α-氰基苯撑乙烯衍生物在检测人血清白蛋白中的用途制造技术

本发明专利技术提供了一种α

【技术实现步骤摘要】
α
‑
氰基苯撑乙烯衍生物在检测人血清白蛋白中的用途


[0001]本专利技术具体涉及一种α
‑
氰基苯撑乙烯衍生物及其制备方法和应用，包括所述α
‑
氰基苯撑乙烯衍生物在制备比率荧光探针及人血清白蛋白（HSA）的现场可视化检测中的应用，属于生物检测


技术介绍

[0002]人血清白蛋白（HSA）是一种与人体相关疾病密切相关的生物标志物。它是血浆中最丰富的蛋白质，对于维持人体的正常生理功能具有重要作用。HSA在血浆中的正常浓度范围为35
‑
55 mg/mL，如果浓度过低，可能导致低蛋白血症，反映出人体营养不良，或者肝脏或肾脏功能受损等。HSA在尿液中的正常浓度不应超过30 mg/L，如果浓度过高，即为微量白蛋白尿，预示着糖尿病和高血压患者有心血管疾病和肾脏疾病的风险。
[0003]目前临床上常用的检测HSA的方法有比色溴甲酚绿（BCG）法和酶联免疫吸附测定法(ELISA)。这两种方法都能够对HSA的检测给出可靠的结果。但是它们也存在一个共同的问题：从样品的预处理到测试再到数据分析，整个流程需要耗费较长的时间（例如ELISA大约需要3 h），不利于现场快速检测。

技术实现思路

[0004]本专利技术的主要目的在于提供一种α
‑
氰基苯撑乙烯衍生物在检测人血清白蛋白中的用途，以克服现有技术中的不足。
[0005]为实现前述专利技术目的，本专利技术采用的技术方案包括：本专利技术的一个方面提供了一种α/>‑
氰基苯撑乙烯衍生物，其结构如式I所示，，其中，R1独立地选自C1‑4烷基，R2为
‑
O
‑
C3‑
12
烷基
‑
Y，X选自F、Cl、Br、I或CN，Y选自吡啶鎓离子或铵离子。
[0006]在一个实施例中，R1选自甲基、乙基或正丙基。两个R1可以相同或不同。
[0007]在一个实施例中，所述铵离子可以包括三甲基铵离子、三乙基铵离子等，且不限于此。
[0008]本专利技术的另一个方面提供了一种制备所述α
‑
氰基苯撑乙烯衍生物的方法，其包括：
使式II所示化合物与Br(CH2)
n
Br反应，获得式III所示化合物；使式III所示化合物与式IV所示化合物反应，获得式V所示化合物；使式V所示化合物与有机碱反应，获得所述α
‑
氰基苯撑乙烯衍生物；，其中的R1、R2、X与上文相同，此处不再赘述，n为3~12中的任一整数。
[0009]在一个实施例中，所述α
‑
氰基苯撑乙烯衍生物的制备方法包括如下步骤：S1、在保护性气氛中，将式II所示化合物和氢化钠按2.0～10.0：1.0～2.5的质量比溶于超干极性有机溶剂（例如超干四氢呋喃）中，得到混合溶液1；S2、在常温搅拌条件下，将Br(CH2)
n
Br分批加入所述混合溶液1，Br(CH2)
n
Br与式II所示化合物的质量比为1.0～2.5:1.0～1.5，得到混合溶液2；S3、使所述混合溶液2在70～105 ℃的温度条件下回流反应，并在反应结束后，从所获反应混合物中分离获得式III所示化合物；S4、将式III所示化合物和式IV所示化合物溶于极性有机溶剂中，并加入哌啶，使式III所示化合物、式IV所示化合物和哌啶的质量比为3.0～10.0：1.0～6.0：1.0～5.0，室温下搅拌反应，在反应结束后，从所获反应混合物中分离获得式V所示化合物；S5、使式V所示化合物和过量的有机碱在50～150℃的温度条件下回流反应，并在反应结束后，从所获反应混合物中分离获得所述α
‑
氰基苯撑乙烯衍生物。
[0010]较为优选的，步骤S1中式II所示化合物和氢化钠的质量比为5.0～7.0：1.4～2.2。其中超干四氢呋喃的含水率在100ppm以下，优选在30ppm以下。
[0011]较为优选的，步骤S2中Br(CH2)
n
Br与式II所示化合物的质量比大于1:1但小于2.5:1。
[0012]较为优选的，步骤S3中是使所述混合溶液2在75～85 ℃的温度条件下进行所述的回流反应。
[0013]较为优选的，步骤S4中式III所示化合物、式IV所示化合物和哌啶的质量比为5.0～6.0：3.8～4.6：1.7～3.5。
[0014]较为优选的，步骤S5中是使式V所示化合物和过量的有机碱在100～110 ℃的温度条件下进行所述的回流反应。
[0015]在一个实施例中，所述有机碱包括但不限于吡啶、三甲胺或三乙胺等。
[0016]在一个实施例中，所述极性有机溶剂包括但不限于甲醇或乙醇等。
[0017]在本专利技术中所述保护性气氛可以是氮气气氛、惰性气氛（如氩气气氛）或其混合气氛。
[0018]在一个实施例中，步骤S2具体可以包括：将Br(CH2)
n
Br溶于超干THF中，并在常温搅拌条件下滴加到所述混合溶液1中，从而制得所述混合溶液2。
[0019]在一个实施例中，步骤S3具体可以包括：在反应结束后，将所获反应混合物用二氯甲烷/水体系萃取，之后干燥和减压蒸馏，得到粗产物，然后将粗产物进行硅胶柱层析，用石油醚和乙酸乙酯为淋洗剂，分离得到式III所示化合物。
[0020]在一个实施例中，步骤S4具体可以包括：在反应结束后，对所获反应混合物进行过滤，并用冰乙醇清洗得到的固体，从而分离获得式V所示化合物。
[0021]在一个实施例中，步骤S5具体可以包括：将式V所示化合物溶于过量的有机碱中，得到混合溶液3，再使所述混合溶液3在100～110℃的温度条件下回流反应24～30h，并在反应结束后将所获反应混合物减压蒸馏，除去残留的有机碱，得到粗产物，然后用少量有机溶剂（例如二氯甲烷）将该粗产物溶解，之后滴加到大量乙醚中，使固体产物析出，进而分离得到目标产物，即所述α
‑
氰基苯撑乙烯衍生物。
[0022]本专利技术的所述α
‑
氰基苯撑乙烯衍生物的发光波长在490～600 nm之间，其可以很好的克服现有苯撑乙烯衍生物存在的如下缺陷，例如：发光波长较短，荧光信号容易与生物体系的自体荧光相混合；发光强度较低，相应的检测限比较低。
[0023]同时，本专利技术的所述α
‑
氰基苯撑乙烯衍生物为两亲性分子，其中R2为亲水性基团，苯并噻唑等为疏水结构单元，依靠疏水相互作用和分子间的π
‑
π作用，使得所述α
‑
氰基苯撑乙烯衍生物可在水中自组装形成胶束状的聚集体，该聚集体可在较长的波长处（550～750 nm）之间产生新的荧光峰。并且，该聚集体还与人血清白蛋白（HSA）有特异性的相互作用。具体而言，该聚集体在水相体系中与人血清白蛋白（HSA）接触时会解组装，使聚集体产生的荧光（峰值波长约630～670 nm）的强度减弱，同时使α本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种α
‑
氰基苯撑乙烯衍生物在制备人血清白蛋白检测试剂中的用途，其特征在于：所述α
‑
氰基苯撑乙烯衍生物的结构如式I所示，，其中，R1独立地选自C1‑4烷基，R2为
‑
O
‑
C3‑
12
烷基
‑
Y，X选自F、Cl、Br、I或CN，Y选自吡啶鎓离子、三甲基铵离子或三乙基铵离子。2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：R1选自甲基、乙基或正丙基。3.如权利要求1
‑
2中任一项所述的用途，其特征在于，所述α
‑
氰基苯撑乙烯衍生物的制备方法包括：使式II所示化合物与Br(CH2)
n
Br反应，获得式III所示化合物；使式III所示化合物与式IV所示化合物反应，获得式V所示化合物；使式V所示化合物与有机碱反应，获得所述α
‑
氰基苯撑乙烯衍生物，所述有机碱选自吡啶、三甲胺或三乙胺；，其中，n为3~12中的任一整数。4.根据权利要求3所述的用途，其特征在于，所述α
‑
氰基苯撑乙烯衍生物的制备方法具体包括：S1、在保护性气氛中，将式II所示化合物和氢化钠按2.0～10.0：1.0～2.5的质量比溶于超干四氢呋喃中，得到混合溶液1；S2、在常温搅拌条件下，将Br(CH2)
n
Br分批加入所述混合溶液1，Br(CH2)
n
Br与式II所示化合物的质量比为1.0～2.5:1.0～1.5，得到混合溶液2；
S3、使所述混合溶液2在70～105 ℃的温度条件下回流反应，并在反应结束后，从所获反应混合物中分离获得式III所示化合物；S4、将式III所示化合物和式IV所示化合物溶于极性有机溶剂中，并加入哌啶，使式III所示化合物、式IV所示化合物和哌啶的质量比为3.0～10.0：1....

【专利技术属性】
技术研发人员：苏敏，宋波，周亚峰，张卫国，黄煜伦，
申请(专利权)人：苏州市独墅湖医院苏州大学附属独墅湖医院，
类型：发明
国别省市：