枸杞糖肽的抗胶质瘤用途制造技术

本发明专利技术涉及一种枸杞糖肽用途，具体为枸杞糖肽的抗胶质瘤用途，属于医药技术领域，包括枸杞糖肽在制备抑制胶质瘤细胞增殖的制剂中的应用，枸杞多糖是枸杞子的一种提取物，其多种生物活性已经被大量报道，枸杞糖肽是从枸杞多糖的进一提取的糖缀合物。胶质瘤为原发性恶性中枢神经系统肿瘤，SREBP1c及其下游基因控制着胶质瘤细胞的脂质合成代谢，本发明专利技术通过实验表明，枸杞糖肽的靶向抑制SREBP1c的表达，枸杞糖肽抑制胶质瘤脂质合成代谢，枸杞糖肽抑制胶质瘤细胞增殖、迁移、侵袭并促进其凋亡。侵袭并促进其凋亡。侵袭并促进其凋亡。

【技术实现步骤摘要】
枸杞糖肽的抗胶质瘤用途


[0001]本专利技术涉及一种枸杞糖肽用途，具体为枸杞糖肽的抗胶质瘤用途，属于医药


技术介绍

[0002]枸杞子作为一种传统中药已被沿用千年，具安全性良好，其提取物枸杞多糖枸杞多糖具有多种生物活性在许多领域被多次报道，枸杞糖肽是枸杞多糖的进一步提取物，多糖糖链通过糖苷链寡肽与连接，得到5种糖缀合物LbGP1
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LbGP5，他们统称为枸杞糖肽。
[0003]胶质瘤起源于胶质细胞，是最常见的颅内恶性肿瘤，每年发病率约为3
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6.4/10万，胶质母细胞瘤(Glioblastoma,GBM)是最常见的原发性恶性中枢神经系统肿瘤，具有侵袭性高、易复发等特点，胶质瘤一直是神经外科领域的顽固性疾病，尽管多年来对胶质瘤的临床治疗策略进行了大量的研究和改进，包括手术、化疗、放疗、靶向治疗等。然而，患者的预后并没有得到显著改善，总体中位生存期约为14个月，少于10％的患者生存期超过2年，根据胶质瘤发生和生长的相关机制，寻找相对特异性的靶点，改善胶质瘤患者的预后和疗效，是十分迫切的，多个研究表明肿瘤的增殖、迁移、侵袭、凋亡与脂质合成代谢有着直接关联，细胞膜的绝大部分构成成分是磷脂，细胞增殖依赖于磷脂、胆固醇等脂类物质的合成。而肿瘤的生长的脂质来源绝大部多数都来源于脂质从头合成代谢途径，而SREBP1c是脂质合成代谢中的关键基因，他及其下游基因FASN、SCD、ACACA等控制着脂质从头合成代谢，目前已有多个研究表明脂质合成代谢与细胞增殖密切相关，而枸杞糖肽的生物学活性相关研究还较少，为弥补此缺陷，本专利技术对枸杞糖肽的抗胶质瘤活性进行了研究。
[0004]有鉴于此，特提出本专利技术。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的就在于为了解决上述问题而提供一种枸杞糖肽的抗胶质瘤用途，具有明显抑制胶质瘤脂质合成代谢的能力。
[0006]本专利技术首次利用体内外实验表明，发现枸杞糖肽具有良好的抗胶质瘤细胞增殖的作用，采用代谢组学方法明确枸杞糖肽具有显著的抑制胶质瘤脂质从头合成代谢的能力，同时采用WB、PCR的方法明确SREBP1c为枸杞糖肽作用的靶基因之一。
[0007]进一步的，胶质瘤为原发性恶性中枢神经系统肿瘤，所述枸杞糖肽的靶向基因为SREBP1c，枸杞糖肽具有抑制胶质瘤脂质合成代谢的能力。
[0008]进一步的，枸杞糖肽在制备抑制原代胶质瘤细胞增殖能力制剂中的应用，实现对胶质瘤细胞增殖的抑制。
[0009]进一步的，枸杞糖肽在制备抑制原代胶质瘤细胞迁移能力制剂中的应用，通过实验表明，实现对胶质瘤细胞迁移能力的抑制。
[0010]进一步的，枸杞糖肽在制备抑制原代胶质瘤细胞侵袭能力制剂中的应用，实现对胶质瘤细胞侵袭能力的抑制。
[0011]进一步的，枸杞糖肽在制备促进原代胶质瘤细胞凋亡能力制剂中的应用，提高胶质瘤细胞的凋亡能力。
[0012]所述原代胶质瘤细胞取自胶质母细胞瘤病人和低级别胶质瘤病人，
[0013]本专利技术的技术效果和优点：通过实验表明，枸杞糖肽具有明显抑制胶质瘤脂质合成代谢的能力，枸杞糖肽具有抑制胶质瘤细胞增殖、迁移、侵袭并促进其凋亡的能力。
附图说明
[0014]图1为本专利技术的实验流程示意图；图2为本专利技术QD值变化示意图；图3为本专利技术24小时后显微镜下细胞迁移示意图；图4为本专利技术细胞迁移结果示意图；图5为本专利技术结晶紫染色结果示意图；图6为本专利技术细胞侵袭结果示意图；图7为本专利技术BD流式细胞仪分析显示示意图；图8为本专利技术细胞凋亡结果示意图；图9为本专利技术移植细胞28天后第二次活体成像示意图；图10为本专利技术1000多种脂类物质高通量分析结果示意图；图11为本专利技术内参引物序列结果示意图；图12为本专利技术image J软件灰度值分析结果示意图。
[0015]图13为本专利技术制剂类别示意图。
[0016][0017][0018][0019][0020][0021][0022][0023][0024][0025]具体实施方式
[0026]下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0027]请参阅图1
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13所示，本专利技术提供了枸杞糖肽在制备抑制胶质瘤细胞生长的制剂中的应用，本专利技术中枸杞糖肽糖含量为70％,ArA:GAl:GlC＝2.5:1.0:1.0(摩尔比)，关于其他具体制备、分离、提纯方法可见专利并含有其他18中天然氨基酸，可见以下专利和专利申请内容：CN109608557A、CN110066313A、CN110183511A、CN110840964A、US20200030403A1，胶质
瘤为原发性恶性中枢神经系统肿瘤，枸杞糖肽的靶向基因为SREBP1c，本专利技术首次利用体内外实验发现枸杞糖肽具有良好的抗胶质瘤细胞增殖的作用，体外实验方面：本专利技术不仅采用U87、U251细胞株评估其抑制细胞增殖的能力，使枸杞糖肽更符合临床应用，也首次采用胶质瘤原代细胞客观评估了枸杞糖肽的抗肿瘤增殖能力，本专利技术首次采用代谢组学方法明确枸杞糖肽具有显著的抑制胶质瘤脂质从头合成代谢的能力。同时采用WB、PCR的方法明确SREBP1c为枸杞糖肽作用的靶基因之一。简而言之，本专利技术首次发现枸杞糖肽的抑制胶质瘤细胞增殖、迁移、侵袭并促进其凋亡的能力，枸杞糖肽具有明显抑制胶质瘤脂质合成代谢的能力。
[0028]经过实验表明，枸杞糖肽在制备抑制原代胶质瘤细胞增值能力制剂中的应用，测试胶质瘤细胞增值情况的具体实验方法为：在96孔板中种入5000个U87、U251、以及两例胶质瘤原代细胞，其中一例来自于胶质母细胞瘤病人(GBM)，一例来自低级别胶质瘤病人(LGG),每种细胞每组3个复孔，实验组培养基采用不同浓度枸杞糖肽含10％胎牛血清的培养基100ul，对照组给予不含枸杞糖肽培养基，48小时后，换液成DMEM，加入CCK8反应试剂10ul，37℃孵育30分钟后，450nm处测QD值，结果如图2所示。
[0029]枸杞糖肽在制备抑制原代胶质瘤细胞迁移能力制剂中的应用，测试胶质瘤细胞迁移情况的具体实验方法为：在6孔板中铺入2*10^5细胞，待细胞汇合度长至90％时，用移液器头在细胞中间划一条直线，显微镜下拍照记录，PBS洗三遍后，实验组换液成枸杞糖肽浓度为200ug/ml的培养基，对照组换液成不含枸杞糖肽的培养基，24小时后显微镜下拍照记录，记录迁移距离，结果如图3和图4所示。
[0030]枸杞糖肽在制备抑制原代胶质瘤细胞侵袭能力制剂中的应用，测试胶质瘤细胞侵袭情况的具体实验方法为：Transwell上室中加入matrigel胶与DMEM混合物100ul，37℃孵育半小时后上室加入含10000个U87细胞或胶质母细胞瘤原代细胞5％FBS培养基细胞悬液100ul本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.枸杞糖肽在制备抑制胶质瘤细胞生长的制剂中的应用。2.根据权利要求1中所述应用，其特征在于：所述枸杞糖肽糖含量为70％,ArA:GAl:GlC＝2.5:1.0:1.0，所述胶质瘤为原发性恶性中枢神经系统肿瘤。3.根据权利要求2中所述应用，其特征在于：所述枸杞糖肽的靶向基因为SREBP1c。4.枸杞糖肽在制备抑制原代胶质瘤细胞增殖能力制剂中的应用。5....

【专利技术属性】
技术研发人员：夏鹤春，姚健，
申请(专利权)人：宁夏医科大学总医院，
类型：发明
国别省市：