一种高效获取高纯度肌酸激酶同工酶CK-MB的方法技术

本申请提供了一种高效获取高纯度肌酸激酶同工酶CK

【技术实现步骤摘要】
一种高效获取高纯度肌酸激酶同工酶CK
‑
MB的方法


[0001]本申请属于生物医学检验
，更具体地说，是涉及一种高效获取高纯度肌酸激酶同工酶CK
‑
MB的方法。

技术介绍

[0002]肌酸激酶(CK)是一种二聚体酶，有四种同功酶形式，分别为肌肉型(CK
‑
MM)、脑型(CK
‑
BB)、杂化型(CK
‑
MB)和线粒体型(CK
‑
Mt)。MM型主要存在于各种肌肉细胞中，BB型主要存在于脑细胞中，MB型主要存在于心肌细胞中，Mt型主要存在于心肌和骨骼肌线粒体中。
[0003]在心衰、心肌炎等疾病中，CK
‑
MB均可作为标志物进行综合评估诊断。心肌细胞损伤主要以CK
‑
MB增高为主，总CK也会随之增高。一般情况下，CK
‑
MB在心梗起病4小时内升高，16
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24小时到达高峰，3
‑
4天恢复正常，若未恢复，表明梗死持续发展。其增高的程度能较准确地本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种高效获取高纯度肌酸激酶同工酶CK
‑
MB的方法，其特征在于，包括以下步骤：将高活性的CK
‑
MM蛋白置于第一变性剂溶液中进行第一变性处理得到无活性的变性CK
‑
MM蛋白溶液；将与所述高活性的CK
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MM蛋白活性相当的CK
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BB蛋白置于第二变性剂溶液中进行第二变性处理得到无活性的变性CK
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BB蛋白溶液；将所述变性CK
‑
MM蛋白溶液和所述变性CK
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BB蛋白溶液等活性混合，置于复性剂溶液中进行复性处理得到混合蛋白溶液；将所述混合蛋白溶液进行纯化处理得到只含高纯度高活性的肌酸激酶同工酶CK
‑
MB。2.如权利要求1所述的一种高效获取高纯度肌酸激酶同工酶CK
‑
MB的方法，其特征在于，所述第一变性剂溶液为含有3～6M第一变性剂、50～80mM第一缓冲液、5～10mM第一还原剂的溶液，溶液pH为7.0～8.5。3.如权利要求2所述的一种高效获取高纯度肌酸激酶同工酶CK
‑
MB的方法，其特征在于，所述第一变性剂为以下至少一种：盐酸胍、尿素；和/或，所述第一缓冲液为以下至少一种：Tris
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HCl缓冲液、PIPES缓冲液、MOPS缓冲液；和/或，所述第一还原剂为以下至少一种：二硫基苏糖醇、半胱氨酸；和/或，所述第一变性处理条件为：4～25℃下静置或搅拌10～24h。4.如权利要求1所述的一种高效获取高纯度肌酸激酶同工酶CK
‑
MB的方法，其特征在于，所述第二变性剂溶液为含有2～4M第二变性剂、50～80mM第二缓冲液、5～10mM第二还原剂的溶液，溶液pH为7.0～8.5。5.如权利要求4所述的一种高效获取高纯度肌酸激酶同工酶CK
‑
MB的方法，其特征在于，所述第二变性剂为以下至少一种：...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡卫江，胡逸姗，陈铭伟，
申请(专利权)人：嘉兴优瑞生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：