一种抗干眼症的活性肽及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种抗干眼症的活性肽及其应用，涉及药物新用途的技术领域。本发明专利技术的活性肽具有明显改善经苯扎氯铵诱导的干眼小鼠的泪液分泌功能、恢复泪膜稳态、恢复角膜上皮细胞完整性、防止结膜杯状细胞丢失和抑制角膜上皮细胞凋亡的作用，具有良好的抗干眼症作用，可作为防治干眼症的化合物，对防治干眼症相关产品的开发具有指导性意义。相关产品的开发具有指导性意义。相关产品的开发具有指导性意义。

【技术实现步骤摘要】
一种抗干眼症的活性肽及其应用


[0001]本专利技术属于生物医药
，具体涉及一种抗干眼症的活性肽及其应用。

技术介绍

[0002]干眼病(Dry eye disease，DED)是眼科常见病和多发病，也是威胁人类健康的重要的公共卫生问题。干眼症是由泪膜稳态失衡引发的眼表损害及不适症状，常表现为眼睛干涩感、异物感、烧灼感，眼红眼痒、视力模糊、疼痛、畏光流泪，严重的还会导致角膜损伤甚至视力损害。近年来，随着视频终端的普及和人口老龄化的加剧，干眼的发病率逐年攀升。干眼已经成为威胁人类健康的重要的公共卫生问题。
[0003]随着人们生活方式的改变，干眼患者数呈现爆炸性增长，针对干眼病药物或产品的需求不断上涨。然而，目前干眼的治疗主要依靠滴眼液以缓解症状。临床上广泛应用的滴眼液，如环孢素和玻璃酸钠等，虽能在较大程度上缓解干眼，但长期使用也会增加患白内障等疾病的风险。此外，这些滴眼液的价格也普遍超出了普通患者的可接受范围，难以普及更多的患者。因此，开发高效、价格低廉且耐受程度良好的眼科药物尤为重要。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于克服现有技术的不足，提供一种抗干眼症的活性肽及其应用。
[0005]为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案为：一种抗干眼症的活性肽，所述活性肽命名为多肽NGG，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本申请专利技术人经过大量的实验筛选得到多肽NGG，其氨基酸序列为：Asn
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Gly
‑
Gly
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>Pro
‑
Ser
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Gly
‑
Pro
‑
Arg。经过体内外实验发现，本专利技术的多肽NGG具有明显改善经苯扎氯铵(Benzalkonium chloride，BAC)诱导的干眼小鼠的泪液分泌功能、恢复泪膜稳态、恢复角膜上皮细胞完整性、防止结膜杯状细胞丢失和抑制角膜上皮细胞凋亡的作用，能够用于改善干眼症。
[0006]本专利技术还提供所述的多肽NGG在制备用于抗干眼症的产品中的应用。
[0007]作为本专利技术所述应用的优选实施方式，所述多肽NGG通过恢复泪液分泌功能、恢复泪膜稳态、恢复角膜上皮细胞完整性、防止结膜杯状细胞丢失或抑制角膜上皮细胞凋亡发挥抗干眼症作用。
[0008]作为本专利技术所述应用的优选实施方式，所述产品中多肽NGG的浓度为1～100μg/mL。
[0009]作为本专利技术所述应用的优选实施方式，所述产品中多肽NGG的浓度为100μg/mL。
[0010]作为本专利技术所述应用的优选实施方式，所述产品包括眼用注射剂、滴眼剂、洗眼剂、眼用凝胶、眼用药膏或适于眼科外用的制剂。
[0011]本专利技术还提供一种用于抗干眼症的药物组合物，所述药物组合物包括所述的多肽NGG和药学上可接受的载体。
[0012]作为本专利技术所述药物组合物的优选实施方式，所述药物组合物中多肽NGG的浓度为1～100μg/mL。
[0013]作为本专利技术所述药物组合物的优选实施方式，所述载体包括溶剂。
[0014]作为本专利技术所述药物组合物的优选实施方式，所述溶剂包括生理盐水、磷酸盐缓冲液或注射用水。
[0015]与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：
[0016]本专利技术提供了一种抗干眼症的活性肽及其应用，本专利技术的活性肽具有明显改善经BAC诱导的干眼小鼠的泪液分泌功能、恢复泪膜稳态、恢复角膜上皮细胞完整性、防止结膜杯状细胞丢失和抑制角膜上皮细胞凋亡的作用，具有良好的抗干眼症作用，可作为防治干眼症的先导化合物，对防治干眼症的产品的开发具有指导性意义。
附图说明
[0017]图1为多肽NGG的HPLC谱图。
[0018]图2为多肽NGG的一级质谱谱图。
[0019]图3为多肽NGG对HCECs的细胞毒性MTT结果其中，与空白组相比，
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p＜0.05，
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p＜0.01。
[0020]图4为多肽NGG抗干眼活性的MTT结果其中，与空白组相比，
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p＜0.01；与模型组相比，
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[0021]图5为各组小鼠体重变化图。
[0022]图6为各组小鼠泪液分泌测试结果其中，与空白组相比，
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p＜0.01；与模型组相比，
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p＜0.05，
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p＜0.01，与阳性药相比，
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p＜0.05。
[0023]图7为各组小鼠泪液蕨样结晶测试结果其中，与空白组相比，
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p＜0.01；与模型组相比，
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p＜0.01。
[0024]图8为各组角膜组织H&E染色及角膜上皮细胞层厚度变化统计结果：其中，与空白组相比，
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p＜0.01；与模型组相比，
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[0025]图9为各组结膜组织PAS染色及结膜杯状细胞计数结果：其中，与空白组相比，
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p＜0.01；与模型组相比，
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p＜0.01。
[0026]图10为各组角膜组织TUNEL染色结果(图中红色箭头所示为凋亡的角膜上皮细胞)。
具体实施方式
[0027]以下通过实施例形式的具体实施方法，对本专利技术的上述内容作进一步的详细说明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下实施例。实施例中，所使用的实验方法如无特殊说明,均为常规方法,所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
[0028]实施例1多肽NGG的合成
[0029]本专利技术的多肽NGG经合肥赛曼诺生物科技有限公司采用固相合成方法合成，纯度大于98％。NGG固相合成的HPLC图谱和一级质谱图谱分别如图1和图2所示。NGG的纯度经HPLC法检测，MS法检测其及分子量信息。NGG的HPLC检测结果如图1所示，NGG的色谱峰积分面积为99.09％，表明其纯度大于>98％，具体为99.09％，符合要求。NGG的理论分子量为
740.77Da，MS法检测结果显示NGG的分子量为740.77Da(图2)，表明合成的NGG分子结构正确。综上所述，合成的多肽NGG结构正确，符合要求，可用于后续相关实验。
[0030]实施例2多肽NGG的体外抗干眼活性评价
[0031]具体实验方法如下：
[0032](1)人角膜上皮细胞的培养
[0033]人角膜上皮细胞(Huma本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗干眼症的活性肽，其特征在于，所述活性肽命名为多肽NGG，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。2.权利要求1所述的多肽NGG在制备用于抗干眼症的产品中的应用。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述多肽NGG通过恢复泪液分泌功能障碍、恢复泪膜稳态、恢复角膜上皮细胞完整性、防止结膜杯状细胞丢失或缓解角膜上皮细胞凋亡发挥抗干眼症作用。4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述产品中多肽NGG的浓度为1～100μg/mL。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述产品中多肽NGG的浓度为100μ...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵云涛，曾建，邓恺舒，苗艳丽，林翠娴，张诗琳，杨志友，张永平，刘书成，
申请(专利权)人：广东海洋大学，
类型：发明
国别省市：