案：
[0006]1.检测AACT、CRP和/或MGP的试剂在制备检测全身炎症反应疾病的产品中的应用。
[0007]进一步，根据所述的应用中，所述全身炎症反应疾病为脓毒症感染者或者全身炎症反应综合征感染者。
[0008]进一步，根据所述的应用中，所述检测AACT、CRP和/或MGP的试剂包括能够定量AACT、CRP和/或MGP基因mRNA的试剂，和/或能够定量AACT、CRP和/或MGP蛋白的试剂。
[0009]进一步，根据所述的应用中，所述能够定量AACT、CRP和/或MGP基因mRNA的试剂包括实时定量PCR中使用的分别特异扩增对应基因的引物；所述能够定量AACT、CRP和/或MGP蛋白的试剂包括分别特异性结合对应蛋白的抗体。
[0010]进一步，根据所述的应用中，所述产品为试剂、试剂盒或试纸。
[0011]进一步，根据所述的应用中，所述产品为AACT、CRP和/或MGP抗体、AACT、CRP和/或MGP蛋白或检测AACT、CRP和/或MGP的Elisa试剂盒。
[0012]进一步，根据所述的应用中，所述检测AACT、CRP和/或MGP为检测唾液中的AACT、
CRP和/或MGP。
[0013]2、AACT、CRP和/或MGP作为生物标志物在制备或筛选全身炎症反应疾病诊断试剂中的用途，所述全身炎症反应疾病为脓毒症感染者或者全身炎症反应综合征感染者。
[0014]3、本专利技术还提供一种判断受试者是否属于脓毒症感染者的检测产品，该检测产品中含有检测AACT、CRP和/或MGP的试剂。
[0015]进一步，所述的检测产品中，所述检测AACT、CRP和/或MGP的试剂包括能够定量AACT、CRP和/或MGP基因mRNA的试剂，和/或能够定量AACT、CRP和/或MGP蛋白的试剂。
[0016]进一步，所述的检测产品中，使用诊断AACT、CRP和/或MGP蛋白的试剂可适应胶体金法、电泳法、免疫荧光法、直接竞争ELISA法、间接竞争ELISA法、双抗体夹心ELISA法、RIA法、流式细胞仪法或免疫层析法进行AACT、CRP和/或MGP蛋白含量检测。
[0017]本专利技术的有益效果在于：本专利技术基于iTRAQ蛋白质组学分析发现脓毒症组、SIRS组、健康人群组唾液中差异表达的蛋白，筛选并通过蛋白质印迹试验(WB)、酶联免疫吸附(ELISA)试验进一步验证，发现唾液中潜在的脓毒症生物标志物以及全身炎症反应综合征生物标志物，可以通过检测唾液中AACT、CRP和/或MGP基因或蛋白，就可以利用无创手段检测是否为脓毒症感染者，早期诊断脓毒症和及时治疗干预对改善临床结局和降低死亡率至关重要的。唾液作为一种潜在的检测手段被广泛研究，具有无创及易于获得的特点，本专利技术探索出唾液中的新脓毒症生物标志物，为脓毒症早期筛查及诊断提供新的参考值指标及无创方式。
附图说明
[0018]为了使本专利技术的目的、技术方案和有益效果更加清楚，本专利技术提供如下附图进行说明：
[0019]图1为CRP、AACT在各实验组中的表达水平(WB结果)；
[0020]图2为CRP、AACT在各实验组中的表达水平(ELISA结果)；
[0021]图3为MGP在各实验组中的表达水平(WB结果)；
[0022]图4为MGP在各实验组中的表达水平半定量分析柱状图；
[0023]图5为MGP在各实验组中的表达水平(ELISA结果)。
具体实施方式
[0024]下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术的优选实施例技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。
[0025]实施例1
[0026]本研究纳入2021年8月至2023年4月于重庆医科大学附属第二医院感染科就诊的患者，及于本中心体检的健康人群。研究对象分为3个组：脓毒症组、SIRS组(systemic inflammatory response syndrome，全身炎症反应综合征)、健康对照组。该研究经重庆医科大学附属第二医院伦理委员会审批，充分告知受试者该实验研究内容、过程、实验相关风
险，并履行隐私保密义务，在患者同意的情况下，签署知情同意书。
[0027]纳入标准：1)脓毒症组：根据Sepsis3.0脓毒症诊断标准：感染+序贯器官衰竭评分(SOFA)≥2分；2)SIRS组：符合4项中2项以上即可：1、体温>38℃或<36℃，2、心率>90次/分，3、呼吸频率>20次/分或PaCO2<32mmHg，4、白细胞总数>12*10^9/L或<4*10^9/L或未成熟(杆状核)中性粒细胞比例>10％。3)健康对照组：临床表现及相关辅助检查未提示有感染指征的人群。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.检测AACT、CRP和/或MGP的试剂在制备检测全身炎症反应疾病的产品中的应用，其特征在于，所述全身炎症反应疾病为脓毒症感染者或者全身炎症反应综合征感染者。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述检测AACT、CRP和/或MGP的试剂包括能够定量AACT、CRP和/或MGP基因mRNA的试剂，和/或能够定量AACT、CRP和/或MGP蛋白的试剂。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述能够定量AACT、CRP和/或MGP基因mRNA的试剂包括实时定量PCR中使用的分别特异扩增对应基因的引物；所述能够定量AACT、CRP和/或MGP蛋白的试剂包括分别特异性结合对应蛋白的抗体。4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品为试剂、试剂盒或试纸。5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品为AACT、CRP和/或MGP抗体、AACT、CRP和/或MGP蛋白或检测AACT、CRP和/或MGP的Elisa试剂盒。6.根据权利要求1所述的应用，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡怀东，刘婷婷，杨轶轩，敖玉培，
申请(专利权)人：重庆医科大学附属第二医院，
类型：发明
国别省市：