一种肾脏靶向纳米负载多肽药物及其制备方法和在制备狼疮肾炎治疗药物中的应用技术

本发明专利技术公开了一种肾脏靶向纳米负载多肽药物及其制备方法和在制备狼疮肾炎治疗药物中的应用，属于生物制药技术领域。以聚乙二醇

【技术实现步骤摘要】
一种肾脏靶向纳米负载多肽药物及其制备方法和在制备狼疮肾炎治疗药物中的应用


[0001]本专利技术属于生物制药
，具体涉及一种肾脏靶向纳米负载多肽药物及其制备方法和在狼疮肾炎中的制药应用。

技术介绍

[0002]系统性红斑狼疮是一种以多器官损伤为特征的自身免疫性疾病，狼疮肾炎是系统性红斑狼疮最常见且最严重的器官损害之一。尽管近年来狼疮肾炎在治疗方面取得了一定程度的进展，但狼疮肾炎患者在5年内发展为终末期肾脏疾病的风险仍然很高。目前，以细胞毒性药物和皮质类固醇为主的狼疮肾炎传统治疗方案，存在副作用明显和疾病复发率高等缺点。新兴的生物制剂，包括利妥昔单抗及贝利木单抗，仍存在治疗费用高昂、不良反应多和疗效不满意等实际问题。近年来，我们研究发现模拟DNA抗原结构的多肽药物，可以阻断或者中和抗双链DNA抗体，能够有效改善狼疮肾炎损害，且在体应用安全性好。但围绕DNA模拟肽的治疗存在以下瓶颈问题：多肽药物在体内半衰期短，需要频繁给药以维持血药浓度。含较多疏水性氨基酸残基的多肽水溶性差，导致用药浓度受限，影响治疗效率。此外，通过单独的多肽药物静脉注射，无法实现药物肾脏输送的靶向性和肾脏部位的持留，使得肾炎治疗效率偏低。
[0003]纳米载药系统可通过纳米技术负载多肽药物，改善疏水性药物水溶性、药代动力学和生物分布，并能够将多肽药物定向输送到特定组织。目前，纳米载药系统主要用于抗癌治疗，利用肿瘤特殊的微环境设计的肿瘤靶向纳米药物，可以提高抗癌治疗效果。肾脏也具有独特的解剖结构和屏障功能，即由肾小球内皮细胞、肾小球基底膜和足细胞组成的肾小球滤过屏障。肾脏靶向的纳米药物，需要考虑肾小球的电荷屏障和机械屏障。因此，肾脏靶向纳米载药系统存在以下技术难点：纳米颗粒的尺寸明显影响肾脏持留效果，直径过小的纳米颗粒可直接通过肾小球滤过屏障而被排泄清除，而直径过大的纳米颗粒则难以通过肾小球内皮细胞窗孔，且易被肝脏单核巨噬细胞系统破坏。因此，纳米颗粒直径只有在合适范围内时，才能够穿过肾小球脉管系统，且不透过肾小球基底膜，从而实现在肾小球的沉积和长时间持留。此外，由于肾小球电荷屏障的存在，带正电和带负电的纳米颗粒与电荷屏障作用的差异也会影响药物在肾脏的持留效果。
[0004]因此，为了实现纳米载药系统在狼疮肾炎中的高效治疗，需要控制纳米与肾脏的相互作用，来达到纳米载药的肾脏的靶向性和积累性。如何选择纳米材料的类型和设计纳米颗粒的尺寸、形状、表面电荷和化学修饰，仍然是狼疮肾炎在靶向纳米治疗领域亟待解决的问题。

技术实现思路

[0005]为了克服上述现有技术的缺点，本专利技术的目的在于提供一种肾脏靶向纳米递送系统及其制备狼疮肾炎治疗药物的应用，以解决药物肾脏靶向性差以及保留时间短的技术问
题。
[0006]为了达到上述目的，本专利技术采用以下技术方案予以实现：
[0007]本专利技术公开了一种肾脏靶向纳米负载多肽药物，该药物为通过聚乙二醇
‑
聚乳酸聚乙醇酸共聚物负载肾脏靶向多肽构成的多肽纳米颗粒药物；其中，所述肾脏靶向多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
[0008]优选地，该药物为球形，平均粒径为99.18
±
22.38nm，带负电荷。
[0009]本专利技术还公开了上述的肾脏靶向纳米负载多肽药物在制备治疗系统性红斑狼疮的药物中的应用。
[0010]优选地，所述的药物为制备治疗狼疮肾炎的药物中的应用。
[0011]本专利技术还公开了上述的肾脏靶向纳米负载多肽药物的制备方法，包括以下步骤：
[0012]1)将多肽与聚乙二醇
‑
聚乳酸聚乙醇酸共聚物用溶剂超声溶解，得到混合溶液；
[0013]2)向混合溶液中加水，搅拌处理，使多肽析出成核并与聚乙二醇
‑
聚乳酸聚乙醇酸共聚物达到溶解
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析出动态平衡，然后加水稀释处理；
[0014]3)在搅拌条件下，处理步骤2)稀释后的液体，挥发去除有机溶剂和水，再经过透析处理，去除游离多肽，制得肾脏靶向纳米负载多肽药物。
[0015]优选地，步骤1)中，多肽与聚乙二醇
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聚乳酸聚乙醇酸共聚物的质量比为1:1。
[0016]优选地，步骤1)中，采用丙酮进行超声溶解。
[0017]优选地，步骤2)中，加水稀释10倍。
[0018]优选地，步骤3)中，使用截止分子量为3000的透析袋进行透析。
[0019]优选地，步骤3)中，搅拌条件是在温度为70℃，转速为500rpm的条件下进行搅拌。
[0020]与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：
[0021]本专利技术公开的一种高效的肾脏靶向纳米负载多肽药物，以聚乙二醇
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聚乳酸聚乙醇酸共聚物作为纳米载体，包裹氨基酸序列为alwppnlhawvp的肾脏靶向多肽。该药物在肾小球机械屏障和电荷屏障的效应下，可穿过肾小球脉管系统，且不易穿透肾小球基底膜，从而有效靶向肾脏，延长药物在肾脏的持留时间，同时改善多肽药物半衰期。在体检验该肾脏靶向纳米负载多肽能通过有效降低小鼠尿蛋白水平，减少小鼠肾小球IgG和补体C3的沉积，改善肾小球系膜增生及新月体形成，缓解肾小管萎缩及肿胀，减轻肾间质纤维化，有效改善狼疮肾炎损害，提高狼疮肾炎生存率。因而能够将其应用于制备肾脏靶向的纳米负载药物用于治疗系统性红斑狼疮。
[0022]进一步地，本申请的纳米负载多肽药物为球形，平均粒径为99.18
±
22.38纳米，带负电荷，该粒径范围合适，能够穿过肾小球脉管系统，且不透过肾小球基底膜，从而实现在肾小球的沉积和长时间持留。
附图说明
[0023]图1为本专利技术制备的狼疮肾炎靶向纳米药物NP
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D
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ALW的透射电镜照片；
[0024]图2为本专利技术制备的狼疮肾炎靶向纳米药物NP
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ALW的多肽释放率；
[0025]图3为本专利技术制备的狼疮肾炎靶向纳米药物NP
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ALW的尺寸和Zeta电势；其中，a为尺寸；b为电势；
[0026]图4为活体成像检测本专利技术制备的狼疮肾炎靶向纳米药物NP
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D
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ALW的组织分布结
果图；
[0027]图5为本专利技术制备的狼疮肾炎靶向纳米药物NP
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ALW的肾脏药物水平；
[0028]图6为本专利技术制备的狼疮肾炎靶向纳米药物NP
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D
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ALW的血药水平；
[0029]图7为各组小鼠的生存曲线；
[0030]图8为各组小鼠蛋白尿水平结果图；
[0031]图9为H&E、PAS及Masson染色评估纳米药物NP
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D
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ALW治疗组处理小鼠的肾脏病理表现；其中，a为代表性肾本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种肾脏靶向纳米负载多肽药物，其特征在于，该药物为通过聚乙二醇
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聚乳酸聚乙醇酸共聚物负载肾脏靶向多肽构成的多肽纳米颗粒药物；其中，所述肾脏靶向多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。2.根据权利要求1所述的肾脏靶向纳米负载多肽药物，其特征在于，该药物为球形，平均粒径为99.18
±
22.38nm，带负电荷。3.权利要求1或2所述的肾脏靶向纳米负载多肽药物在制备治疗系统性红斑狼疮的药物中的应用。4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的药物为制备治疗狼疮肾炎的药物中的应用。5.权利要求1或2所述的肾脏靶向纳米负载多肽药物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1)将多肽与聚乙二醇
‑
聚乳酸聚乙醇酸共聚物用溶剂超声溶解，得到混合溶液；2)向混合溶液中加水，搅拌处理，使多肽析出成核并与聚乙二醇
‑
聚乳酸聚乙醇酸共聚物达到溶解...

【专利技术属性】
技术研发人员：王绘霞，王亚琦，夏育民，杨文光，罗迈，陆美，延祝，张雯，
申请(专利权)人：西安交通大学，
类型：发明
国别省市：