肝硬化相关肌肉减少症的生物标志物制造技术

本发明专利技术涉及MMP

【技术实现步骤摘要】
肝硬化相关肌肉减少症的生物标志物


[0001]本专利技术属于生物医药
，涉及肝硬化相关肌肉减少症的生物标志物及其应用。

技术介绍

[0002]肌肉减少症(Sarcopenia，SP，简称肌少症)是指骨骼肌质量和力量的逐渐丧失，尽管它通常与老年人有关，但现在被认为在60岁之前就开始了。且该疾病与跌倒、骨折、身体残疾的发生风险存在显著相关性，甚至导致死亡率增加。众所周知，肌肉减少症在老年人群中更为普遍，但目前在40岁左右人体就已经开始存在肌肉质量的下降。所以，肌肉减少症产生的对生活质量、医疗保健需求、发病率和死亡率等不良影响也可影响到中年人。肌肉减少症的发生与各种风险因素有关。一方面，缺乏锻炼被认为是主要的危险因素，久坐不动是现代大多数工作人群的生活方式，这类人群可能早在50岁就开始出现肌肉纤维和力量的严重逐渐下降；另一方面，激素浓度的降低，包括生长激素、性激素和甲状腺激素，以及胰岛素样生长因子等，均可导致肌肉质量和力量的损失；此外，促炎细胞因子的组合，如肿瘤坏死因子
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α和白细胞介素
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6等也可导致肌肉损失。由于身体无法自身合成蛋白质和蛋白质摄入不足，会导致总蛋白质不足，是肌肉减少症肌肉力量严重下降的重要因素。其次，衰老会导致运动神经细胞和卫星细胞的减少，降低对运动的反应和受损肌肉纤维信号的恢复。
[0003]肝硬化相关肌肉减少症，一种继发性的肌肉减少症，尤其是在有合成代谢障碍的肝病患者中被认为是营养不良的表现，其已被证实与预测肝硬化、肝癌、肝移植患者的生存预后密切相关，但不常引起临床医生注意。近来越来越多文献认为基于CT或MRI的检查来诊断肌肉减少症是“金标准”，在临床上存在高成本、强辐射等局限性，所以探寻肝硬化相关肌肉减少症的生物标志物十分重要，尤其是无创手段的标本中的生物标志物显得更为重要。

技术实现思路

[0004]有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种肝硬化相关肌肉减少症的生物标志物及其应用。
[0005]为达到上述目的，本专利技术提供如下技术方案：
[0006]1.MMP
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7和/或RBP
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4作为生物标志物在制备或筛选肝硬化相关肌肉减少症诊断试剂中的用途。
[0007]2.检测MMP
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7和/或RBP
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4的试剂在制备检测肝硬化相关肌肉减少症的产品中的应用。
[0008]进一步，检测的试剂包括能够定量MMP
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7和/或RBP
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4基因mRNA的试剂，和/或能够定量MMP
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7和/或RBP
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4蛋白的试剂；优选同时包含检测MMP
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7和RBP
‑
4的试剂。
[0009]进一步，所述的应用中，所述能够定量MMP
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7和/或RBP
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4基因mRNA的试剂包括实时定量PCR中使用的特异扩增MMP
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7和/或RBP
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4基因的引物；所述能够定量MMP
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7和/或RBP
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4蛋白的试剂包括特异性结合MMP
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7和/或RBP
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4蛋白的抗体。
[0010]进一步，所述的应用中，所述产品为试剂、试剂盒或试纸。
[0011]进一步，所述的应用中，所述产品为MMP
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7和/或RBP
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4抗体、MMP
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7和/或RBP
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4蛋白或检测MMP
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7和/或RBP
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4的Elisa试剂盒。
[0012]进一步，所述的应用中，检测MMP
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7和/或RBP
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4的样本为受试者的唾液。
[0013]3.本专利技术的目的还在于提供一种判断受试者是否属于肝硬化相关肌肉减少症的检测产品，该检测产品中含有检测MMP
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7和/或RBP
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4的试剂。优选同时包含检测MMP
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7和RBP
‑
4的试剂。
[0014]进一步在判断受试者是否属于肝硬化相关肌肉减少症的检测产品中，所述检测MMP
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7和/或RBP
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4的试剂包括能够定量MMP
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7和/或RBP
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4基因mRNA的试剂，和/或能够定量
[0015]MMP
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7和/或RBP
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4蛋白的试剂。
[0016]进一步在判断受试者是否属于肝硬化相关肌肉减少症的检测产品中，使用诊断MMP
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7和/或RBP
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4蛋白的试剂可适应胶体金法、电泳法、免疫荧光法、直接竞争ELISA法、间接竞争ELISA法、双抗体夹心ELISA法、RIA法、流式细胞仪法或免疫层析法进行MMP
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7和/或RBP
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4蛋白含量检测。
[0017]优选的为双抗体夹心ELISA法。
[0018]本专利技术的有益效果在于：本专利技术先应用iTRAQ的方法来检测肝硬化相关肌肉减少症患者和肝硬化相关非肌肉减少症患者唾液中蛋白质组的差异，筛选出患者唾液中肌肉减少症的潜在生物标志物，最后发现MMP
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7和/或RBP
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4可以作为生物标志物，进一步制备或筛选肝硬化相关肌肉减少症诊断试剂中的应用，确定其在诊断肝硬化肌肉减少症患者的临床价值。我们同时应用蛋白印迹和Elisa技术验证肝硬化相关肌肉减少症唾液生物标志物的存在情况。以上实验方案相互检验，最大程度上提升MMP
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7和/或RBP
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4作为生物标志物的可靠性和准确性。且本专利技术所采用的样本为唾液，对于患者来说，具有简单、快速、经济、无创、低或无辐射风险性，很容易被患者广泛接受，这样在临床实践中初期，肌肉减少症的患者还未出现一般无明显的临床特征时，就可以达到早诊断早对症治疗的目标。
附图说明
[0019]为了使本专利技术的目的、技术方案和有益效果更加清楚，本专利技术提供如下附图进行说明：
[0020]图1为MMP
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7在两组实验组中的WB结果以及统计学差异；
[0021]图2为RBP
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4在两组实验组中的WB结果以及统计学差异；
[0022]图3为MMP
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7、RBP
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4的Elisa结果比较。
具体实施方式
[0023]下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术的优选实施例技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例中未注本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.MMP
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7和/或RBP
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4作为生物标志物在制备或筛选肝硬化相关肌肉减少症诊断试剂中的用途。2.检测MMP
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7和/或RBP
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4的试剂在制备检测肝硬化相关肌肉减少症的产品中的应用。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，检测的试剂包括能够定量MMP
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7和/或RBP
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4基因mRNA的试剂，和/或能够定量MMP
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7和/或RBP
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4蛋白的试剂。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述能够定量MMP
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7和/或RBP
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4基因mRNA的试剂包括实时定量PCR中使用的特异扩增MMP
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7和/或RBP
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4基因的引物；所述能够定量MMP
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7和/或RBP
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4蛋白的试剂包括特异性结合MMP
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7和/或RBP
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4蛋白的抗体。5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述产品为试剂、试剂盒或试纸。6.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述产品为MMP
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7和/或RBP
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4抗体、MMP
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【专利技术属性】
技术研发人员：胡怀东，刘婷婷，杨轶轩，郑中玲，
申请(专利权)人：重庆医科大学附属第二医院，
类型：发明
国别省市：