带有伊喜替康和C-lock定点偶联基团的抗体偶联中间体、偶联方法及抗体偶联药物技术

本发明专利技术公开了一种带有伊喜替康和C

【技术实现步骤摘要】
带有伊喜替康和C
‑
lock定点偶联基团的抗体偶联中间体、偶联方法及抗体偶联药物


[0001]本专利技术属于医药
，涉及一种抗体偶联药物，具体涉及一种带有伊喜替康和C
‑
lock定点偶联基团的抗体偶联中间体、偶联方法及抗体偶联药物。

技术介绍

[0002]抗体药物偶联物(Antibody drug conjugate，简称ADC)是一类新型的抗肿瘤药物，其原理是将细胞毒素连接在抗体上，通过抗体对癌细胞表面特定抗原的识别，通过内吞作用进入癌细胞，从而将细胞毒素运输到靶点，达到靶向性治疗恶性肿瘤的目的。ADC与传统的小分子抗肿瘤药物相比，因能借助抗体的靶向识别性与毒素的高活性，故更具备特异性和有效性。
[0003]ADC包括三个不同的组成部分，即抗体、连接子和细胞毒素。抗体实现靶向性，连接子保证在ADC在血液转运过程中的稳定性，而到达作用靶点后，毒素发挥对癌细胞的杀伤作用。根据作用机制的不同，适用于ADC的毒素分为微管类抑制剂(Microtubule inhibitors)，DNA损伤剂(DNA damaging agents)和RNA聚合酶抑制剂(RNA polymerase inhibitors)等。目前，以Monomethyl auristatin E (MMAE)为代表的微管蛋白抑制剂是应用最为广泛的Payload。在DNA损伤剂中喜树碱(Camptothecin，CPT)类是值得关注的，CPT通过作用于DNA拓扑异构酶I抑制DNA的复制和转录，导致肿瘤细胞死亡，但由于其水溶性差，生物利用度低，因此，临床应用有限。而CPT类衍生物伊立替康(CPT
‑
11)的活性代谢产物7
‑
乙基
‑
10
‑
羟基喜树碱(SN
‑
38)因生物利用度高、抗肿瘤活性强，在ADC药物中得到广泛应用，如Sacituzumab govitecan和Labetuzumab govitecan均采用SN
‑
38作为有效载荷。更值得一提的是，Exatecan甲磺酸盐是比伊立替康的活性代谢物SN
‑
38更有效的DNA拓扑异构酶I(TOP1)抑制剂，与伊立替康相比，活性提高10倍，且DXd在血液中的半衰期显著缩短，有助于减少毒副作用的产生。目前已成功用于新一代ADC药物Enhertu(T
‑
DXd)、Dato
‑
DXd等的开发。连接子方面，主要应用的为可裂解型，如缬氨酸
‑
瓜氨酸(Valine
‑
Citriline)和环己基甲酸(MCC)，经过溶酶体水解后，药物仍然具有活性，并通过连接区与某个氨基酸残基结合在一起。
[0004]传统的ADC利用抗体赖氨酸的氨基或打开链间二硫键获得的半胱氨酸的巯基进行偶联，赖氨酸的氨基与活化的羧酸酯连接子通过酰胺键连接，半胱氨酸的巯基与马来酰亚胺基团反应。一个抗体分子包含了80
‑
90个赖氨酸，偶联可能会发生在将近40个不同赖氨酸残基上，打开链间二硫键会得到多个半胱氨酸残基，同时破坏了抗体分子的完整性，因此传统的ADC是高度异质混合物，其均一性差(即药物与抗体的比率(DAR)为1
‑
8)，稳定性低，影响药效。ADC药物不同DAR值的成分通常表现出完全不同的性质，比如低DAR值(1
‑
2)的ADC通常药效较差，高DAR值(6
‑
8)的ADC通常容易出现聚集情况，同时高DAR值的ADC更容易出现体内循环过程中的小分子脱落，带来体内毒性。因此不均一的ADC的通常有更严重的药物安全问题。
[0005][0006]MC
‑
GGFG
‑
Dxd是一种常用的ADC药物连接子，该分子通过马来酰亚胺基团(MC)与抗体上的半胱氨酸的巯基反应，将伊喜替康偶联到抗体上。大多数抗体具有4对链间二硫键，打开可以获得8个半胱氨酸巯基，如果全部偶联上药物小分子MC
‑
GGFG
‑
Dxd，因为较强的疏水性会导致抗体多聚体明显，并且DAR为8时抗体的链间二硫键全被破坏，会破坏抗体的完整性，所以第一三共(Daiichi Sankyo)的一款ADC药物DS
‑
1062采用的平均DAR值为4的偶联比例。但是因为随机偶联的不可控性，ADC药物通常是DAR值2,4,6,8的混合物，如图27所示的HIC
‑
HPLC就是典型的平均DAR值为4的随机偶联ADC的峰型。并且由于链间二硫键被打开，破坏了抗体的完整性，导致ADC药物稳定性差。稳定性差也会带来药物安全问题。
[0007]
技术实现思路

[0008]有鉴于此，本专利技术目的是为了克服现有技术的不足而提供一种带有伊喜替康和C
‑
lock定点偶联基团的抗体偶联中间体、偶联方法及抗体偶联药物，该抗体偶联药物中间体用伊喜替康(Exatecan)作为细胞毒素，通过二甲基溴代喹恶啉活性反应基团且为C
‑
lock定点偶联基团，起到将伊喜替康定点偶联到抗体上，从而有效提高ADC药物的均一性和稳定性，进而显著提高抗体对肿瘤细胞的灭杀效果。
[0009]为达到上述目的，本专利技术采用的技术方案是：一种抗体偶联药物中间体，它的化学结构通式为：
[0010][0011]其中，为二甲基溴代喹恶啉基团且为C
‑
lock定点偶联基团，起到连接抗体的作用；为伊喜替康(Exatecan)，起到杀伤肿瘤细胞的
作用；Linker结构包含可被酶切的多肽结构，起到连接的作用，同时Linker部分能够在肿瘤细胞内被酶切释放出细胞毒素分子。Linker的结构包括但不限于以下结构：
[0012][0013][0014]优选的，抗体偶联药物中间体包括但不限于如下化学结构：
[0015][0016]本专利技术的又一目的在于提供一种上述抗体偶联药物中间体的偶联方法为：喹恶啉结构上有两个相邻的溴甲基可以同时与打开二硫键的2个巯基发生偶联反应，从而把细胞毒素偶联到抗体上，细胞毒素为伊喜替康(Exatecan)，起到杀伤肿瘤细胞的作用。
[0017]优选的，所述偶联反应机理如下：
[0018][0019]优选的，所述抗体偶联药物中间体的定点偶联，包括：抗体还原打开的四对二硫键分别定点偶联上一个SET0569的小分子，得到DAR为4的均一的ADC药物，并且打开的二硫键被小分子的两个侧链重新连接，抗体重
‑
重链和轻
‑
重链再次被化学键连接，从而提高抗体药物的稳定性。下图是SET0569定点偶联的示意图：
[0020][0021]本专利技术的再一目的在于提供一种上述带有伊喜替康和C
‑
lock定点偶联基团的抗体偶联中间体通过偶联制成的抗体偶联药物，其结构通式如下：
[0022][0023]其中，A为抗体或本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种带有伊喜替康和C
‑
lock定点偶联基团的抗体偶联中间体，其特征在于，它的化学结构通式为：其中，为二甲基溴代喹恶啉基团且为C
‑
lock定点偶联基团，起到连接抗体的作用；为伊喜替康，起到杀伤肿瘤细胞的作用；Linker结构包含可被酶切的多肽结构，起到连接的作用，同时Linker部分能够在肿瘤细胞内被酶切释放出细胞毒素分子；Linker的结构包括但不限于以下结构：Linker的结构包括但不限于以下结构：
2.根据权利要求1所述带有伊喜替康和C
‑
lock定点偶联基团的抗体偶联中间体，其特征在于，所述抗体偶联药物中间体包括但不限于如下化学结构：3.根据权利要求1所述带有伊喜替康和C
‑
lock定点偶联基团的抗体偶联中间体，其特征在于，所述抗体偶联药物中间体的偶联方法包括：喹恶啉结构上有两个相邻的溴甲基可以同时与抗体打开二硫键的2个巯基发生偶联反应，从而把细胞毒素偶联到抗体上，细胞毒素为伊喜替康，起到杀伤肿瘤细胞的作用。4.根据权利要求1所述带有伊喜替康和C
‑
lock定点偶联基团的抗体偶联中间体，其特征在于，所述抗体偶联药物中间体的定点偶联，包括：抗体还原打开的二硫键分别定点偶联上一个带二甲基溴代喹恶啉的小分子，得到DAR值均一的抗体偶联药物，并且打开的二硫键被小分子的两个侧链重新连接，抗体重
‑
重链和轻
‑
重链再次被化学键连接，从而提高抗体药物...

【专利技术属性】
技术研发人员：许喆，王威威，陈雨，周苏清，莫永琪，黄萍，裴良良，张晓楠，李海泓，叶正义，
申请(专利权)人：联宁苏州生物制药有限公司，
类型：发明
国别省市：