一种延缓初期突释的PLGA载药微球及其制备方法与应用技术

本发明专利技术提供了一种延缓初期突释的PLGA载药微球及其制备方法与应用，采用复乳溶剂挥发法制备载万古霉素的PLGA微球，使用丝素蛋白对载药微球进行涂层，即得延缓初期突释的PLGA载药微球，丝素蛋白对载药PLGA微球成功涂层，冻干后的载药微球呈白色粉末状，颗粒间无黏连，载药量为（24.11

【技术实现步骤摘要】
一种延缓初期突释的PLGA载药微球及其制备方法与应用


[0001]本专利技术属于医药
，涉及聚乳酸
‑
羟基乙酸共聚物（PLGA）载药微球，具体涉及一种延缓初期突释的PLGA载药微球及其制备方法与应用。

技术介绍

[0002]聚乳酸
‑
羟基乙酸共聚物（PLGA）具有良好的生物相容性及生物降解性，在药物缓释中充当重要角色，是最常用的药物缓释载体材料之一。载药微球为球体直径微米级别，微球中装载有药物的微球。将PLGA制备成微球可包裹多种生物分子，包括蛋白质、抗肿瘤药物、生长因子、激素、疫苗等。将万古霉素包裹于PLGA微球中可延长药物释放时间、减少给药次数、降低全身毒性等，但PLGA载药缓释微球在药物释放初期会出现药物突释的现象，也就是说，载药微球在药物释放过程中，在早期阶段（1
‑
3天）会出现所携带的药物大量释放的现象发生；其主要原因是载药微球表面的多孔结构。微球表面的孔结构使其表面与内部结构相通，当与液体接触，孔结构会将微球外部的水带入球体内部，将内部的药物溶解释放，进而导致初期大量释放。
[0003]丝素蛋白（SF）是从桑蚕丝中经过脱除丝胶后得到的高分子纤维蛋白，具有良好的生物相容性、生物可降解性、无免疫原性及易得性。SF可加工成薄膜形式，对载药微球进行涂层，以延缓载药微球的药物初期突释。

技术实现思路

[0004]为了解决现有技术中存在的上述技术问题，本专利技术旨在提供一种工艺简单，反应条件温和的丝素蛋白涂层载药微球、及延缓载药微球药物初期突释的方法。
[0005]本专利技术采用的技术方案如下：一种延缓初期突释的PLGA载药微球的制备方法，具体包括以下步骤：步骤（1）：采用复乳溶剂挥发法制备载万古霉素的PLGA微球：将PLGA溶解于二氯甲烷中，将含有万古霉素的水溶液加入二氯甲烷溶液中，将混合液在冰水浴中超声乳化；然后，将初乳缓慢加入到含10mg/mL NaCl的0.5%PVA中，在高速搅拌器中搅拌，1300
‑
1500转/分，1
‑
5分钟，再用去离子水稀释形成复乳；然后室温条件下低速搅拌，使二氯甲烷自然挥发，将复乳离心并用去离子水冲洗；然后将复乳预冻、冷冻干燥备用；步骤（2）：使用丝素蛋白对载药微球进行涂层：将PLGA载药微球悬浮于浓度0.1
‑
1%的丝素蛋白溶液中，混合溶液在室温下轻轻摇晃后将其置于超声浴中室温下超声，超声后再次轻轻摇晃，分散聚集的微球；然后将混合液置于高速离心机中离心收集微球，并用去离子水冲洗微球，将经过丝素涂层的PLGA微球进一步浸入90%（v/v）的甲醇溶液中，以诱导微球表面的丝素蛋白转变为β
‑
折叠结构；将经过丝素涂层的微球干燥，并进行下一步的涂层过程，该过程重复三次，即得延缓初期突释的PLGA载药微球。
[0006]进一步的，步骤（1）中，所述混合液为将400mg的PLGA溶解于10ml二氯甲烷中，再将1ml含有200mg万古霉素的水溶液加入二氯甲烷溶液中得到。
[0007]进一步的，步骤（1）中，超声乳化为在120W，20kHz条件下工作20秒，间歇3秒，重复6次。
[0008]进一步的，步骤（1）中，将初乳缓慢加入到40ml含(10mg)/ml NaCl的0.5%PVA中。
[0009]进一步的，步骤（1）中，在400转/分室温条件下持续搅拌6小时，使二氯甲烷自然挥发。
[0010]进一步的，步骤（1）中，然后将复乳在
‑
20℃条件下预冻24小时，再将其放置于冷冻干燥机中在
‑
40℃下冷冻干燥24小时，收集微球并储存于4℃条件下，备用。
[0011]进一步的，步骤（2）中，将PLGA载药微球20mg悬浮于1mL浓度0.1
‑
1%的丝素蛋白溶液中。
[0012]本专利技术采用上述方法制备的PLGA载药微球，冻干后的载药微球呈白色粉末状，冻干后的载药微球呈白色粉末状，颗粒间无黏连，载药量为（24.11
±
1.72）%，包封率为（48.21
±
3.44）%；平均粒径为（97.48
±
0.55）μm， 水接触角为（89.34
±
2.55）
°
，载药微球在第1天时体外药物释放量占总载药量的（14.40
±
1.86）%，28天累计释放（67.70
±
3.81）%；体外抑菌实验中，抑菌圈最大直径为（15.07
±
0.51）mm，最小抑菌圈直径为（7.90
±
0.36）mm，最大相对活性为（77.66
±
0.96）%，最小相对活性为（38.49
±
1.44）%；肉眼观察冻干后的载药微球呈白色粉末状，颗粒间无明显黏连，分散性良好，显微镜及电镜下观察微球形态，可见微球形态规整，呈圆形，表面粗糙，形态良好，可观察到微球表面SF涂层完整。
[0013]一种延缓PLGA载药微球初期突释的方法，具体为：以0.01mol/L的磷酸盐缓冲液（PBS,pH7.4）作为溶出介质，载药微球放置在体积为5ml磷酸盐缓冲液的玻璃试管中，一式三份，所有试管置于37℃恒温培养振荡器中，以120转/分的速度持续摇动，每隔24h收集药物洗脱液并储存于
‑
20℃，取 5mL新鲜的PBS补充至试管中以进行药物释放。
[0014]产品表征及性能测试：1.涂层与未涂层PLGA载万古霉素微球的表征用扫描电子显微镜（JSM
‑
5600LV，日本电子光学公司，日本）观察并拍摄聚合物微球的表面形貌。
[0015]使用基于激光散射技术的马尔文粒度分析仪（马尔文粒度分析仪 2000，马尔文仪器厂，英国）来测量聚合物微球的粒度分布。
[0016]使用光学接触角仪（DSA100型光学接触角仪,德国Kruss公司，德国）上通过静态接触角测量了聚合物微球的表面接触角。
[0017]聚合物微球傅里叶变换红外光谱采用傅里叶变换红外光谱（Fourier transform infrared, FTIR）对聚合物相容性进行研究。PLGA、VANCO、载VANCO的PLGA混合物微球、不同浓度SF涂层的载有VANCO的PLGA微球的红外光谱通过使用FTIR光谱仪记录。取2mg
‑
3mg不同样品置于红外光谱仪中，然后在4000
‑
650cm
‑1的波长范围内测量了不同样品的红外光谱。
[0018]载药微球体外药物释放采用体外洗脱法测定了未经SF涂层（0%SF）及经不同浓度丝素涂层的载万古霉素PLGA缓释微球中万古霉素的释放特性。
[0019]以0.01mol/L的磷酸盐缓冲液（PBS,pH7.4）作为溶出介质。载药微球放置在体积为5ml磷酸盐缓冲液的玻璃试管中，样品一式三份。所有试管置于37℃恒温培养振荡器中，以120转/分本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种延缓初期突释的PLGA载药微球的制备方法，其特征在于：具体包括以下步骤：步骤（1）：采用复乳溶剂挥发法制备载万古霉素的PLGA微球：将PLGA溶解于二氯甲烷中，将含有万古霉素的水溶液加入二氯甲烷溶液中，将混合液在冰水浴中超声乳化；然后，将初乳缓慢加入到含10mg/mL NaCl的0.5%PVA中，在高速搅拌器中搅拌，1300
‑
1500转/分，1
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5分钟，再用去离子水稀释形成复乳；然后室温条件下低速搅拌，使二氯甲烷自然挥发，将复乳离心并用去离子水冲洗；然后将复乳预冻、冷冻干燥备用；步骤（2）：使用丝素蛋白对载药微球进行涂层：将PLGA载药微球悬浮于浓度0.1
‑
1%的丝素蛋白溶液中，混合溶液在室温下轻轻摇晃后将其置于超声浴中室温下超声，超声后再次轻轻摇晃，分散聚集的微球；然后将混合液置于高速离心机中离心收集微球，并用去离子水冲洗微球，将经过丝素涂层的PLGA微球进一步浸入90%（v/v）的甲醇溶液中，以诱导微球表面的丝素蛋白转变为β
‑
折叠结构；将经过丝素涂层的微球干燥，并进行下一步的涂层过程，该过程重复三次，即得延缓初期突释的PLGA载药微球。2.根据权利要求1所述的一种延缓初期突释的PLGA载药微球的制备方法，其特征在于：步骤（1）中，所述混合液为将400mg的PLGA溶解于10ml二氯甲烷中，再将1ml含有200mg万古霉素的水溶液加入二氯甲烷溶液中得到。3.根据权利要求1或2所述的一种延缓初期突释的PLGA载药微球的制备方法，其特征在于：步骤（1）中，超声乳化为在120W，20kHz条件下工作20秒，间歇3秒，重复6次。4.根据权利要求3所述的一种延缓初期突释的PLGA载药微球的制备方法，其特征在于：步骤（1）中，将初乳缓慢加入到40ml含(10mg)/ml NaCl的0.5%PVA中。5.根据权利要求1或4所述的一种延缓初期突释的PLGA载药微球的制备方法，其特征在于：步骤（1）中，在400转/分室温条件下持续搅拌6小时，使二氯甲烷自然挥发。6.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：李松凯，李胜堂，张涛，石学文，刘华，徐博，甄平，
申请(专利权)人：中国人民解放军联勤保障部队第九四〇医院，
类型：发明
国别省市：