一种海藻酸发酵液及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供了一种海藻酸发酵液及其制备方法和应用，涉及发酵技术领域。该海藻酸发酵液的制备方法包括如下步骤：步骤一、将海带洗净粉碎，加水搅拌获得海带泥，电渗析除盐，冷冻干燥获得海带粉；步骤二、将海带粉与水混合均匀，加入复合酶制剂进行酶解，获得酶解液；步骤三、向所述酶解液中加入戊糖片球菌，进行低温发酵，获得海藻酸发酵液。本申请中首次采用戊糖片球菌CICC 22239联合特定复合酶制剂共同发酵处理海带，获得了高海藻酸含量和高腐殖酸含量的海藻酸发酵液，该海藻酸发酵液，能够有效提高番茄的产量，并且针对番茄绵腐病的防治也能够起到一定的作用。也能够起到一定的作用。

【技术实现步骤摘要】
一种海藻酸发酵液及其制备方法和应用


[0001]本申请涉及发酵
，尤其涉及一种海藻酸发酵液及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]我国海藻资源丰富，同时也存在水体富营养化引起的海藻资源泛滥成灾、治理难、费用高的问题，而海藻的资源化利用能有效解决海藻污染的问题。目前海带制备的海藻肥在增产、抗逆和减少土壤污染方面都展现出了巨大的优势，是一种天然、绿色、高效的新型农用肥料。研究表明，海带中含有大量的矿物质元素和维生素，特别含有高生物活性的海藻多糖、高度不饱和脂肪酸和多种天然植物生长调节剂，能刺激植物体内非特异性活性因子的产生，调节内源激素的平衡。但现有的海藻酸水溶肥中海藻酸含量仅为3％
‑
6％，即海藻酸水溶肥中的海藻酸含量仍有待提高，并且现有的海藻酸水溶肥常存在稳定性差无法长期保存的问题。并且目前关于海藻肥产品对于提高茄果类蔬菜和果树产量及品质的研究较多，但其对植物抗病能力的影响报道较少。如专利CN111387211A一种防治土传病害的复合微生物菌剂及其制备方法和应用中公开了一种含有海藻酸的复合微生物菌剂，能够有效防治根结线虫病、大白菜软腐病、辣椒根腐病、番茄立枯病和辣椒疫病。但目前未有采用海藻酸相关产品防治番茄绵腐病的先例。
[0003]番茄绵腐病是由瓜果腐霉引起的、发生在番茄的病害。发病果实出现水浸状黄褐色或褐色大斑，并迅速软化、发酵，使整个果实腐烂，密生白色霉层，病果多脱落，很快烂光。番茄绵腐病作为番茄的主要病害之一，与番茄立枯病、番茄沤根合称为番茄苗期三大病害，对番茄种植危害严重，容易造成巨大的经济损失。由于农业防治费时费力，而农村大多数是年长的人从事蔬菜种植，为了省时省力，多采用药剂防治，但药剂防治方法不当，易产生抗药性。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是提供一种稳定性好、能够提高番茄产量并且提高番茄抗绵腐病能力的海藻酸发酵液及其制备方法和应用。
[0005]一方面，本申请提供了一种海藻酸发酵液的制备方法，所述方法包括如下步骤：步骤一、将海带洗净粉碎，加水搅拌获得海带泥，电渗析除盐，冷冻干燥获得海带粉；步骤二、将所述海带粉与水混合均匀，以质量百分比计，加入占海带粉质量1％
‑
10％的复合酶制剂进行酶解，获得酶解液；所述复合酶制剂由质量比为1:（2
‑
4）:（4
‑
6）:（1
‑
2）的无花果蛋白酶、半纤维素酶、果胶酶、中性蛋白酶组成；步骤三、向所述酶解液中加入戊糖片球菌（Pediococcus pentosaceus）CICC 22239，接种量为1％
‑
5％，进行发酵，获得海藻酸发酵液；所述戊糖片球菌（Pediococcus pentosaceus）CICC 22239的OD
600
值为3
‑
4。
[0006]优选的，复合酶制剂的加入量为海带粉质量的5％。
[0007]优选的，所述复合酶制剂由质量比为1:3:5:1的无花果蛋白酶、半纤维素酶、果胶酶、中性蛋白酶组成。
[0008]在一种优选的实施方式中，所述复合酶制剂是酶活为3千
‑
3万U/g的液体酶制剂。
[0009]优选的，所述接种量为2％。
[0010]接种量是指移入种子液的体积占接种后培养液体积的百分比。
[0011]优选的，所述OD
600
为4。
[0012]OD
600
指的是种子液在600 nm波长处的吸光值。
[0013]在一种优选的实施方式中，所述戊糖片球菌为戊糖片球菌CICC 22239种子液，所述种子液的制备方法包括如下步骤：将戊糖片球菌CICC 22239接种于MRS培养基中，温度为30℃、转速为200 rpm、pH为6.8，培养至OD
600
为4。
[0014]戊糖片球菌（Pediococcus pentosaceus）CICC 22239，购自中国工业微生物菌种保藏管理中心。
[0015]进一步的，所述电渗析除盐的条件为电压为30
‑
35 V，流速为10
‑
20 L
·
h
‑1，除盐时间为1
‑
2 h。
[0016]优选的，所述电渗析除盐的条件为电压为31 V，流速为15 L
·
h
‑1，除盐时间为1.5 h。
[0017]进一步的，所述海带粉与水以质量比1：（3
‑
5）的比例进行混合。
[0018]优选的，所述海带粉与水以质量比1：4的比例进行混合。
[0019]在一种优选的实施方式中，海带粉与水的料液比为1 g：4 mL。
[0020]进一步的，所述酶解的条件为酶解温度为25℃
‑
40℃，酶解时间为0.4
‑
0.6 h，酶解pH值为5
‑
6.5。
[0021]优选的，所述酶解的条件为酶解温度为37℃，酶解时间为0.5 h，酶解pH值为6。
[0022]进一步的，所述发酵的条件为：于25℃
‑
35℃低温发酵，发酵pH值为6
‑
7，转速为100
‑
300 rpm，发酵时间为2
‑
4 h。
[0023]优选的，所述发酵的条件为：发酵温度为30℃、发酵转速为200 rpm、发酵pH值为6.8、发酵时间为3 h。
[0024]由于海藻酸本身容易被高温破坏，因此本申请中选择采用复合酶及特定发酵菌种进行低温酶解和低温发酵，能够最大程度的保留发酵液中的海藻酸成分。
[0025]优选的，所述步骤三中还包括灭活过滤的步骤，灭活的温度为70℃
‑
80℃，灭活时间为1
‑
5 min；更优选的，75℃，5 min。
[0026]在该灭活条件下能够兼顾有效灭活绝大部分酶和菌的活性，也能够保证不破坏海藻酸发酵液中有效物质。
[0027]在一种优选的实施方式中海藻酸发酵液的制备方法具体包括如下步骤：步骤一、将海带洗净去除杂质后粉碎，加入等体积的水搅拌均匀获得海带泥，对海带泥进行电渗析除盐，电压30
‑
35 V，流速10
‑
20 L
·
h
‑1，除盐1
‑
2 h，将除盐后的海带泥进行冷冻干燥处理获得海带粉；步骤二、将所述海带粉与水以料液比为1 g：（3
‑
5） mL混合均匀，加入占海带粉质量1％
‑
10％的复合酶制剂进行酶解，25℃
‑
40℃，pH=5
‑
6.5，酶解0.4
‑
0.6 h，获得酶解液；所
述复合酶制剂由质量比为1:（2
‑
4）:（4
‑
6）:（1
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种海藻酸发酵液的制备方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：步骤一、将海带洗净粉碎，加水搅拌获得海带泥，电渗析除盐，冷冻干燥获得海带粉；步骤二、将所述海带粉与水混合均匀，以质量百分比计，加入占海带粉质量1％
‑
10％的复合酶制剂进行酶解，获得酶解液；所述复合酶制剂由质量比为1:（2
‑
4）:（4
‑
6）:（1
‑
2）的无花果蛋白酶、半纤维素酶、果胶酶、中性蛋白酶组成；步骤三、向所述酶解液中加入戊糖片球菌（Pediococcus pentosaceus）CICC 22239，接种量为1％
‑
5％，进行发酵，获得海藻酸发酵液；所述戊糖片球菌（Pediococcus pentosaceus）CICC 22239的OD
600
值为3
‑
4。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述电渗析除盐的条件为电压为30
‑
35 V，流速为10
‑
20 L
·
h

【专利技术属性】
技术研发人员：国乃胜，王一杰，赵明会，赵绪礼，王丽萍，张晓曼，
申请(专利权)人：山东嘉禾海洋生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：