芬戈莫德抑制乙肝病毒复制和乙肝性肝损伤的用途制造技术

本发明专利技术提供一种游离形式或药学上可接受的盐形式的芬戈莫德在制备预防或治疗乙肝病毒诱发的疾病中的用途。毒诱发的疾病中的用途。毒诱发的疾病中的用途。

【技术实现步骤摘要】
芬戈莫德抑制乙肝病毒复制和乙肝性肝损伤的用途


[0001]本申请涉及医药领域，具体涉及芬戈莫德在抑制乙肝病毒复制和乙肝性肝损伤的新用途。

技术介绍

[0002]Fingolimod hydrochloride (FTY720)，中文名盐酸芬戈莫德，是一种鞘氨醇的类似物，是有效的 1
‑
磷酸鞘氨醇 (S1P) 受体调节剂。Fingolimod hydrochloride 被鞘氨醇激酶磷酸化，特别是被 SK2 磷酸化，然后可与 S1PR1、3、4 和 5 结合。Fingolimod hydrochloride 诱导 S1P1 的内在化，因此具有抑制 S1P 的活性。
[0003]FTY720的分子量为343.93，分子式为C
19
H
34
ClNO2，化学结构为：
[0004]FTY720的主要临床应用方向为免疫抑制剂，FTY720是一种来源于子囊菌冬虫夏草的新型免疫抑制剂,与常规免疫抑制剂环孢素、他克莫司、西罗莫司等相比具有不同的作用机制,其主要通过致淋巴细胞凋亡及归巢效应等起到免疫抑制的作用,在多种动物模型的同种异体移植中具有抑制移植物排斥作用,在人体肾脏移植中也呈较强的免疫抑制活性,故在临床器官移植及自身免疫性疾病的治疗等方面具有广泛的应用前景。
[0005]已获批的临床应用包括：诺华(Novartis)的芬戈莫德（Fingolimod）已被国家药品监督管理局药品审评中心（CDE）列为了第一批临床急需境外新药，并且2019年在国内获批上市，主要用于治疗多发性硬化症（第一个口服用药）。自2010年上市以来，芬戈莫德销售额持续增长，鉴于芬戈莫德不良反应，诺华研发出了第二代MS药物西尼莫德（Siponimod），它是新一代选择性S1PR调节剂，并且已被我国CDE纳入优先评审名单。
[0006]CN106667981A公开了盐酸芬戈莫德（FTY720）在制备治疗药物性肝损伤药物中的应用，尤其是对乙酰氨基酚（APAP）诱导的肝损伤中谷丙转氨酶和谷草转氨酶的水平，减少肝组织坏死面积，降低致死剂量APAP诱导的小鼠死亡率，减少药物性肝损伤时炎症因子和趋化因子的表达量。
[0007]现有技术中尚未有FTY720在治疗乙肝方面的报导，乙肝治疗的困境主要是，直接的抗病毒药物如恩替卡韦，能抑制乙肝病毒的复制，但不能清除乙肝病毒HBV 胞内的cccDNA，以cccDNA为模板还会合成病毒一些重要的功能调节蛋白如HBx，HBx可以调控肝细胞的一些基因表达，影响肝细胞的增殖、凋亡、脂代谢、糖代谢等等。肝细胞这些自身的改变，诱发一些自身免疫反应，使肝脏微环境长期处于一种免疫损伤状态，进而发展为肝纤维化、肝衰竭、肝硬化、癌变等乙肝性相关肝病。
[0008]本专利技术发现，FTY720除了能直接抑制病毒复制，还可以抑制HBx的转录翻译，减少
引起肝损伤的病毒相关调节蛋白的合成，另外，还可以抑制T细胞的活化和趋化。

技术实现思路

[0009]本专利技术提供一种游离形式或药学上可接受的盐形式的芬戈莫德在制备预防或治疗乙肝病毒诱发的疾病中的用途。
[0010]在某些实施方式中，所述疾病包括乙肝病毒诱发的肝细胞损伤、坏死或肝功能异常。
[0011]在某些实施方式中，所述疾病包括乙型肝炎以及乙肝病毒诱发的肝纤维化、肝衰竭、肝硬化或癌变。
[0012]在某些实施方式中，所述疾病包括急性乙型肝炎、慢性乙型肝炎、重型乙型肝炎（肝衰竭）、淤胆型乙型肝炎（毛细胆管炎型乙型肝炎）、乙型肝炎肝硬化、乙型肝炎肝纤维化、伴有乙型肝炎的肝细胞肝癌（hepatocellularcarcinoma，HCC）。
[0013]在某些实施方式中，所述药学上可接受的盐形式的芬戈莫德为盐酸芬戈莫德。
[0014]本专利技术进一步提供一种药物组合物，其包括a)第一组分,其是如前所述的游离形式或药学上可接受的盐形式的芬戈莫德，和b)第二组份，具有抗乙肝病毒活性的助剂。
[0015]在某些实施方式中，所述第二组份选自恩替卡韦、富马酸替诺福韦二吡呋酯和替诺福韦艾拉酚胺中的一种或多种。
[0016]本领域技术人员能够从下文的详细描述中容易地洞察到本申请的其它方面和优势。下文的详细描述中仅显示和描述了本申请的示例性实施方式。如本领域技术人员将认识到的，本申请的内容使得本领域技术人员能够对所公开的具体实施方式进行改动而不脱离本申请所涉及专利技术的精神和范围。相应地，本申请的附图和说明书中的描述仅仅是示例性的，而非为限制性的。
附图说明
[0017]本申请所涉及的专利技术的具体特征如所附权利要求书所显示。通过参考下文中详细描述的示例性实施方式和附图能够更好地理解本申请所涉及专利技术的特点和优势。对附图简要说明书如下：图1FTY720抑制HBV感染引起的免疫细胞的趋化图
实施方式
[0018]以下由特定的具体实施例说明本申请专利技术的实施方式，熟悉此技术的人士可由本说明书所公开的内容容易地了解本申请专利技术的其他优点及效果。
[0019]实施例1：FTY720抑制病毒复制和HBx合成1、实验过程（1）乙肝性肝癌细胞系HepG2.2.15模型HepG2.2.15是表达HBV病毒的肝癌细胞系，常用于乙肝相关药物的筛选，具体试验步骤如下。
[0020]①
HepG2.2.15细胞在含有10%FBS的MEM完全培养基中培养。传代2次后，105个/孔
接种于12孔平板中。
[0021]②
各孔培养基中分别加入浓度为1.5ug/ml的恩替卡韦（ETV，目前临床常用治疗乙肝的药物），5uM FTY720，未处理的细胞作为对照。
[0022]③
共培养2天后收集上清液检测相关的病毒标志物，收集细胞检测胞内的病毒标志物。
[0023]（2）HBV病毒感染HepG2
‑
NTCP模型HepG2
‑
NTCP是过表达乙肝病毒受体NTCP的肝癌细胞，本身不含乙肝病毒，可以使用外源性HBV病毒颗粒感染HepG2
‑
NTCP细胞，用于体外模拟病毒感染的过程，是常用的HBV感染模型，可用于药物筛选、研究乙肝感染机制等方面的试验研究。
[0024]①
外源性乙肝病毒，来源于HBsAg阳性和HBV DNA大于107IU/ml的患者血清，阴性对照为HBV阴性的健康人血清，感染细胞前通过过滤除菌。
[0025]②
HepG2
‑
NTCP细胞在含有10% FBS的DMEM完全培养基中培养，106个/孔接种于6孔板中，贴壁6小时以上。
[0026]③
HBV病毒接触，将含有“病毒的阳性血清500ul＋2%聚乙二醇8000（PEG8000，浓缩聚集病毒）+1%DMSO”加入到总体积2ml的培养液中，与上述贴壁的细胞共培养过夜。不含HBV病毒的阴性血清，同步处理作为阴性对照；不加人血清的培养孔，同步处理作为空白对照。
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.芬戈莫德在制备预防或治疗乙肝病毒诱发的疾病中的用途，其特征在于，所述芬戈莫德是游离形式或药学上可接受的盐。2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述疾病包括乙肝病毒诱发的肝细胞损伤、坏死或肝功能异常。3.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述疾病包括乙型肝炎及乙肝病毒诱发的肝纤维化、肝衰竭、肝硬化或癌变。4.如权利要求3所述的用途，其特征在于，所述疾病包括急性乙型肝炎、慢性乙型肝炎、重型乙型肝炎、淤胆型乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化、乙型肝炎肝纤维化、伴有乙型肝炎...

【专利技术属性】
技术研发人员：韩清珍，王琳，章璐，刘娟，
申请(专利权)人：苏州市独墅湖医院苏州大学附属独墅湖医院，
类型：发明
国别省市：