一种TIL细胞的快速培养方法及应用技术

本发明专利技术涉及TIL细胞培养技术领域，具体公开了一种TIL细胞的快速培养方法，包括以下步骤：S1：无菌环境下将肿瘤组织平均分成2份备用；S2、将两块肿瘤组织分别置于20

【技术实现步骤摘要】
一种TIL细胞的快速培养方法及应用


[0001]本专利技术涉及TIL细胞培养
，具体涉及一种TIL细胞的快速培养方法及应用。

技术介绍

[0002]免疫细胞治疗时肿瘤治疗的一种重要手段，其中CAR
‑
T和TCR
‑
T在临床上已取得了较好的疗效，但这类细胞存在脱靶效应、细胞因子释放综合征，以及肿瘤微环境的屏障和免疫逃逸等复杂机制，限制了这类细胞在实体瘤的临床应用。而TIL也是一种肿瘤抗原特异性的淋巴细胞，具有特异、高效、副作用小的优点。然而TIL细胞由于来源受限，培养难度高、培养周期长，限制了TIL在实体瘤中的应用。
[0003]因此，如何培养出一种适用于大量扩增、具有高效肿瘤杀伤能力的TIL细胞，是目前TIL细胞临床应用面临的挑战，本专利技术针对现有技术的不足，提供了一种快速培养TIL细胞的方法。

技术实现思路

[0004]针对现有技术的缺陷，本专利技术的目的是提供一种TIL细胞的快速培养方法及应用，以解决上述
技术介绍
中提出的问题。
[0005]本专利技术解决技术问题采用本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种TIL细胞的快速培养方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：无菌环境下将肿瘤组织平均分成2份备用；S2、将两块肿瘤组织分别置于20
‑
30ml肿瘤组织消化液中，37℃水浴1h；S3、等体积终止消化液终止消化；S4、2000
‑
2500rpm/min离心10min，去上清，生理盐水洗涤2次；S5、将其中一管沉淀用2mlX
‑
Vivo15(04
‑
744)重悬，
‑
80℃冻存12小时以上，37℃快速复融，重复至少8次，4℃保存备用；S6、另一管沉淀用1mlX
‑
Vivo15(04
‑
744)重悬，加入5％血清替代物(HELIOS)置于24孔板中37℃，5％CO2培养箱中培养；S7、6
‑
8天后将细胞悬液转移到6孔板中，同时加入1mlX
‑
Vivo15(04
‑
744)，S5中制备的肿瘤细胞裂解液，5000
‑
6000IU/ml的IL2，2000IU/ml IL7 30ng/ml的anti
‑
CD3，10
‑
30ng/ml的CD28，10
‑
30ng/ml的CD2，5％血清替代物和10mg PD
‑
1抗体，继续培养；S8、12
‑
14天后CD8磁珠分选，将CD8+细胞转入T25瓶中同时加入3
‑5×
106个Feeder细胞，继续培养；S9、每2
‑
3天补加适量X
‑

【专利技术属性】
技术研发人员：王苗苗，朱锋林，刘光兴，李纬国，
申请(专利权)人：上海君益禾生物医学科技有限公司，
类型：发明
国别省市：