一种制备人促血小板生成素的方法及人促血小板生成素技术

一种制备人促血小板生成素的方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤1，制备修饰用TPO；步骤2，通过SCM

【技术实现步骤摘要】
一种制备人促血小板生成素的方法及人促血小板生成素


[0001]本专利技术涉及生物药物领域，特别是一种制备人促血小板生成素的方法以及由此获得的人促血小板生成素。

技术介绍

[0002]TPO(血小板生成素)是一种人体内源的生长因子，对巨核细胞增殖、分化、成熟起调节作用，是治疗血小板减少症的重要研究方向和途径。沈阳三生制药有限公司生产的重组TPO(商品名:特比澳)已上市多年，用于化疗相关的血小板减少症(CIT)和原发免疫性血小板减少症(ITP)，被认为是第一代促血小板生成剂。但重组TPO在人体的半衰期较短，临床需每天注射，连续给药，患者顺应性差。因此，多家制药企业在开发以长效化为目的的第二代TPO产品。主要长效化的技术包括PEG修饰和融合表达两种。前者如Amgen公司将TPO蛋白N端含163个氨基酸的活性结构域进行PEG修饰，修饰后的蛋白显著延长了半衰期，在临床试验上实现了10天给药一次。但由于该活性结构域采用大肠杆菌表达，缺少糖基化修饰，在人体中产生了中和抗体，并且中和抗体与内源TPO发生交叉反应，造成严重的副作用，最终导致临床试验失败。融合表达本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种制备人促血小板生成素的方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤1，制备修饰用TPO；步骤2，通过SCM
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PEG40K对TPO进行修饰反应，其中SCM
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PEG40K为带有活性基团为琥珀酰亚胺乙醇酯(SCM)的PEG作为修饰剂，其分子量为40kDa，设置TPO溶液的蛋白质浓度为0.5
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2.0mg/ml，设置TPO与SCM
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PEG40K的摩尔比为1:3
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1:20，并且将反应时间设定为2
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18小时；步骤3，对步骤2所获得的TPO
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PEG40KSCM产物进行纯化。2.根据权利要求1所述的制备人促血小板生成素的方法，其特征在于，在所述步骤3中包括步骤3.1阴离子交换层析；步骤3.2将阴离子交换层析的洗脱液进一步用分子筛层析。3.根据权利要求2所述的制备人促血小板生成素的方法，其特征在于，所述步骤1包括：合成TPO的编码...

【专利技术属性】
技术研发人员：薛剑峰，
申请(专利权)人：北京康禾科创生物科技开发有限公司，
类型：发明
国别省市：