吴茱萸或石虎的UPLC特征图谱构建方法及其应用技术

本发明专利技术提供了一种吴茱萸或石虎的UPLC特征图谱构建方法，包括如下步骤：取新绿原酸、绿原酸、金丝桃苷、橙皮苷、去氢吴茱萸碱、吴茱萸碱与吴茱萸次碱对照品，制备混合对照品溶液；取吴茱萸药材或石虎药材，制备吴茱萸供试品溶液或石虎供试品溶液；将所述吴茱萸供试品溶液或石虎供试品溶液，以及所述混合对照品溶液进行超高效液相色谱测定。该特征图谱构建方法专属性强、耗时短、峰识别数目多，极大地节省了检测成本，并提高了分析效率。并提高了分析效率。并提高了分析效率。

【技术实现步骤摘要】
吴茱萸或石虎的UPLC特征图谱构建方法及其应用


[0001]本专利技术涉及医药
，特别是涉及一种吴茱萸或石虎的UPLC特征图谱构建方法及其应用。

技术介绍

[0002]吴茱萸为芸香科植物吴茱萸Euodia rutaecarpa(Juss.)Benth.、石虎Euodia rutaecarpa(Juss.)Benth.var.officinalis(Dode)Huang或疏毛吴茱萸Euodia rutaecarpa(Juss.)Benth.var.bodinieri(Dode)Huang的干燥近成熟果实，又名食茱萸、吴萸、茶辣与漆辣子等，始载于《神农本草经》，列为中品。其味辛、苦，热，有小毒。归肝、脾、胃、肾经。具有温脾止泻、散寒止痛与降逆止呕等功效，常用于厥阴头痛、寒疝腹痛、寒湿脚气、经行腹痛、脘腹胀痛、呕吐吞酸以及五更泄泻等。吴茱萸的主要活性成分为吲哚生物碱类、喹诺酮生物碱类与内酯类等。有文献报道吴茱萸生物碱类成分具有强心、保护心脏与舒张血管的作用，其对血压的影响呈先降后升，还能松弛胃肠平滑肌，具有较好的抗肿瘤作用。
[0003]吴茱萸原植物以栽培为主，全国各地都有大面积的栽种，主产于江西、广西、安徽与重庆等地区，但由于各地采收季节差异、异地引种及基原多样等现象，导致各地吴茱萸药材的质量差异非常大。中国药典规定吴茱萸的基原为芸香科植物吴茱萸、石虎或疏毛吴茱萸。目前吴茱萸商品药材流通情况调查显示其主要以原植物来源的吴茱萸的各种栽培品种为主，吴茱萸在我国分布广，适应性强，变种多，石虎来源次之，疏毛吴茱萸在市场上所占比例很小，且疏毛吴茱萸产地较少，种植面积较小。但是，三种基原的吴茱萸植物形态特征较为相似，很难实现吴茱萸药材基原的鉴别。
[0004]现代学者对吴茱萸的研究多集中成分分析及含量测定。由于吴茱萸中药其植物形态特征的相似性、有效成分的多样性及复杂性，中药指纹图谱或特征图谱能够提供更全面、丰富的信息，常用于中药材得到质量控制研究。特征图谱是利用现代信息采集技术和质量分析手段得到的能够显现中药材或其他剂型性质的图像、光谱的图谱及数据，能比较全面地反映中药所含化学成分的种类与数量，评价整体性质量，能为吴茱萸的药材质量评价提供一定参考。然而，尽管关于不同基原的吴茱萸质量差异的比较已有多篇报道，但研究结论并不一致，并且目前建立的鉴别方法存在样品批次少、耗时长或色谱峰少等问题，无法全面表征吴茱萸的化学成分类型。

技术实现思路

[0005]基于此，本专利技术提供了一种吴茱萸或石虎的UPLC特征图谱构建方法，其专属性强、耗时短、峰识别数目多，极大地节省了检测成本，并提高了分析效率。
[0006]本专利技术通过如下技术方案实现。
[0007]一种吴茱萸或石虎的UPLC特征图谱构建方法，包括如下步骤：
[0008]取新绿原酸、绿原酸、金丝桃苷、橙皮苷、去氢吴茱萸碱、吴茱萸碱与吴茱萸次碱对照品，制备混合对照品溶液；
[0009]取吴茱萸药材或石虎药材，制备吴茱萸供试品溶液或石虎供试品溶液；
[0010]将所述吴茱萸供试品溶液或石虎供试品溶液，以及所述混合对照品溶液进行超高效液相色谱测定；
[0011]超高效液相色谱测定的条件包括：流动相A为乙腈，流动相B为磷酸水溶液；采用梯度洗脱；所述梯度洗脱的程序包括：0min～9min，流动相A的体积百分数为8％，9min～18min，流动相A的体积百分数从8％变化至30％，18min～28min，流动相A的体积百分数从30％变化至80％，28min～33min，流动相A的体积百分数从80％变化至100％。
[0012]在其中一个实施例中，所述磷酸水溶液中，磷酸的体积分数为0.05％～0.2％。
[0013]在其中一个实施例中，超高效液相色谱测定的条件还包括：色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱；柱温为30℃
±
2℃；流速为0.3mL/min
±
0.1mL/min；波长为254nm
±
20nm。
[0014]在其中一个实施例中，所述吴茱萸或石虎的UPLC特征图谱构建方法所构建的特征图谱中，共有特征峰的数量为18；其中，峰4为新绿原酸的色谱峰，峰6为绿原酸的色谱峰，峰9为金丝桃苷的色谱峰，峰11为橙皮苷的色谱峰，峰12为去氢吴茱萸碱的色谱峰，峰14为吴茱萸碱的色谱峰，峰15为吴茱萸次碱的色谱峰。
[0015]在其中一个实施例中，制备混合对照品溶液包括如下步骤：
[0016]将新绿原酸、绿原酸、金丝桃苷、橙皮苷、去氢吴茱萸碱、吴茱萸碱、吴茱萸次碱对照品与第一甲醇水溶液混合。
[0017]在其中一个实施例中，制备吴茱萸供试品溶液或石虎供试品溶液包括如下步骤：
[0018]将吴茱萸药材或石虎药材与第二甲醇水溶液混合，超声提取，然后过滤，取滤液。
[0019]在其中一个实施例中，所述第一甲醇水溶液中，甲醇的体积分数为60％～80％；所述第二甲醇水溶液中，甲醇的体积分数为60％～80％。
[0020]在其中一个实施例中，还包括如下步骤：
[0021]采用化学模式识别法对所述吴茱萸供试品溶液与石虎供试品溶液的图谱进行分析。
[0022]在其中一个实施例中，所述化学模式识别法包括相似度分析、聚类分析与主成分分析中的一种或多种。
[0023]本专利技术还提供一种如上所述的吴茱萸或石虎的UPLC特征图谱构建方法在鉴别吴茱萸与石虎中的应用。
[0024]与现有技术相比较，本专利技术的吴茱萸或石虎的UPLC特征图谱构建方法具有如下有益效果：
[0025]本专利技术采用超高效液相色谱法建立吴茱萸或石虎的特征图谱，通过筛选流动相分别为乙腈与磷酸水溶液，并限定梯度洗脱方式，最终构建的吴茱萸或石虎的特征图谱具有18个共有特征峰，以对照品为参照，指认了7个成分，所建立的特征图谱能较全面地反映出吴茱萸或石虎的整体信息。此外，本专利技术提供的供试品溶液的制备过程简单，特征图谱构建方法专属性强、耗时短、峰识别数目多，极大地节省了检测成本，并提高了分析效率，可作为吴茱萸或石虎药材质量控制的一种有效、可行的方法。
附图说明
[0026]图1为本专利技术提供的梯度条件1对应的色谱图；
[0027]图2为本专利技术提供的梯度条件2对应的色谱图；
[0028]图3为本专利技术提供的梯度条件3对应的色谱图；
[0029]图4为本专利技术提供的梯度条件4对应的色谱图；
[0030]图5为本专利技术提供的3D扫描图；
[0031]图6为本专利技术提供的不同波长对应的色谱图；
[0032]图7为本专利技术提供的不同色谱柱对应的色谱图；
[0033]图8为本专利技术提供的不同水相对应的色谱图；
[0034]图9为本专利技术提供的不同磷酸浓度对应的色谱图；
[0035]图10为本专利技术提供的不同有机相对应的色谱图；
[0036]图11为本专利技术提供的不同柱温对应的色谱图；
[0037]图12为本专利技术提供的不同流速本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种吴茱萸或石虎的UPLC特征图谱构建方法，其特征在于，包括如下步骤：取新绿原酸、绿原酸、金丝桃苷、橙皮苷、去氢吴茱萸碱、吴茱萸碱与吴茱萸次碱对照品，制备混合对照品溶液；取吴茱萸药材或石虎药材，制备吴茱萸供试品溶液或石虎供试品溶液；将所述吴茱萸供试品溶液或石虎供试品溶液，以及所述混合对照品溶液进行超高效液相色谱测定；超高效液相色谱测定的条件包括：流动相A为乙腈，流动相B为磷酸水溶液；采用梯度洗脱；所述梯度洗脱的程序包括：0min～9min，流动相A的体积百分数为8％，9min～18min，流动相A的体积百分数从8％变化至30％，18min～28min，流动相A的体积百分数从30％变化至80％，28min～33min，流动相A的体积百分数从80％变化至100％。2.根据权利要求1所述的吴茱萸或石虎的UPLC特征图谱构建方法，其特征在于，所述磷酸水溶液中，磷酸的体积分数为0.05％～0.2％。3.根据权利要求1所述的吴茱萸或石虎的UPLC特征图谱构建方法，其特征在于，超高效液相色谱测定的条件还包括：色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱；柱温为30℃
±
2℃；流速为0.3mL/min
±
0.1mL/min；波长为254nm
±
20nm。4.根据权利要求1所述的吴茱萸或石虎的UPLC特征图谱构建方法，其特征在于，所述吴茱萸或石虎的UPLC特征图谱构建方法所构...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴文平，曹斯琼，邢菊玲，潘礼业，刘晓琳，庞伟，黄上书，宋叶，古楚莹，刘潇晗，李国卫，陈向东，
申请(专利权)人：湖南一方天江药业有限公司，
类型：发明
国别省市：