CD4TEMRA在诊断孤独症共病癫痫中的应用制造技术

本发明专利技术属于生物技术领域，公开了CD4 TEMRA在诊断孤独症共病癫痫中的应用，具体公开了一种用于诊断或辅助诊断孤独症共病癫痫的细胞亚群，所述细胞亚群为CD4 TEMRA，所述CD4 TEMRA为CD3

【技术实现步骤摘要】
CD4 TEMRA在诊断孤独症共病癫痫中的应用


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及CD4 TEMRA在诊断孤独症共病癫痫中的应用。

技术介绍

[0002]孤独症谱系障碍(Autism Spectrum Disorder，ASD)是一种严重的神经发育障碍，其核心特征表现为社交互动和沟通障碍，并存在限制性和重复性行为，多见于男性患者。癫痫(epilepsy,EP)是常见的神经系统疾病之一，其特征是具有癫痫发作的持久倾向，并伴有神经生物学、认知、心理和社会后果。ASD具有高度异质性，其缺陷和行为的程度可能差异很大，这给准确治疗带来了极大挑战。根据全球疾病负担(GBD)纳入的国家中的流行病学研究估计，世界上有0.76％的儿童患有孤独症。孤独症严重影响学习和社会功能，并可能持续到成年，这对个人、家庭和公共卫生的影响都是巨大的。
[0003]自1943年孤独症被Kanner首次描述以来，人们对孤独症的认识已经有了极大的提升，包括孤独症的环境风险因素、遗传因素、神经生物学、分子病理生理学等，但对于孤独症的明确致病机制尚不清楚。孤独症的诊断标准是基于DSM
‑
5(Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders
‑
fifth edition)的行为学诊断。临床工作中有些结构化的诊断访谈和观察性评估可辅助用于孤独症的早期识别、筛查和诊断。但工具和培训的费用、完成这些评估所需的时间以及需要大量的培训才能可靠地使用这些工具等因素限制了它们的广泛使用。孤独症的治疗包括药物治疗和行为干预。被批准的治疗ASD的药物，主要针对孤独症相关共病，如多动、易怒等症状，而在改善其核心症状方面效果有限。另外，个体之间和个体内部存在高度的异质性和复杂性，也导致干预的潜在受益同样复杂且异质。
[0004]ASD与癫痫(epilepsy，EP)常常同时发生，ASD共病癫痫可认为是ASD中的一个亚群，相较于他们各自在人群中的患病率，他们彼此之间的共患率明显更高，这种共存可能表明存在一种共同的神经发生机制。

技术实现思路

[0005]本专利技术第一方面的目的，在于提供一种用于诊断或辅助诊断孤独症共病癫痫的细胞亚群。
[0006]本专利技术第二方面的目的，在于提供本专利技术第一方面的细胞亚群的制备方法。
[0007]本专利技术第三方面的目的，在于提供本专利技术第一方面的细胞亚群在制备用于诊断或辅助诊断孤独症共病癫痫的产品或筛选治疗孤独症共病癫痫的候选药物中的应用。
[0008]本专利技术第四方面的目的，在于提供检测本专利技术第一方面的细胞亚群含量的物质的应用。
[0009]本专利技术第五方面的目的，在于提供一种非疾病诊断或治疗目的的本专利技术第一方面的细胞亚群的检测方法的应用。
[0010]本专利技术第六方面的目的，在于提供降低本专利技术第一方面的细胞亚群在血液中的含量的物质在制备药物中的应用。
[0011]为了实现上述目的，本专利技术所采取的技术方案是：
[0012]本专利技术的第一个方面，提供一种用于诊断或辅助诊断孤独症共病癫痫的细胞亚群，所述细胞亚群为CD4 TEMRA，所述CD4 TEMRA为CD3
+
CD4
+
CD45RA
+
CCR7
‑
CD27
‑
T细胞。
[0013]本专利技术的第一个方面，提供本专利技术第一方面的细胞亚群的制备方法，包括以下步骤：使血液中的细胞群与结合剂接触；分选与所述结合剂结合的细胞，得到；所述物质包括标记不同荧光的用于检测CD4 TEMRA的抗体：CD3抗体、CD4抗体和CD45RA抗体。
[0014]优选地，将血液与淋巴细胞分离液混合，裂解，加入结合剂，分选与所述结合剂结合的细胞，得到。
[0015]优选地，所述分选包括通过荧光激活细胞分选、磁性细胞分选、底物辅助细胞分选、激光介导切割、荧光测定法、流式细胞术或显微技术进行分选。
[0016]优选地，通过流式细胞术分选与所述结合剂结合的细胞。
[0017]本专利技术的第三个方面，提供本专利技术第一方面的细胞亚群在(1)～(3)中的应用；
[0018](1)制备用于诊断或辅助诊断孤独症共病癫痫的产品；
[0019](2)筛选治疗孤独症共病癫痫的候选药物；
[0020](3)制备用于孤独症共病癫痫预后评估的产品。
[0021]优选地，所述诊断或辅助诊断孤独症共病癫痫是通过检测所述细胞亚群的数量比例实现。
[0022]本专利技术的第四个方面，提供检测本专利技术第一方面的细胞亚群的物质在(4)～(6)中的应用；
[0023](4)制备用于诊断或辅助诊断孤独症共病癫痫的产品；
[0024](5)筛选治疗孤独症共病癫痫的候选药物；
[0025](6)制备用于孤独症共病癫痫预后评估的产品。
[0026]优选地，所述物质用于检测本专利技术第一方面的细胞亚群的含量。
[0027]优选地，所述细胞亚群的含量是指所述细胞亚群在外周血单个核细胞中的数量百分比。
[0028]优选地，所述物质包括标记不同荧光的用于检测CD4 TEMRA的抗体：CD3抗体、CD4抗体、CD45RA抗体、CCR7抗体和CD27抗体。
[0029]优选地，所述CD3抗体的荧光标记为Pe
‑
cy7。
[0030]优选地，所述CD4抗体的荧光标记为BUV496。
[0031]优选地，所述CD45RA抗体的荧光标记为BV510。
[0032]优选地，所述CCR7抗体的荧光标记为APC
‑
R700。
[0033]优选地，所述CD27抗体的荧光标记为BV650。
[0034]优选地，所述物质还包括裂解外周血红细胞的红细胞裂解液、磷酸盐缓冲溶液。
[0035]优选地，所述产品包括试剂和/或试剂盒。
[0036]本专利技术的第五个方面的，提供一种非疾病诊断或治疗目的的本专利技术第一方面的细胞亚群的检测方法的应用，所述检测方法包括如下步骤：
[0037]1)待处理外周血样本，形成单细胞悬液；
[0038]2)将步骤1)的单细胞悬液与加入不同荧光标记的抗体：CD3抗体、CD4抗体、CD45RA抗体、CCR7抗体和CD27抗体混合孵育；
[0039]3)分选，得到所述细胞亚群的数据。
[0040]优选地，所述CD3抗体的荧光标记为Pe
‑
cy7。
[0041]优选地，所述CD4抗体的荧光标记为BUV496。
[0042]优选地，所述CD45RA抗体的荧光标记为BV510。
[0043]优选地，所述CCR7抗体的荧光标记为APC
‑
R700。
[0044]优选地，所述CD27抗体的荧光标记为BV650。
[0045]优选地，所述分选包括通过荧光激活细胞分选、磁性细本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于诊断或辅助诊断孤独症共病癫痫的细胞亚群，所述细胞亚群为CD4 TEMRA，所述CD4 TEMRA为CD3
+
CD4
+
CD45RA
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CCR7
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CD27
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T细胞。2.权利要求1所述细胞亚群的制备方法，包括以下步骤：使血液中的细胞群与结合剂接触；分选与所述结合剂结合的细胞，得到；所述结合剂包括标记不同荧光的抗体：CD3抗体、CD4抗体和CD45RA抗体。3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述分选包括通过荧光激活细胞分选、磁性细胞分选、底物辅助细胞分选、激光介导切割、荧光测定法、流式细胞术或显微技术进行分选。4.权利要求1所述细胞亚群在(1)～(3)中的应用；(1)制备用于诊断或辅助诊断孤独症共病癫痫的产品；(2)筛选治疗孤独症共病癫痫的候选药物；(3)制备用于孤独症共病癫痫预后评估的产品。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述诊断或辅助诊断孤独症共病癫痫是通过检测所述细胞亚群的数量比例实现。6.检测权利要求1所述细胞亚群的物质在(4)～...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈文雄，刘雨丰，冯芳媚，
申请(专利权)人：广州市妇女儿童医疗中心，
类型：发明
国别省市：