一种伊枯草菌素A抗菌脂肽及其制备方法技术

本发明专利技术提供一种伊枯草菌素A抗菌脂肽及其制备方法，方法包括采用以豆粕为基质，通过优化固态培养基发酵产生抗菌脂肽，采用水提及酸沉淀、两步超滤法纯化，得到高纯度组分。通过优化豆粕固体发酵的培养基及发酵条件，使优化后的发酵培养基产的抗菌脂肽含量达到782.36 mg/kg，为优化前纯豆粕固体发酵的3.2倍，抗菌脂肽对恶臭假单胞菌的抑菌率能够从优化前的64.21%提高到90.01%。本发明专利技术的发酵底物成本低廉，固态发酵设备简单，单位发酵基质浓度高，生产能耗低，同时两步超滤法降低了纯化成本。得到的高纯度脂肽为未曾报道过新的伊枯草菌素A，能够有效抑制恶臭假单胞菌，在水产养殖业及人类临床等的疾病防治方面具有广阔的应用前景。景。景。

【技术实现步骤摘要】
一种伊枯草菌素A抗菌脂肽及其制备方法


[0001]本专利技术涉及生物活性肽
，具体为一种伊枯草菌素A抗菌脂肽及其制备方法。

技术介绍

[0002]芽孢杆菌属（Bacillus）是一类兼性厌氧或好氧的革兰氏阳性杆菌，能够产生不同结构的多肽类抗菌物质，是工业化生产抗菌脂肽的常用菌株之一。抗菌脂肽的分子结构由疏水性脂肪酸链及亲水性肽链构成，其氨基酸可与烃链上的羟基或氨基以酰胺键或内酯结合形成环状结构。抗菌脂肽的抗菌活性及表面活性剂的性质，使其在医药、农业、石油开发等方面具备巨大开发潜力。目前研究及应用较多的脂肽主要是伊枯草菌素（iturin）、表面活性素（surfactin）、及丰原素（fengycin）这三大家族。其中Iturin可使细菌或真菌的细胞膜上形成小孔，改变细胞膜的渗透性，同时可与甾醇形成iturin/磷脂复合物或iturin/甾醇发挥抑菌作用。Iturin主要有Iturin A，C，D，E，其中Iturin A应用最为广泛。Iturin A具有高的抑菌活性、表面活性及溶血作用，其抗菌谱广、毒性低及致敏反应低。<br/>[0003]本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种伊枯草菌素A抗菌脂肽，其特征在于：伊枯草菌素A抗菌脂肽的肽结构为：。2.一种伊枯草菌素A抗菌脂肽的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤1：将保藏号为CGMCC No. 19541的枯草芽孢杆菌N
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2 接入豆粕半固态培养基富集得到菌液，以菌液混合豆粕和营养因子制成的固体发酵培养物进行发酵，获得发酵产物；步骤2：将发酵产物离心，采用水提及酸沉淀法提取抗菌脂肽；步骤3：采用两步法超滤进行脂肽的分离纯化，并利用反相高效液相色谱法进行测定，得到伊枯草菌素A抗菌脂肽。3.根据权利要求2所述的一种伊枯草菌素A抗菌脂肽的制备方法，其特征在于：步骤1中所述豆粕半固态发酵培养基为：豆粕、LB培养基，LB培养基包括10 g/L蛋白胨、5 g/L酵母提取物和5 g/L 氯化钠，其中豆粕和LB培养基的料液比5:1
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10:1，对培养基在121℃下灭菌20 min，接种量0.5%，温度27
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38℃，时间6
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12 h，获得菌液；所述固体发酵培养物包括菌液5
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10%、豆粕、水、葡萄糖1
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2%、谷氨酸钠0.8
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1.8%、脯氨酸0.5
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1.5%、天冬氨酸0.5
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1.5%、KCl 0.1
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0.25%、(NH4)2SO
4 0.1
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0.25%、Na2HPO
4 0.05
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0.2 %，温度 27
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38℃，时间24
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60 h，其中豆粕和水的料液比5:1
‑
10:1。4.根据权利要求3所述的一种伊枯草菌素A抗菌脂肽的制备方法，其特征在于：步骤2中水提及酸沉淀...

【专利技术属性】
技术研发人员：牟海津，任昕淼，付晓丹，李萌，
申请(专利权)人：南京益纤生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：