一种包括抗间皮素scFv的嵌合抗原受体及其用途制造技术

本发明专利技术涉及一种特异性结合间皮素的抗

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】一种包括抗间皮素scFv的嵌合抗原受体及其用途


[0001]本专利技术涉及一种特异性结合间皮素的抗
‑
间皮素嵌合抗原受体及其用途。

技术介绍

[0002]最近，如免疫检查点抑制剂、CAR
‑
T细胞治疗剂等的免疫抗癌剂已证明其在多种癌症中的有效性，但据报道，实体癌对这些新型免疫抗癌剂反应不明显。据推测，这是因为围绕肿瘤的纤维组织干扰免疫治疗反应，使药物输送变得困难。因此，对如下研究的需求正在增加，即，作为具有特异性且更有效的CAR
‑
T癌症治疗方法，可以开发靶向在实体癌细胞表面特异性过表达的蛋白作为癌抗原的抗体，可以使用该抗体有效治疗实体癌。
[0003]另一方面，间皮素为一种通过糖基磷脂酰肌醇(GPI)结构域锚定在细胞表面的糖蛋白，正常情况下其在人体的腔(cavity)和围绕内部器官的间皮(mesothelium)中有限地低表达，但已知其在胰腺癌、间皮瘤、卵巢癌以及非小细胞肺癌等癌症中大量表达。

技术实现思路

[0004]【技术问题】
[0005]本专利技术的一方面提供一种抗
‑
间皮素抗体或其抗原结合片段。
[0006]本专利技术的另一方面提供一种分离的核酸，其编码所述抗
‑
间皮素抗体或其抗原结合片段。
[0007]本专利技术的另一方面还提供一种载体，其包括所述分离的核酸。
[0008]本专利技术的另一方面还提供一种分离的宿主细胞，其用所述载体转化。
[0009]本专利技术的另一方面还提供一种抗
‑
间皮素抗体的制备方法，其包括：培养所述分离的宿主细胞以表达抗体。
[0010]本专利技术的另一方面还提供一种嵌合抗原受体，其包括抗原结合结构域、铰链(hinge)结构域、跨膜结构域和细胞内信号传导结构域。
[0011]本专利技术的另一方面还提供一种多核苷酸，其编码所述嵌合抗原受体。
[0012]本专利技术的另一方面还提供一种载体，其包括所述多核苷酸。
[0013]本专利技术的另一方面还提供一种分离的细胞，其用所述载体转化。
[0014]本专利技术的另一方面还提供一种药物组合物，其包括所述分离的细胞；所述细胞的医药用途；和用于预防或治疗癌症的方法，其包括：向个体施用治疗有效量的所述细胞。
[0015]下面，结合所附权利要求书和附图进行详细说明，以使本申请的其他目的和优点更加清楚。对于本说明书中未记载的内容，本申请所属领域或相似
的技术人员可以充分认识和推断，因此不再赘述。
[0016]【技术方案】
[0017]本申请所公开的每个描述和实施方式，也可以适用于每个其他描述和实施方式。也就是说，本申请所公开的各种元件的所有组合都属于本申请的范围。另外，本申请的范围不应被解释为受以下具体细节的限制。
[0018]一方面提供一种抗
‑
间皮素抗体或其抗原结合片段。
[0019]所述“间皮素(mesothelin，MSLN)”是一种细胞表面糖蛋白(NCBI基因ID：10232)，总氨基酸长度为630aa，在某些细胞，尤其是特定肿瘤细胞中选择性表达，间皮素蛋白的氨基酸序列如下所示。
[0020][0021]间皮素在正常间皮细胞(mesothelial cells)中低表达，但在实体癌(实体瘤)中高表达，在食道癌(esophageal cancer)、乳腺癌(breast cancer)、三阴性乳腺癌(triple
‑
negative breast cancer，TNBC)、胃癌(gastric cancer)、胆管癌(cholangiocarcinoma)、胰腺癌(pancreatic cancer)、结肠癌(colon cancer)、肺癌肺癌(lung cancer)、胸腺癌(thymic carcinoma)、间皮瘤(mesothelioma)、卵巢癌(ovarian cancer)、子宫内膜癌(endometrial cancer)、宫颈癌(cervical cancer)、子宫浆液性癌(uterin serous carcinoma，USC)和小儿急性髓性白血病(acute myeloid leukemia，AML)等中证实了过表达(Cancer Discov.2016Feb；6(2)：133
‑
46.；J Reprod Immunol.2020；139；103115.；Gynecol Oncol.2007；105(3)：563
‑
570.；Eur J Haematol.2007；79(4)：281
‑
286.)。
[0022]在一实施例中，通过噬菌体展示抗体文库淘选，MSLN3被发现是一种特异性结合靶抗原即间皮素的抗体。
[0023]如本文所用，术语“抗体”是指选择性地作用于抗原而参与体内免疫的蛋白质的总称，其种类没有特别限定。抗体的重链和轻链具有识别包括可变区的表位的抗原结合位点，并且抗原特异性根据可变区序列的变化而出现。抗原结合位点的可变区分为可变性低的框架区(Framework region：FR)和可变性高的互补决定区(Complementarity determining region，CDR)，并且重链和轻链均具有分为CDR1、CDR2、CDR3的三个CDR位点和四个FR位点。每条链的CDR典型始于N
‑
末端且依次命名为CDR1、CDR2、CDR3，并且通过特定CDR所在的链来识别。
[0024]如本文所用，术语“互补决定区”是指在抗体的可变区中赋予与抗原结合特异性的位点。
[0025]如本文所用，术语“表位”是指抗体可特异性结合的抗原分子内的特定立体分子结构。
[0026]所述抗体包括所有单克隆抗体、多特异性抗体、人抗体、人源化抗体和嵌合抗体(例如，人源化鼠抗体)。另外，所述抗体可以包括双链抗体、三链抗体以及四链抗体。
[0027]如本文所用，术语“抗体”包括具有抗原结合能力的抗体的“抗原结合片段”或“抗体片段”。所述抗原结合片段可以选自包括一个或多个互补决定区的抗体片段，例如，scFv、(scFv)2、scFv
‑
Fc、Fab、Fab
’
以及F(ab
’
)2。在抗体片段中，Fab为具有轻链和重链的可变区、
轻链的恒定区和重链的第一恒定区(CH1)的结构，并且其具有一个抗原结合位点。Fab
’
在重链CH1结构域的C
‑
末端处具有包括一个或多个半胱氨酸残基的铰链区(hinge region)，从这一点上来说其不同于Fab。F(ab
’
)2抗体通过Fab
’
铰链区的半胱氨酸残基之间的二硫键生成。Fv为仅具有重链可变区和轻链可变区的最小的抗体片段。在双链Fv(two
‑
chain Fv)中，重链可变区和轻链可变区通过非共本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.抗
‑
间皮素抗体或其抗原结合片段，其包括：重链可变区，其包括含有由SEQ ID NO：1组成的氨基酸序列的重链CDR1、含有由SEQ ID NO：2组成的氨基酸序列的重链CDR2和含有由SEQ ID NO：3组成的氨基酸序列的重链CDR3；和轻链可变区，其包括含有由SEQ ID NO：4组成的氨基酸序列的轻链CDR1、含有由SEQ ID NO：5组成的氨基酸序列的轻链CDR2和含有由SEQ ID NO：6组成的氨基酸序列的轻链CDR3。2.根据权利要求1所述的抗
‑
间皮素抗体或其抗原结合片段，其包括：重链可变区，其含有由SEQ ID NO：7组成的氨基酸序列。3.根据权利要求1所述的抗
‑
间皮素抗体或其抗原结合片段，其包括：轻链可变区，其含有由SEQ ID NO：8组成的氨基酸序列。4.根据权利要求1所述的抗
‑
间皮素抗体或其抗原结合片段，其包括：重链可变区，其含有由SEQ ID NO：7组成的氨基酸序列；和轻链可变区，其含有由SEQ ID NO：8组成的氨基酸序列。5.分离的核酸，其编码根据权利要求1至4中任一项的抗体或其抗原结合片段。6.载体，其包括根据权利要求5的分离的核酸。7.分离的宿主细胞，其用根据权利要求6的载体转化。8.抗
‑
间皮素抗体的制备方法，其包括：培养根据权利要求7的宿主细胞以表达抗体。9.嵌合抗原受体，其包括抗原结合结构域、铰链结构...

【专利技术属性】
技术研发人员：安宰亨，韩那炅，
申请(专利权)人：细胞基因股份公司，
类型：发明
国别省市：