本发明专利技术涉及关苍术组织培养技术领域。本发明专利技术提供了一种提高关苍术组培苗成活率的培育方法，包括如下步骤：(1)将关苍术种子消毒后接种到启动培养基中，培育得到关苍术无菌苗；(2)将关苍术无菌苗转接到增殖培养基中，培育得到关苍术丛生芽；(3)将关苍术丛生芽接种到壮苗生根培养基中，培育得到关苍术试管苗；(4)将关苍术试管苗驯化后接种到育苗基质中，培养后移栽到大田中。本发明专利技术的方法培育的关苍术试管苗品质好，叶片浓绿，褐化和黄化现象明显较对比例低；试管苗移栽成活高；所培育的关苍术丛生芽增殖系数高，达到5.43，有利于保存和培育关苍术优良种质资源，有利于关苍术野生资源的保护，并为今后的人工栽培提供优质种苗。并为今后的人工栽培提供优质种苗。并为今后的人工栽培提供优质种苗。
【技术实现步骤摘要】
一种提高关苍术组培苗成活率的培育方法
[0001]本专利技术涉及关苍术组织培养
，尤其涉及一种提高关苍术组培苗成活率的培育方法。
技术介绍
[0002]关苍术(学名：Atractylodesjaponica Koidz.ex Kitam.)是菊科，苍术属多年生草本植物，高可达80厘米。《中国药典》仅记载苍术为茅苍术或北苍术，未收录关苍术，但根据《中国植物志》的描述，北苍术实为一个混杂的商品名称，不仅包括苍术本种，也包括关苍术。关苍术别名关东苍术、枪头菜，主要分布在我国的吉林省、黑龙江省、辽宁省的东北部；俄罗斯的西伯利亚、朝鲜、日本也有分布。关苍术的药用部位为球状根，含有丰富的有效成分，即球状根部挥发油。随着苍术在市场上需求逐年增大、野生资源大量采挖、生存环境日益恶化，导致其野生资源逐年递减。在此背景下，关苍术因其蕴含的庞大药用价值正逐渐成为苍术药材的潜在替代品。
[0003]关苍术人工栽培繁殖以根状茎繁殖为主，但传统繁殖方法繁殖系数低、周期长。为了保证关苍术资源的可持续利用和对这种野生药用植物进行保护，进行关苍术的离体快繁研究迫在眉睫。
技术实现思路
[0004]本专利技术的目的在于提供一种提高关苍术组培苗成活率的培育方法，以关苍术种子为外植体，研究了其无菌系建立与丛生芽的诱导和增殖、生根技术以及试管苗炼苗移栽，为关苍术的人工栽培和种质资源保存提供一定的技术支持。
[0005]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
[0006]本专利技术提供了一种提高关苍术组培苗成活率的培育方法，包括如下步骤：
[0007](1)将关苍术种子消毒后接种到启动培养基中，培育得到关苍术无菌苗；
[0008](2)将关苍术无菌苗转接到增殖培养基中，培育得到关苍术丛生芽；
[0009](3)将关苍术丛生芽接种到壮苗生根培养基中，培育得到关苍术试管苗；
[0010](4)将关苍术试管苗驯化后接种到育苗基质中，培养后移栽到大田中。
[0011]作为优选，步骤(1)中所述消毒的方法为：用70～80％的酒精消毒30～40s，用水冲洗2～3遍，再用0.08～0.12％的氯化汞消毒8～10min，用水冲洗2～3遍。
[0012]作为优选，步骤(1)中所述启动培养基为：MS+6
‑
BA3.0～4.0mg/L+NAA 0.1～0.3mg/L+琼脂7.0～7.5g/L+蔗糖25～30g/L，所述启动培养基的pH值为5.8～6.0，步骤(1)中所述培育的时间为15～21d。
[0013]作为优选，步骤(2)中所述增殖培养基为：MS+6
‑
BA 1.8～2.2mg/L+NAA 0.18～0.22mg/L+琼脂7.0～7.5g/L+蔗糖25～30g/L，所述增殖培养基的pH值为5.8～6.0，步骤(2)中所述培育时每21～25d转接到新的增殖培养基中，连续转接2～3次。
[0014]作为优选，步骤(3)中所述壮苗生根培养基为：1/2MS+NAA 0.2～0.5mg/L+琼脂7.0
～7.5g/L+蔗糖25～30g/L，所述壮苗生根培养基的pH值为5.8～6.0，步骤(3)中所述培育的时间为21～28d。
[0015]作为优选，步骤(3)中所述壮苗生根培养基中还含有活性炭，所述活性炭的浓度为0.2～0.5g/L。
[0016]作为优选，步骤(1)～步骤(3)中所述培育的温度独立的为23～25℃，湿度独立的为75～85％，光照时间独立的为14～16h/d，光照强度独立的为2000～2500Lx。
[0017]作为优选，步骤(4)中所述驯化的温度为15～20℃，驯化的湿度为60～75％，所述驯化的时间为3～5d。
[0018]作为优选，步骤(4)中所述驯化后用300～500mg/L的多菌灵溶液浸泡30～40min，所述育苗基质包括如下体积份的原料：蛭石1.8～2.2份、营养土0.8～1.2份、珍珠岩0.8～1.2份。
[0019]作为优选，步骤(4)中所述培养温度为21～25℃，光照强度为2000～3000Lx，湿度为60～70％，所述培养的时间为28～35d。
[0020]本专利技术提供了一种提高关苍术组培苗成活率的培育方法，包括如下步骤：(1)将关苍术种子消毒后接种到启动培养基中，培育得到关苍术无菌苗；(2)将关苍术无菌苗转接到增殖培养基中，培育得到关苍术丛生芽；(3)将关苍术丛生芽接种到壮苗生根培养基中，培育得到关苍术试管苗；(4)将关苍术试管苗驯化后接种到育苗基质中，培养后移栽到大田中。本专利技术培育的关苍术试管苗品质好，叶片浓绿，褐化和黄化现象明显较对比例低；试管苗移栽成活高；所培育的关苍术丛生芽增殖系数高，达到5.43。本专利技术所获得的关苍术试管苗能够保持母本的优良特性，发生变异的可能性较低，有利于保存和培育关苍术优良种质资源。此外本专利技术建立的关苍术离体快繁技术体系不会被天气、季节能难控因素限制。因此它也具有生产效率高的优点，能够有效减少人力、财力的支出。节省土地和繁殖材料，有利于关苍术野生资源的保护，并为今后的人工栽培提供优质种苗。同时，本专利技术所用的启动培养基，可以直接培养增殖系数在2～3的增殖苗，从种子建立无菌系中就可以让关苍术具有增殖系数，然后再转接到增殖培养基进一步增加增殖系数，便于大规模扩繁关苍术组培苗。
附图说明
[0021]图1为关苍术无菌系建立照片；
[0022]图2为关苍术种子培养14d后，子叶伸出照片；
[0023]图3为关苍术种子培养30d后，增殖幼苗照片；
[0024]图4为关苍术增殖组培苗；
[0025]图5为关苍术生根组培苗；
[0026]图6为关苍术组培苗瓶外炼苗移栽照片。
具体实施方式
[0027]本专利技术提供了一种提高关苍术组培苗成活率的培育方法，包括如下步骤：
[0028](1)将关苍术种子消毒后接种到启动培养基中，培育得到关苍术无菌苗；
[0029](2)将关苍术无菌苗转接到增殖培养基中，培育得到关苍术丛生芽；
[0030](3)将关苍术丛生芽接种到壮苗生根培养基中，培育得到关苍术试管苗；
[0031](4)将关苍术试管苗驯化后接种到育苗基质中，培养后移栽到大田中。
[0032]在本专利技术中，所述种子在消毒前优选用450～550mg/L GA3溶液浸泡24～36h，进一步优选为用500mg/L GA3溶液浸泡30h.
[0033]在本专利技术中，步骤(1)中所述消毒的方法优选为：用70～80％的酒精消毒30～40s，用水冲洗2～3遍，再用0.08～0.12％的氯化汞消毒8～10min，用水冲洗2～3遍，进一步优选为用75％的酒精消毒35s，用水冲洗3遍，再用0.1％的氯化汞消毒9min，用水冲洗3遍。
[0034]在本专利技术中，步骤(1)中所述启动培养基优选为：MS+6
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BA 3.0～4.0mg/L+NAA 0.1～0.3mg/L+本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种提高关苍术组培苗成活率的培育方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将关苍术种子消毒后接种到启动培养基中，培育得到关苍术无菌苗；(2)将关苍术无菌苗转接到增殖培养基中，培育得到关苍术丛生芽；(3)将关苍术丛生芽接种到壮苗生根培养基中，培育得到关苍术试管苗；(4)将关苍术试管苗驯化后接种到育苗基质中，培养后移栽到大田中。2.根据权利要求1所述的培育方法，其特征在于，步骤(1)中所述消毒的方法为：用70～80％的酒精消毒30～40s，用水冲洗2～3遍，再用0.08～0.12％的氯化汞消毒8～10min，用水冲洗2～3遍。3.根据权利要求2所述的培育方法，其特征在于，步骤(1)中所述启动培养基为：MS+6
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BA3.0～4.0mg/L+NAA0.1～0.3mg/L+琼脂7.0～7.5g/L+蔗糖25～30g/L，所述启动培养基的pH值为5.8～6.0，步骤(1)中所述培育的时间为15～21d。4.根据权利要求3所述的培育方法，其特征在于，步骤(2)中所述增殖培养基为：MS+6
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BA1.8～2.2mg/L+NAA0.18～0.22mg/L+琼脂7.0～7.5g/L+蔗糖25～30g/L，所述增殖培养基的pH值为5.8～6.0，步骤(2)中所述培育时每21～25d转接到新的增殖培养基中，连续转接2～...
【专利技术属性】
技术研发人员：郭兰萍，张成才，王升，代晓雨，闫滨滨，王红阳，
申请(专利权)人：中国中医科学院中药研究所，
类型：发明
国别省市：
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