利用三重共培养的体外肝病模型及其制备方法技术

本发明专利技术涉及一种利用三重共培养的体外肝病模型及其制备方法，所述体外肝病模型的制备方法包括在直接共培养(direct co

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】利用三重共培养的体外肝病模型及其制备方法


[0001]本专利技术涉及一种利用三重共培养的体外肝病模型及其制备方法，具体地，涉及一种利用三重共培养的体外肝病模型及其制备方法，实现比单培养更相似的体内环境，从而可以进行快速且高度准确的分析，同时与普通的直接共培养相比，易于样本的采集及测量。

技术介绍

[0002]为分析和评估特定药物对肝的影响而进行的临床前实验通常使用诱导肝病的模型。然而难以再现肝组织的复杂性，尤其是实现炎症、纤维化、脂肪变性等症状复合作用的非酒精性脂肪性肝炎(Non
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Alcoholic Steatohepatitis，NASH)或非酒精性脂肪性肝病(Non
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Alcoholic Fatty Liver Disease，NAFLD)模型更加困难。
[0003]为此，研究出了多种肝细胞培养方法，包括单纯在培养皿中培养一种细胞的2D单培养(2D mono
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culture)、将各种细胞混合到培养皿中来培养的2D共培养(2D co
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culture)、将一种本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种利用三重共培养的体外肝病模型制备方法，其中，包括在直接共培养肝细胞和肝星状细胞的同时，将库普弗细胞与所述肝细胞及肝星状细胞隔开来间接共培养的步骤。2.根据权利要求1所述的利用三重共培养的体外肝病模型制备方法，其中，将所述肝细胞和肝星状细胞培养成能够相互接触，将所述库普弗细胞培养成不与所述肝细胞及肝星状细胞接触，其中，所述肝细胞、肝星状细胞及库普弗细胞共享相同的培养基。3.根据权利要求1所述的利用三重共培养的体外肝病模型制备方法，其中，所述肝细胞为HepG2细胞及HuH
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7细胞中的一种或多种。4.根据权利要求1所述的利用三重共培养的体外肝病模型制备方法，其中，所述肝星状细胞为LX
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2细胞。5.根据权利要求1所述的利用三重共培养的体外肝病模型制备方法，其中，所述库普弗细胞为永生化库普弗细胞。6.根据权利要求1所述的利用三重共培养的体外肝病模型制备方法，其中，还包括诱导所述肝细胞、肝星状细胞和/或库普弗细胞发生脂肪变性、炎症或纤维化的步骤。7.根据权利要求6所述的利用三重共培养的体外肝病模型制备方法，其中，诱导所述脂肪变性的步骤是对所述肝细胞、肝星状细胞和/或库普弗细胞进行游离脂肪酸处理的步骤，诱导所述炎症的步骤是对所述肝细胞、肝星状细胞和/或库普弗细胞进行游离脂肪酸及脂多糖处理的步骤，诱导所述纤维化的步骤是对所述肝细胞、肝星状细胞和/或库普弗细胞进行游离脂肪酸及肿瘤生长因子β1处理的步骤。8.根据权利要求6所述的利用三重共培养的体外肝病模型制备方法，其中，还包括对所述肝细胞、肝星状细胞和/或库普弗细胞处理选自由A1腺苷受体、A
2A
腺苷受体、A
2B
腺苷受体、A3腺苷受体，β
‑
抑制蛋白、法尼酯X激活受体及甲状腺激素受体
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β组成的组中的一种或多种激动剂、部分激动剂、拮抗剂或部分拮抗剂的步骤。9.根据权利要求6所述的利用三重共培养的体外肝病模型制备方法，其中，还包括对所述肝细胞、肝星状细胞和/或库普弗细胞测量选自由脂肪变性、炎症及纤维化组成的组中的一种或多种指标的步骤。10.根据权利要求9所述的利用三重共培养的体外肝病模型制备方法，其中，所述指标为选自由A3腺苷受体、法尼酯X激活受体、甲状腺激素受体
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【专利技术属性】
技术研发人员：崔允杓，徐成旭，安尚烨，朴多仁，李明勋，
申请(专利权)人：未来制药有限公司，
类型：发明
国别省市：