平车前、车前及混合基原车前草中药药材的指纹图谱的构建方法及其应用技术

本发明专利技术涉及一种中药检测技术领域，特别涉及平车前、车前及混合基原车前草中药药材的指纹图谱的构建方法及其应用。所述平车前中药药材的指纹图谱的构建方法包括以下步骤：取平车前中药药材的全草或预设部位，制备供试品溶液，所述预设部位为根茎、叶或穗；取供试品溶液进行超高效液相色谱测定；色谱条件包括：流动相包括流动相A和流动相B，所述流动相A包括乙腈，所述流动相B包括磷酸水溶液，梯度洗脱。本发明专利技术所构建的指纹图谱，既可以用于解决车前、平车前以及市售混用基原车前草药材的区分鉴别问题，还可以用于分析车前草的质量，还可以用于明确车前草的来源。用于明确车前草的来源。用于明确车前草的来源。

【技术实现步骤摘要】
平车前、车前及混合基原车前草中药药材的指纹图谱的构建方法及其应用


[0001]本专利技术涉及中药检测
，特别涉及平车前、车前及混合基原车前草中药药材的指纹图谱的构建方法及其应用，具体涉及平车前中药药材的指纹图谱的构建方法，车前中药药材的指纹图谱的构建方法，混合基原车前草中药药材的指纹图谱的构建方法，平车前中药药材的不同部位的鉴别方法，车前中药药材的不同部位的鉴别方法，平车前中药药材、车前中药药材及混合基原车前草中药药材的鉴别方法，平车前中药药材、车前中药药材及混合基原车前草中药药材的质量评价方法。

技术介绍

[0002]车前草为车前科植物车前Plantago asiatica L.或平车前Plantago depressa Willd.的干燥全草，其性寒，味甘，具有清热利尿通淋、祛痰、凉血、解毒等功效。车前草中主要含有大车前苷、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷、车前草苷D等苯乙醇苷类成分，含有木犀草苷、木犀草素、芹菜素等黄酮及其苷类成分，以及京尼平苷酸、桃叶珊瑚苷等环烯醚萜及其苷类成分，这些化学成分具有抗病毒、肿瘤和增强免疫力、抗氧化、神经保护等药理作用。但2020年版《中国药典》车前草含量测定项下仅对大车前苷的限度进行了规定，这个单一指标成分显然难以全面反映车前草药材的整体质量。
[0003]此外，市面上流通的车前草药材常出现车前与平车前基源混用的情况，单纯从性状上难以区分。中药特征图谱/指纹图谱是中药整体性的化学表征，在中药质量评价方面应用广泛。因此，可通过分别构建车前、平车前以及市售混用基原车前草药材的指纹图谱的共有峰模式，解决市面上车前与平车前基源混用的情况，解决其质量参差不齐的问题。然而目前所构建的车前药材的特征图谱/指纹图谱共有峰的标定和指认较少，难以区分车前、平车前以及市售混用基原车前草药材。

技术实现思路

[0004]基于此，本专利技术第一方面提供一种平车前中药药材的指纹图谱的构建方法。其技术方案如下：
[0005]一种平车前中药药材的指纹图谱的构建方法，包括以下步骤：
[0006]取平车前中药药材的全草或预设部位，粉碎后加提取溶剂进行提取处理，收集提取液，制备供试品溶液，所述预设部位为根茎、叶或穗；
[0007]取所述供试品溶液进行超高效液相色谱测定；
[0008]所述超高效液相色谱的色谱条件包括：
[0009]流动相包括流动相A和流动相B，所述流动相A包括乙腈，所述流动相B包括磷酸水溶液，梯度洗脱；
[0010]所述梯度洗脱包括以下程序：
[0011]0～2min，所述流动相A的体积分数保持10％，所述流动相B的体积分数保持90％；
[0012]2min～4min，所述流动相A的体积分数由10％升高至13％，所述流动相B的体积分数由90％降低至87％；
[0013]4min～14min，所述流动相A的体积分数保持13％，所述流动相B的体积分数保持87％；
[0014]14min～24min，所述流动相A的体积分数由13％升高至15％，所述流动相B的体积分数由87％降低至85％；
[0015]24min～25min，所述流动相A的体积分数由15％升高至17％，所述流动相B的体积分数由85％降低至83％；
[0016]25min～31min，所述流动相A的体积分数由17％升高至22％，所述流动相B的体积分数由83％降低至78％；
[0017]31min～41min，所述流动相A的体积分数由22％升高至40％，所述流动相B的体积分数由78％降低至60％；
[0018]41min～50min，所述流动相A的体积分数由40％升高至68％，所述流动相B的体积分数由60％降低至32％；
[0019]50min～53min，所述流动相A的体积分数由68％升高至88％，所述流动相B的体积分数由32％降低至12％；
[0020]53min～54min，所述流动相A的体积分数由88％降低至10％，所述流动相B的体积分数由12％升高至90％；
[0021]54min～60min，所述流动相A的体积分数保持10％，所述流动相B的体积分数保持90％。
[0022]在其中一个实施例中，所述超高效液相色谱的色谱条件还包括：
[0023]0～3min，检测波长为240nm～250nm；3min～48min，检测波长为320nm～340nm，48min～60min，检测波长为240nm～250nm。
[0024]在其中一个实施例中，所述超高效液相色谱的色谱条件还包括：柱温为28℃～32℃。
[0025]在其中一个实施例中，所述超高效液相色谱的色谱条件还包括：流速为0.25mL/min～0.35mL/min。
[0026]在其中一个实施例中，所述超高效液相色谱的色谱条件还包括：进样量为1μL～2μL。
[0027]在其中一个实施例中，所述超高效液相色谱的色谱条件还包括：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂。
[0028]在其中一个实施例中，所述超高效液相色谱的色谱条件还包括：所述磷酸水溶液中磷酸的体积分数为0.05％～0.2％。
[0029]在其中一个实施例中，所述提取溶剂为甲醇水溶液。
[0030]在其中一个实施例中，每1g所述平车前中药药材的全草或预设部位对应加入40mL～60mL的所述提取溶剂。
[0031]在其中一个实施例中，所述提取处理的方法为超声处理。
[0032]在其中一个实施例中，所述甲醇水溶液中甲醇的体积分数为40％～80％。
[0033]在其中一个实施例中，所述超声处理的时间为20min～40min。
[0034]本专利技术第二方面提供一种车前中药药材的指纹图谱的构建方法。其技术方案如下：
[0035]一种车前中药药材的指纹图谱的构建方法，包括以下步骤：
[0036]取车前中药药材的全草或预设部位，粉碎后加提取溶剂进行提取处理，收集提取液，制备供试品溶液，所述预设部位为根茎、叶或穗；
[0037]取所述供试品溶液进行超高效液相色谱测定；
[0038]所述超高效液相色谱的色谱条件包括：
[0039]流动相包括流动相A和流动相B，所述流动相A包括乙腈，所述流动相B包括磷酸水溶液，梯度洗脱；
[0040]所述梯度洗脱包括以下程序：
[0041]0～2min，所述流动相A的体积分数保持10％，所述流动相B的体积分数保持90％；
[0042]2min～4min，所述流动相A的体积分数由10％升高至13％，所述流动相B的体积分数由90％降低至87％；
[0043]4min～14min，所述流动相A的体积分数保持13％，所述流动相B的体积分数保持87％；
[0044]14min～24min，所述流动相A的体积分数由13％升高至15％，所述流动相B的体积分数由87％降低至85％；
[0045]24min～25min，所述流动相A的体积分本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种平车前中药药材的指纹图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：取平车前中药药材的全草或预设部位，粉碎后加提取溶剂进行提取处理，收集提取液，制备供试品溶液，所述预设部位为根茎、叶或穗；取所述供试品溶液进行超高效液相色谱测定；所述超高效液相色谱的色谱条件包括：流动相包括流动相A和流动相B，所述流动相A包括乙腈，所述流动相B包括磷酸水溶液，梯度洗脱；所述梯度洗脱包括以下程序：0～2min，所述流动相A的体积分数保持10％，所述流动相B的体积分数保持90％；2min～4min，所述流动相A的体积分数由10％升高至13％，所述流动相B的体积分数由90％降低至87％；4min～14min，所述流动相A的体积分数保持13％，所述流动相B的体积分数保持87％；14min～24min，所述流动相A的体积分数由13％升高至15％，所述流动相B的体积分数由87％降低至85％；24min～25min，所述流动相A的体积分数由15％升高至17％，所述流动相B的体积分数由85％降低至83％；25min～31min，所述流动相A的体积分数由17％升高至22％，所述流动相B的体积分数由83％降低至78％；31min～41min，所述流动相A的体积分数由22％升高至40％，所述流动相B的体积分数由78％降低至60％；41min～50min，所述流动相A的体积分数由40％升高至68％，所述流动相B的体积分数由60％降低至32％；50min～53min，所述流动相A的体积分数由68％升高至88％，所述流动相B的体积分数由32％降低至12％；53min～54min，所述流动相A的体积分数由88％降低至10％，所述流动相B的体积分数由12％升高至90％；54min～60min，所述流动相A的体积分数保持10％，所述流动相B的体积分数保持90％。2.根据权利要求1所述的平车前中药药材的指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述超高效液相色谱的色谱条件还包括以下条件中的至少一个：0～3min，检测波长为240nm～250nm；3min～48min，检测波长为320nm～340nm，48min～60min，检测波长为240nm～250nm；柱温为28℃～32℃；流速为0.25mL/min～0.35mL/min；进样量为1μL～2μL；以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；所述磷酸水溶液中磷酸的体积分数为0.05％～0.2％。3.根据权利要求1或2任一项所述的平车前中药药材的指纹图谱的构建方法，其特征在于，还包括以下特征中的至少一项：所述提取溶剂为甲醇水溶液；
每1g所述平车前中药药材的全草或预设部位对应加入40mL～60mL的所述提取溶剂；所述提取处理的方法为超声处理。4.根据权利要求3所述的平车前中药药材的指纹图谱的构建方法，其特征在于，还包括以下特征中的至少一项：所述甲醇水溶液中甲醇的体积分数为40％～80％；所述超声处理的时间为20min～40min。5.一种车前中药药材的指纹图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：取车前中药药材的全草或预设部位，粉碎后加提取溶剂进行提取处理，收集提取液，制备供试品溶液，所述预设部位为根茎、叶或穗；取所述供试品溶液进行超高效液相色谱测定；所述超高效液相色谱的色谱条件包括：流动相包括流动相A和流动相B，所述流动相A包括乙腈，所述流动相B包括磷酸水溶液，梯度洗脱；所述梯度洗脱包括以下程序：0～2min，所述流动相A的体积分数保持10％，所述流动相B的体积分数保持90％；2min～4min，所述流动相A的体积分数由10％升高至13％，所述流动相B的体积分数由90％降低至87％；4min～14min，所述流动相A的体积分数保持13％，所述流动相B的体积分数保持87％；14min～24min，所述流动相A的体积分数由13％升高至15％，所述流动相B的体积分数由87％降低至85％；24min～25min，所述流动相A的体积分数由15％升高至17％，所述流动相B的体积分数由85％降低至83％；25min～31min，所述流动相A的体积分数由17％升高至22％，所述流动相B的体积分数由83％降低至78％；31min～41min，所述流动相A的体积分数由22％升高至40％，所述流动相B的体积分数由78％降低至60％；41min～50min，所述流动相A的体积分数由40％升高至68％，所述流动相B的体积分数由60％降低至32％；50min～53min，所述流动相A的体积分数由68％升高至88％，所述流动相B的体积分数由32％降低至12％；53min～54min，所述流动相A的体积分数由88％降低至10％，所述流动相B的体积分数由12％升高至90％；54min～60min，所述流动相A的体积分数保持10％，所述流动相B的体积分数保持90％。6.根据权利要求5所述的车前中药药材的指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述超高效液相色谱的色谱条件还包括以下条件中的至少一个：0～3min，检测波长为240nm～250nm；3min～48min，检测波长为320nm～340nm，48min～60min，检测波长为240nm～250nm；柱温为28℃～32℃；流速为0.25mL/min～0.35mL/min；
进样量为1μL～2μL；以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；所述磷酸水溶液中磷酸的体积分数为0.05％～0.2％。7.根据权利要求5或6所述的车前中药药材的指纹图谱的构建方法，其特征在于，还包括以下特征中的至少一项：所述提取溶剂为甲醇水溶液；每1g所述车前中药药材的全草或预设部位对应加入40mL～60mL的所述提取溶剂；所述提取处理的方法为超声处理。8.根据权利要求7所述的车前中药药材的指纹图谱的构建方法，其特征在于，还包括以下特征中的至少一项：所述甲醇水溶液中甲醇的体积分数为40％～80％；所述超声处理的时间为20min～40min。9.一种混合基原车前草中药药材的指纹图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：取混合基原车前草中药药材，粉碎后加提取溶剂进行提取处理，收集提取液，制备供试品溶液；取所述供试品溶液进行超高效液相色谱测定；所述超高效液相色谱的色谱条件包括：流动相包括流动相A和流动相B，所述流动相A包括乙腈，所述流动相B包括磷酸水溶液，梯度洗脱；所述梯度洗脱包括以下程序：0～2min，所述流动相A的体积分数保持10％，所述流动相B的体积分数保持90％；2min～4min，所述流动相A的体积分数由10％升高至13％，所述流动相B的体积分数由90％降低至87％；4min～14min，所述流动相A的体积分数保持13％，所述流动相B的体积分数保持87％；14min～24min，所述流动相A的体积分数由13％升高至15％，所述流动相B的体积分数由87％降低至85％；24min～25min，所述流动相A的体积分数由15％升高至17％，所述流动相B的体积分数由85％降低至83％；25min～31min，所述流动相A的体积分数由17％升高至22％，所述流动相B的体积分数由83％降低至78％；31min～41min，所述流动相A的体积分数由22％升高至40％，所述流动相B的体积分数由78％降低至60％；41min～50min，所述流动相A的体积分数由40％升高至68％，所述流动相B的体积分数由60％降低至32％；50min～53min，所述流动相A的体积分数由68％升高至88％，所述流动相B的体积分数由32％降低至12％；53min～54min，所述流动相A的体积分数由88％降低至10％，所述流动相B的体积分数由12％升高至90％；54min～60min，所述流动相A的体积分数保持10％，所述流动相B的体积分数保持90％。
10.根据权利要求9所述的混合基原车前草中药药材的指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述超高效液相色谱的色谱条件还包括以下条件中的至少一个：0～3min，检测波长为240nm～250nm；3min～48min，检测波长为320nm～340nm，48min～60min，检测波长为240nm～250nm；柱温为28℃～32℃；流速为0.25mL/min～0.35mL/min；进样量为1μL～2μL；以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；所述磷酸水溶液中磷酸的体积分数为0.05％～0.2％。11.根据权利要求9或10所述的混合基原车前草中药药材的指纹图谱的构建方法，其特征在于，还包括以下特征中的至少一项：所述提取溶剂为甲醇水溶液；每1g所述混合基原车前草中药药材对应加入40mL～60mL的所述提取溶剂；所述提取处理的方法为超声处理。12.根据权利要求11所述的混合基原车前草中药药材的指纹图谱的构建方法，其特征在于，还包括以下特征中的至少一项：所述甲醇水溶液中甲醇的体积分数为40％～80％；所述超声处理的时间为20min～40min。13.一种平车前中药药材的不同部位的鉴别方法，其特征在于，包括以下步骤：取平车前中药药材的待测部位，粉碎后加提取溶剂进行提取处理，收集提取液，制备待测样品溶液；按照权利要求1～4任一项所述的色谱条件，对所述待测样品溶液进行超高效液相色谱测定，将所得色谱图与权利要求1～4任一项所述的预设部位的指纹图谱对应，记录相对应的特征峰以及所述特征峰的峰面...

【专利技术属性】
技术研发人员：洪婉敏，刘燎原，程钰洁，张志鹏，陈巧华，刘权震，邓韬，黄醒鹏，
申请(专利权)人：湖南一方天江药业有限公司，
类型：发明
国别省市：