一种CALR基因1型及2型突变高灵敏qPCR检测方法及试剂盒技术

本发明专利技术涉及生物医学技术领域，提供了一种CALR基因1型及2型突变高灵敏qPCR检测方法及试剂盒，包括针对CALR基因1型突变、CALR基因2型突变基因位点的特异性引物及探针，引物组合包括CALR基因1型突变型引物组合、CALR基因1型野生型引物组合、CALR基因2型突变型引物组合和CALR基因2型野生型引物组合，引物探针针对两种突变的基因型进行设计，检测突变型的引物不会扩增野生型样本，特异性高；试剂盒不仅能够准确检测高丰度(1％

【技术实现步骤摘要】
一种CALR基因1型及2型突变高灵敏qPCR检测方法及试剂盒


[0001]本专利技术涉及生物医学
，尤其涉及了一种CALR基因1型及2型突变高灵敏qPCR检测方法及试剂盒。

技术介绍

[0002]骨髓增殖性肿瘤(MPN)是一组能够进展为急性白血病的慢性髓系肿瘤。研究发现PV、ET和PMF与各种基因突变相关，包括JAK2、MPL、TET2、ASXL1、IDH1、IDH2、CBL、IKZF1、LNK、EZH2、DNMT3A和CALR。2013年，Klampfl等人首次在没有JAK2、MPL突变的MPN患者中发现钙网蛋白(CALR)基因的体细胞突变。研究表明CALR基因突变发生于25％以上的ET患者和36％的PMF患者中，PV患者中CALR基因突变较罕见。到目前为止发现的所有突变都发生在外显子9中，除了少数罕见点突变外，几乎所有这些突变都是插入缺失。Klampfl等人将那些具有52bp缺失(p.L367fs*46)的突变定义为1型突变，将具有5bp TTGTC插入(p.K385fs*47)的突变定义为2型突变，而这两种类型的突变占所有CALR突本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测CALR基因1型及2型突变的引物组合，其特征在于，包括针对CALR基因1型突变、CALR基因2型突变的特异性引物及探针，所述特异性引物及探针的核苷酸序列如下：CALR基因1型突变型正向引物：5
’‑
AACAGGACGAGGAGCAGAGAA
‑3’
；CALR基因1型野生型正向引物：5
’‑
CAGGACGAGGAGCAGAGACT
‑3’
；CALR基因1型反向引物：5
’‑
GTCCAGCCCTGGAGGCAG
‑3’
；CALR基因1型探针：5
’
FAM
‑
GAGGATGAGGAGGATGAGGAGGACA
‑
TAMRA3
’
；CALR基因2型正向引物：5
’‑
CAAATGAAGGACAAACAGGACG
‑3’
；CALR基因2型突变型反向引物：5
’‑
TCCTCATCATCCTCCGACAA
‑3’
；CALR基因2型野生型反向引物：5
’‑
GTCCTCATCATCCTCCTT
‑3’
；CALR基因2型探针：5
’
FAM
‑
CTGCCTCCTCCTCCTCTTTGCG
‑
TAMRA3
’
。2.根据权利要求1所述的一种检测CALR基因1型及2型突变的引物组合，其特征在于，所述引物组合包括CALR基因1型突变型引物组合、CALR基因1型野生型引物组合、CALR基因2型突变型引物组合和CALR基因2型野生型引物组合；所述CALR基因1型突变型引物组合包括CALR基因1型突变型正向引物、CALR基因1型反向引物和CALR基因1型探针；所述CALR基因1型野生型引物组合包括CALR基因1型野生型正向引物、CALR基因1型反向引物和CALR基因1型探针；所述CALR基因2型突变型引物组合包括CALR基因2型正向引物、CALR基因2型突变型反向引物和CALR基因2型探针；所述CALR基因2型野生型引物组合包括CALR基因2型正向引物、CALR基因2型野生型反向引物和CALR基因2型探针。3.一种包括权利要求1
‑
2任一项所述的一种检测CALR基因1型及2型突变...

【专利技术属性】
技术研发人员：汝昆，陈斌，张蕾，蔺亚妮，
申请(专利权)人：天津见康华美医学诊断技术有限公司，
类型：发明
国别省市：