咖啡酸半萜酯及其盐、制备方法与用途技术

本发明专利技术公开了一种咖啡酸半萜酯，具有结构式(I)：本发明专利技术还提供咖啡酸半萜酯的药学上可接受的盐，抗炎药物，并提供了咖啡酸半萜酯的其制备方法以及在制备抗炎药物中的用途。制备抗炎药物中的用途。制备抗炎药物中的用途。

【技术实现步骤摘要】
咖啡酸半萜酯及其盐、制备方法与用途


[0001]本专利技术涉及药物
更具体地说，本专利技术涉及一种咖啡酸半萜酯及其盐、制备方法与用途。

技术介绍

[0002]救必应为冬青科(Aquifoliaceae)冬青属植物铁冬青IIex rotunda Thunb.的干燥树皮，铁冬青始载于《岭南采药录》，主要分布于广东、广西等长江以南地区，其味苦性寒，具有清热解毒，利湿止痛的功效。目前有咽喉灵饮片、肠炎灵片和胃热清胶囊等复方制剂。研究表明，救必应主要含有乌苏烷型五环三萜和苯丙素类化合物，其中长梗冬青苷、铁冬青酸和紫丁香苷为其主要化学成分。具有抗炎、镇痛、降血脂、降血糖、抑菌、抗肿瘤及保护心血管等药理活性。临床上常用于咽喉肿痛、急慢性胃肠炎及跌打损伤等症。为充分开发和利用救必应，探寻其抗炎活性物质基础，本课题组从救必应中发现并鉴定出的新的化合物，经过检索发现该化合物为新化合物且具有药学用途。

技术实现思路

[0003]本专利技术提供一种咖啡酸半萜酯及其盐，并提供了其制备方法以及在制备抗炎药物中的用途。
[0004]为了实现根据本专利技术的这些目的和其它优点，提供了一种咖啡酸半萜酯，具有结构式(I)：
[0005][0006]咖啡酸半萜酯的药学上可接受的盐，药学上可接受的盐是硫酸盐、磷酸盐、盐酸盐、高氯酸盐、甲磺酸盐、甲酸盐、乙酸盐、丙酸盐、丁酸盐、琥珀酸盐或水杨酸盐。
[0007]抗炎药物，包括治疗有效量的所述的咖啡酸半萜酯或其药学上可接受的盐、以及药学上可接受的载体。
[0008]优选的是，所述抗炎药物被制成药学上允许的剂型。
[0009]所述的咖啡酸半萜酯的制备方法，包括：
[0010]步骤一、取救必应醇提浸膏，粉碎，加水混悬，依次用乙酸乙酯、正丁醇萃取，减压回收溶剂，得乙酸乙酯部位和正丁醇部位；
[0011]步骤二、正丁醇部位加甲醇和水溶解，减压回收溶剂至无醇味，倒入D101大孔吸附树脂柱吸附，依次用水、10％甲醇
‑
水、30％甲醇
‑
水、50％甲醇
‑
水、70％甲醇
‑
水和90％甲醇
‑
水梯度洗脱，将以上各梯度洗脱液分别浓缩，得到共6个流分Fr.N1～N6，将70％甲醇
‑
水洗脱部位Fr.N5经中压ODS柱色谱，在210nm和254nm检测波长下，依次用10％甲醇
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水、30％甲醇
‑
水、40％甲醇
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水、60％甲醇
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水、70％甲醇
‑
水梯度洗脱，将以上各梯度洗脱液分别浓缩得到共5个流分Fr.N5
‑
1～N5
‑
5，将60％甲醇
‑
水洗脱部位Fr.N5
‑
4经中压ODS柱色谱，用
e2695分析型高效液相色谱仪(美国Waters公司)；Shimadzu LC
‑
20AD XR高效液相色谱仪输液泵，SPD
‑
20A紫外检测器(日本岛津公司)；Kromasil 100
‑
5C18(10mm
×
250mm,5μm)色谱柱(瑞典Akzo Nobel公司)；HT7200S型中压制备色谱仪(苏州本草天成生物技术有限公司)；Nicolet iS10型红外光谱仪(美国Thermo Scientific公司)；UV
‑
5200PC紫外光谱仪(上海元析仪器有限公司)；SB
‑
800DTD超声波清洗机(宁波新芝生物科技股份有限公司)；RV3 eco S096旋转蒸发仪(德国IKA公司)；HH
‑
8恒温水浴锅(常州易晨仪器制造有限公司)；DLSB
‑
5/20型低温冷却循环泵(郑州长城科工有限公司)；Milli
‑
Q IQ7000超纯水仪(美国Millipore公司)；ZF
‑
7暗箱式三用紫外分析仪(上海嘉鹏科技有限公司)；硅胶G薄层色谱板、柱色谱硅胶(100～200、200～300目，青岛海洋化工有限公司)；D101大孔吸附树脂(西安蓝晓科技新材料股份有限公司)；色谱纯甲醇、乙腈(美国Thermo Fisher科技有限公司)；其他试剂均为分析纯。磷酸盐缓冲液(PBS)、胎牛血清(FBS)、DMEM培养基(美国Gibico公司)；LPS、MTT、Griess试剂(美国Sigma
‑
Aldrich公司)。
[0034]RAW264.7细胞(中国科学院上海生科院细胞资源中心)。
[0035]救必应于2019年8月采购自广西玉林市珍草堂中药饮片有限公司，经广西中医药大学王柳萍教授鉴定为冬青科冬青属植物铁冬青I.rotunda Thunb.的干燥树皮。样本(No.20190813)保存于广西中医药大学科学实验中心。
[0036]2提取与分离
[0037]干燥救必应药材100kg，粉碎，经8倍量70％(v/v)乙醇加热回流提取，得到的滤液经减压浓缩后得到干浸膏50kg，用粉碎机粉碎成粉末，加水混悬，依次用乙酸乙酯、正丁醇萃取，减压回收溶剂，得乙酸乙酯部位(400g)和正丁醇部位(1000g)。
[0038]正丁醇部位浸膏加甲醇和水溶解，减压回收溶剂至无醇味，样品溶液倒入D101大孔吸附树脂柱吸附一夜后，依次用纯水、10％、30％、50％、70％和90％甲醇
‑
水洗脱，将以上各梯度洗脱液分别浓缩得到6个流分(Fr.N1～N6)。70％甲醇洗脱部位Fr.N5(45g)经中压ODS柱色谱，在210nm和254nm检测波长下，甲醇
‑
水(10％、30％、40％、60％、70％，50mL/min)梯度洗脱，得到5个流分(Fr.N5
‑
1～N5
‑
5)。60％甲醇洗脱部位Fr.N5
‑
4(8g)经中压ODS柱色谱，45％甲醇
‑
水等度洗脱(10mL/min)，TLC、HPLC分析合并相同流分，得到21个流分(Fr.N5
‑4‑
1～N5
‑4‑
21)。等度洗脱(36.2～43.8min)Fr.N5
‑4‑
15(50mg)经半制备高效液相色谱制备，以210nm和254nm波长检测，甲醇
‑
水(50:50，2mL/min)等度洗脱得到化合物咖啡酸半萜酯(5mg，t
R
＝12.5min)，具有结构式(I)：
[0039][0040]3结构鉴定
[0041]化合物1：白色无定型粉末，图1为UV谱图，211(4.16),250(3.73),300(3.77),329(3.87)。图2为IR谱图，IR vKBr max(cm
‑1):3371,2922,2851,1661,1633,1497,1385,1263,1179。图本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.咖啡酸半萜酯，其特征在于，具有结构式(I)：2.咖啡酸半萜酯的药学上可接受的盐，其特征在于，药学上可接受的盐是硫酸盐、磷酸盐、盐酸盐、高氯酸盐、甲磺酸盐、甲酸盐、乙酸盐、丙酸盐、丁酸盐、琥珀酸盐或水杨酸盐。3.抗炎药物，其特征在于，包括治疗有效量的权利要求1所述的咖啡酸半萜酯或其药学上可接受的盐、以及药学上可接受的载体。4.如权利要求3所述的抗炎药物，其特征在于，所述抗炎药物被制成药学上允许的剂型。5.权利要求1所述的咖啡酸半萜酯的制备方法，其特征在于，包括：步骤一、取救必应醇提浸膏，粉碎，加水混悬，依次用乙酸乙酯、正丁醇萃取，减压回收溶剂，得乙酸乙酯部位和正丁醇部位；步骤二、正丁醇部位加甲醇和水溶解，减压回收溶剂至无醇味，倒入D101大孔吸附树脂柱吸附，依次用水、10％甲醇
‑
水、30％甲醇
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水、50％甲醇
‑
水、70％甲醇
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水和90％甲醇
‑
水梯度洗脱，将以上各梯度洗脱液分别浓缩，得到共6个流分Fr.N1～N6，将70％甲醇
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水洗脱部位Fr.N5经中压OD...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄莉婷，苑仁祎坤，高红伟，潘其明，
申请(专利权)人：广西中医药大学，
类型：发明
国别省市：