乙型脑炎病毒抗体及其应用制造技术

本发明专利技术涉及抗体技术领域，具体涉及一种乙型脑炎病毒抗体1B2及其应用。提供一种乙型脑炎病毒抗体1B2，其重链可变区的互补决定区CDR1具有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列，CDR2具有如SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列，CDR3具有如SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列。轻链可变区的互补决定区CDR1具有如SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列，CDR2具有如SEQ ID NO.5所示的氨基酸序列，CDR3具有如SEQ ID NO.6所示的氨基酸序列。的氨基酸序列。的氨基酸序列。

【技术实现步骤摘要】
乙型脑炎病毒抗体及其应用


[0001]本专利技术涉及抗体
，具体涉及一种乙型脑炎病毒抗体及其应用。

技术介绍

[0002]流行性乙型脑炎简称乙脑，是日本脑炎病毒(Japanese Encephalitis Virus，JEV)引起的最常见的病毒性脑炎。为了与本世纪初曾流行于欧洲的昏睡性脑炎(又称甲型脑炎)相区别，我国卫生部定名为流行性乙型脑炎。乙型脑炎病毒属于虫媒病毒黄病毒科黄病毒属，基因组为单股正链RNA，两端为非编码区，整个基因组为一个开放阅读框，编码一个多蛋白质前体。流行性乙型脑炎是乙型脑炎病毒感染引起的人畜共患病，人通过蚊虫叮咬或密切接触感染。
[0003]目前已应用的乙型脑炎病毒疫苗为弱毒疫苗和灭活疫苗。其中灭活疫苗是世界卫生组织推荐的在全球应用的疫苗，虽然该疫苗具有较高的安全性，但是在免疫保护力上却不够理想，经常出现免疫失败的报道。更为重要的是，目前尚没有针对乙型脑炎病毒的治疗技术，导致了该病的死亡率高，即使康复造成的后遗症也高。由于乙型脑炎尚无特效疗法，早期准确的诊断和有效的预防是防治本病的主要手段。
[0004]因此，本领域需求有高特异性、结合能力和中和能力的乙型脑炎病毒抗体，以满足诊断、预防和治疗的需要。

技术实现思路

[0005]有鉴于此，第一方面，本专利技术提供了本专利技术的目的之一是提供一种乙型脑炎病毒抗体。本专利技术的另一目的是提供该抗体的应用及其相关产品。
[0006]为实现上述目的，本专利技术通过杂交瘤技术筛选到一株乙型脑炎病毒特异性的杂交瘤(克隆号记为1B2)，制备小鼠腹水并纯化抗体，得到能够特异性结合乙型脑炎病毒的鼠源性单克隆抗体(mAb)1B2，该抗体对乙型脑炎病毒具有较高的亲和力，同时具有中和乙型脑炎病毒的能力。
[0007]具体地，本专利技术提供以下技术方案：
[0008]本专利技术提供乙型脑炎病毒抗体或其抗原结合片段，其重链可变区的互补决定区CDR1具有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列，CDR2具有如SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列，CDR3具有如SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列。轻链可变区的互补决定区CDR1具有如SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列，CDR2具有如SEQ ID NO.5所示的氨基酸序列，CDR3具有如SEQ ID NO.6所示的氨基酸序列。
[0009]优选地，所述乙型脑炎病毒抗体或其抗原结合片段的重链可变区具有如SEQ ID NO.7所示的氨基酸序列。轻链可变区具有如SEQ ID NO.8所示的氨基酸序列。
[0010]本专利技术中，所述抗原结合片段可选自Fab、Fab'、F(ab')2、Fd、Fv、dAb、互补决定区片段、单链抗体、人源化抗体、嵌合抗体、双特异抗体或多特异抗体。
[0011]本专利技术提供含有所述乙型脑炎病毒抗体或其抗原结合片段的双特异抗体或多特
异抗体。
[0012]基于上述抗体，本专利技术提供一种核酸分子，其编码所述乙型脑炎病毒抗体或其抗原结合片段。
[0013]根据上述提供的乙型脑炎病毒抗体或其抗原结合片段的氨基酸序列，本领域技术人员可以确定编码所述乙型脑炎病毒抗体或其抗原结合片段的核酸分子的核苷酸序列，并根据宿主细胞的密码子偏好性选择不同的核酸分子的核苷酸序列。
[0014]本专利技术还提供一种生物材料，其含有编码所述乙型脑炎病毒抗体或其抗原结合片段的核酸分子，所述生物材料为表达盒、载体或宿主细胞。
[0015]以上所述的表达盒是指将所述核酸分子的上游或下游连接用于转录、翻译的调控元件得到的重组核酸分子。
[0016]以上所述的载体是指可将核酸分子插入其中的一种核酸运载工具，包括但不限于质粒、人工染色体、噬菌体、动物病毒等，可以为表达载体，也可以为克隆载体或非复制型载体。
[0017]以上所述的宿主细胞可以为微生物细胞(如：大肠杆菌、酵母细胞等)或动物细胞(如：昆虫细胞、CHO细胞、BHK细胞，HEK293细胞等用于表达、制备抗体的细胞)，其中，动物细胞为不能够繁殖成为动物个体的细胞。
[0018]基于上述乙型脑炎病毒抗体或其抗原结合片段的功能，本专利技术提供所述乙型脑炎病毒抗体或其抗原结合片段、所述核酸分子或所述生物材料的如下任一种应用：
[0019](1)在制备用于检测乙型脑炎病毒的试剂或试剂盒中的应用；
[0020](2)在制备用于预防或治疗乙型脑炎病毒感染或乙型脑炎病毒感染引起疾病的药物中的应用；
[0021](3)在制备用于中和乙型脑炎病毒毒力的产品中的应用。
[0022]以上(1)中所述的检测乙型脑炎病毒包括检测乙型脑炎病毒的存在或其水平。
[0023]以上(2)中所述的乙型脑炎病毒感染引起疾病包括流行性乙型脑炎及其相关疾病。
[0024]基于上述乙型脑炎病毒抗体或其抗原结合片段，本专利技术提供一种抗体偶联物，其为由所述乙型脑炎病毒抗体或其抗原结合片段与载体或药物偶联得到，或者由所述乙型脑炎病毒抗体或其抗原结合片段与经化学或生物标记得到。
[0025]以上所述的载体可为任意可与蛋白质偶联的载体或药物载体。
[0026]以上所述的化学标记包括同位素、胶体金、荧光素、生物素标记等。
[0027]以上所述的生物标记包括蛋白标记、酶标记等。
[0028]本专利技术提供一种检测试剂，其含有所述乙型脑炎病毒抗体或其抗原结合片段或含有所述抗体偶联物。
[0029]以上所述的试剂盒还可包含免疫学检测、流式细胞检测等所需的其它试剂。
[0030]本专利技术提供一种药物组合物，其含有所述乙型脑炎病毒抗体或其抗原结合片段或含有所述抗体偶联物。
[0031]以上所述的药物组合物还可包含药学上可接受的载体或赋形剂。所用载体或赋形剂的类型可根据药物组合物的剂型和给药方式进行选择。所述药物组合物还可包含具有其它功效的抗体或药物活性成分。
[0032]本专利技术的有益效果在于：本专利技术提供一种针对乙型脑炎病毒的单克隆抗体1B2，该抗体能够与乙型脑炎病毒特异性结合，具有高度特异性和高结合能力，可用于乙型脑炎病毒的免疫荧光染色和流式细胞染色等检测，即使在较高稀释度时，仍然具有较好的检测效果。同时，该抗体对乙型脑炎病毒具有高效的中和能力。该抗体为乙型脑炎病毒的检测和诊断提供了有效的工具。
附图说明
[0033]图1为本专利技术抗体1B2抑制乙脑病毒感染T98G细胞的结果图；
[0034]图2为阳性对照抑制乙脑病毒感染T98G细胞的结果图；
[0035]图3为阴性对照抑制乙脑病毒感染T98G细胞的结果图。
具体实施方式
[0036]下文将结合具体实施方式和实施例，具体阐述本专利技术，本专利技术的优点和各种效果将由此更加清楚地呈现。本领域技术人员应理解，这些具体实施方式和实施例是用于说明本专利技术，而非限制本专利技术。
[0037]实施例1、杂交瘤细胞和单克隆抗体的筛选和制备
[0038](1)小鼠免疫
[0039]将免疫原本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.乙型脑炎病毒抗体，其特征在于，其重链可变区的互补决定区CDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，CDR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，CDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示；轻链可变区的互补决定区CDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示，CDR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示，CDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示。2.根据权利要求1所述的乙型脑炎病毒抗体，其特征在于，其重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.7所示；轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.8所示。3.核酸分子，其特征在于，其编码权利要求1或2所述的乙型脑炎病毒抗体。4.生物材料，其特征在于，其含有权利要求3所述的核酸分子，所述生物材料为表达盒、载体...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄启宽，祝永琴，胡国清，
申请(专利权)人：上海精翰生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：