具有增加的活性和热稳定性的逆转录酶突变体制造技术

本公开文本提供了莫洛尼氏鼠白血病病毒(MMLV)逆转录酶(RT酶)突变体。本公开文本提供了MMLV RT酶中用于诱变的合适的氨基酸位置以及用于使用MMLV RT酶突变体从RNA模板合成cDNA的方法和试剂盒。cDNA的方法和试剂盒。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】具有增加的活性和热稳定性的逆转录酶突变体
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请根据35 U.S.C.
§
119(e)要求2020年7月20日提交的美国临时申请号63/054,228的权益。将上文所列申请出于所有目的通过引用以其整体并入本文。
[0003]对电子序列表的引用
[0004]本申请含有已经以ASCII格式的文本文件电子提交并且通过引用以其整体特此并入的序列表。ASCII文本文件的名称为“20
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1076
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WO_Sequence
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Listing_ST25_FINAL.txt”，是2021年7月19日创建的，大小为492千字节。


[0005]本公开文本涉及莫洛尼氏鼠白血病病毒(MMLV)逆转录酶(RT酶)突变体。本公开文本还涉及MMLV RT酶中用于诱变的合适的氨基酸位置以及用于使用MMLV RT酶突变体以从RNA模板合成cDNA的方法。

技术介绍

[0006]逆转录酶(RT酶)酶彻底改变了分子生物学。RT酶是逆转录聚本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种包含SEQ ID NO:637的氨基酸序列的分离的莫洛尼氏鼠白血病病毒(MMLV)逆转录酶(RT酶)突变体，其中所述MMLV RT酶突变体的氨基酸序列进一步包含至少一个氨基酸取代，所述至少一个氨基酸取代是：(a)位置61处的异亮氨酸至精氨酸取代(I61R)；(b)位置68处的谷氨酰胺至精氨酸取代(Q68R)；(c)位置79处的谷氨酰胺至精氨酸取代(Q79R)；(d)位置99处的亮氨酸至精氨酸取代(L99R)；(e)位置282处的谷氨酸至天冬氨酸取代(E282D)；(f)位置298处的精氨酸至丙氨酸取代(R298A)；(g)位置299处的谷氨酰胺至谷氨酸取代(Q299E)；(h)位置332处的苏氨酸至谷氨酸取代(T332E)；(i)位置433处的缬氨酸至精氨酸取代(V433R)；和/或(j).位置593处的异亮氨酸至谷氨酸取代(I593E)。2.根据权利要求1所述的分离的MMLV RT酶突变体，其中所述MMLV RT酶突变体包含SEQ ID NO:637
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699中任一个所示的氨基酸序列。3.根据权利要求2所述的分离的MMLV RT酶突变体，其中所述MMLV RT酶突变体包含SEQ ID NO:674所示的氨基酸序列。4.一种包含SEQ ID NO:637的氨基酸序列的分离的莫洛尼氏鼠白血病病毒(MMLV)逆转录酶(RT酶)突变体，其中所述MMLV RT酶突变体的氨基酸序列进一步包含至少两个氨基酸取代，所述至少两个氨基酸取代是：(a)位置61处的异亮氨酸至精氨酸取代和位置282处的谷氨酸至天冬氨酸取代(I61R/E282D)；(b)取代位置99处的亮氨酸至精氨酸和位置282处的谷氨酸至天冬氨酸取代(L99R/E282D)；(c)位置68处的谷氨酰胺至精氨酸取代和位置282处的谷氨酸至天冬氨酸取代(Q68R/E282D)；(d)位置79处的谷氨酰胺至精氨酸取代和位置282处的谷氨酸至天冬氨酸取代(Q79R/E282D)；(e)位置282处的谷氨酸至天冬氨酸取代和位置298处的精氨酸至丙氨酸取代(E282D/R298A)；(f)位置61处的异亮氨酸至精氨酸取代和位置99处的亮氨酸至精氨酸取代(I61R/L99R)；(g)位置61处的异亮氨酸至精氨酸取代和位置68处的谷氨酰胺至精氨酸取代(I61R/Q68R)；(h)位置61处的异亮氨酸至精氨酸取代和位置79处的谷氨酰胺至精氨酸取代(I61R/Q79R)；(i)位置61处的异亮氨酸至精氨酸取代和位置298处的精氨酸至丙氨酸取代(I61R/R298A)；(j)位置68处的谷氨酰胺至精氨酸取代和位置99处的亮氨酸至...

【专利技术属性】
技术研发人员：S，
申请(专利权)人：综合基因技术公司，
类型：发明
国别省市：