一种纳米铝佐剂生物安全性的评估方法技术

本发明专利技术公开了一种纳米铝佐剂生物安全性的评估方法。该方法利用中枢神经系统内细胞对于无机材料刺激的响应，通过细胞生长状态的变化情况反映出材料的神经毒性，并通过改变无机材料浓度与材料刺激时间等因素，精准反映纳米铝佐剂对于中枢神经系统内细胞可能造成的毒性，并最终反映出其生物安全性。本发明专利技术方法操作简便，可重复性好，结果可信度高，在疫苗佐剂的生产与安全应用中具有良好的前景。的生产与安全应用中具有良好的前景。

【技术实现步骤摘要】
一种纳米铝佐剂生物安全性的评估方法


[0001]本专利技术涉及纳米铝佐剂生物安全性的评估方法，具体说是纳米羟基氧化铝佐剂及由其引发的神经毒性的评估方法。

技术介绍

[0002]佐剂作为添加在疫苗中的重要组成部分，常被用来增强抗原的免疫反应，通俗意义来说佐剂可以帮助疫苗更好的发挥作用。铝盐佐剂的发展已有近百年的历史，是最早被批准用于人预防性疫苗的佐剂，包括羟基氧化铝、磷酸铝佐剂等，而这些铝盐佐剂可能导致多种毒副反应，统称为佐剂诱导的自身免疫性/炎性综合征。大量临床学和流行病学实验数据证实铝毒性效应最敏感的靶点是中枢神经系统，通常表现在学习能力、记忆力、注意力和语言能力缺陷，运动控制能力受损和其他行为改变等。因此有必要对铝盐佐剂的神经毒性进行更严谨的评价与控制，例如确定导致脑易位的因素进而设计出难以转运至中枢神经系统的铝盐佐剂，或是确定引起毒性的究竟是铝离子的金属毒性还是由纳米颗粒引起的颗粒毒性进而对铝盐佐剂进行设计等等。总结来说，除最简单的对铝盐佐剂进行用量管理之外，建立能准确评估铝盐佐剂神经毒性的方法，在铝盐疫苗佐剂的安全应用领域具有极其重要的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种纳米铝佐剂生物安全性的评估方法，其特征在于：包括以下步骤：1)将纳米铝佐剂分散于去离子水中形成均匀白色悬浊液；2)用细胞培养基对上述悬浊液进行稀释，并在其中培养神经系统细胞；3)对培养后的细胞进行毒性测试，毒性测试包括细胞活力、线粒体活性氧测试、细胞凋亡检测；4)若无细胞相对活力下降，无线粒体活性氧产生，无细胞凋亡现象发生，则证明纳米铝佐剂无神经毒性，即纳米铝佐剂生物安全性良好。2.根据权利要求1所述的评估方法，其特征在于：步骤1)所述的纳米铝佐剂包括羟基氧化铝、磷酸铝纳米材料中的一种或两种。3.根据权利要求1所述的评估方法，其特征在于：步骤1)所述的纳米铝佐剂包括自行合成的纳米铝佐剂、商业化铝佐剂中的一种或两种。4.根据权利要求1所述的评估方法，其特征在于：步骤1)所述的悬浊液的浓度为3
‑
10mg/mL。5.根据权利要求1所述的评估方法，其特征在于：步骤2)中稀释后Al浓度在10
‑
120μg/mL。6.根据权利要求1所述的评估方法，其特征在于：步骤2)所述的神经系统细胞包括小鼠小胶质细胞、小鼠脑微血管内皮细胞、小鼠神经元细胞一种或几种，所使用的细胞培养基为上述细胞类型对应所需的培养基。7.根据权利要求1所述的评估方法，其特征在于：步骤2)所述的细胞培养条件为37℃，5％CO2，细胞培养时间为4
‑
24h。8.根据权利要求1所述的评估方法，其特征在于：步骤3)所述的细胞凋亡检测采用流式细胞术检测An...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙冰冰，姜佳璇，毕世升，
申请(专利权)人：大连理工大学，
类型：发明
国别省市：