经鼻给药脑靶向主动载药的布美他尼脂质体制造技术

本发明专利技术提供一种靶向特定组织，尤其是脑组织的布美他尼脂质体处方组成和制备方法。用该处方组成和制备方法获得的脂质体制剂，结合鼻腔给药途径，能够显著增加布美他尼在脑组织的分布。另外，本发明专利技术涉及的载体能通过主动包封技术实现布美他尼的高效装载，包封效率高，工艺操作方便、包封率高。包封率高。

【技术实现步骤摘要】
经鼻给药脑靶向主动载药的布美他尼脂质体


[0001]本专利技术涉及药物递送领域，具体涉及脂质体递送系统经鼻给药实现脑靶向，提高药物在脑组织的分布。本专利技术也涉及所述脂质体递送系统的制备方法和用途，特别是利用主动载药技术提高载药效率、改善难溶性药物溶解性的方法和用途。

技术介绍

[0002]靶向递药系统(targeting drug delivery system,TDDS)系指根据生物体的生理学和分子生物学特性，借助载体、配体或抗体的作用，通过血液循环或胃肠道等途径将药物选择性地浓集定位于靶组织、靶器官、靶细胞或细胞器的一种递药系统。由于靶向递药系统能够使药物浓集于病灶组织，相应降低非病灶组织的药物浓度，因此能够提高药物的治疗效果，降低全身性的毒副作用，是药剂学的热点研究领域。近年来，肿瘤靶向的研究日趋成熟，紫杉醇、阿霉素等多个微粒靶向制剂，抗体偶联药物如ADC、细胞疗法药物如CAR
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T均有上市产品，并且取得了良好的治疗效果。但是，脑靶向研究目前尚处于实验室研究阶段。
[0003]脑是人体的重要器官，很多疾病的发生都与脑组织的病变有关，例如中枢神经系统疾病(帕金森病、老年性痴呆、神经衰弱和癫痛)、脑血管病变、脑肿瘤、脑部细菌感染和病毒感染等。据美国1999年统计，脑部疾病的发生率已经相当于癌症和心血管疾病的总和。2007年，联合国的一份报告表明全世界患有不同程度神经系统疾病的人数几乎占全球总人数的1/6。脑瘤如神经胶质细胞瘤(neurogliocytoma)，神经性退行疾病如阿尔茨海默病(AD)和帕金森综合征(PD)仍缺乏有效的治疗药物和方法。
[0004]众所周知，血脑屏障(blood brain barrier,BBB)的存在大大阻碍了药物进入CNS病灶部位发挥治疗作用。具体地说，BBB主要由极化的脑毛细血管内皮细胞(braincapillary endothelial cells,BCEC)通过复杂的细胞间紧密连接而构成，它为脑组织营造了一个相对稳定的内环境，保障中枢神经系统(central nervous system,CNS)的正常生理功能，但同时也限制了绝大多数药物的脑内转运。据统计，目前临床使用的药物中，约有98％的小分子化学药物和几乎100％的大分子药物，包括蛋白多肽和基因药物都难以入脑，给脑部疾病的治疗造成很大困难。
[0005]为克服血脑屏障，使药物能够进入CNS内发挥药效作用。目前临床上应用较多的方法是通过可逆性开启血脑屏障，鞘内注射以及颈动脉注射给药，使药物透过并进入CNS。这些方法在操作技术上要求高、安全风险大：它们可能破坏BBB的完整性且在开放紧密连接的过程中，伴随药物分子的进入，血液中的其他分子及毒素有可能进入中枢神经系统。相比上述侵入式治疗手段，研究人员开发了一系列脑靶向递送系统。根据药物透过血脑屏障的机制不同，可分为两大类：1.以化学为基础的脑靶向递药系统(chemistry
‑
based brain delivery system),如制备脂溶性较高的前体药物和化学药物传递系统，药物主要以被动扩散的方式透过血脑屏障；2.以生物学为基础的脑靶向递药系统(biology
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based brain delivery system),药物主要以受体、吸附或转运体介导的方式实现跨血脑屏障转运；此外，经鼻给药也是一条有效的入脑途径。
[0006]药物经鼻黏膜吸收进入脑内主要有3条通路：嗅黏膜上皮通路、嗅神经通路和血液循环通路。前两条通路均与嗅黏膜吸收直接入脑有关。另外，近年来的研究发现，鼻腔给药后还有部分药物能够通过三叉神经途径人脑。与其他脑靶向策略相比，鼻腔给药为血管外给药，安全、便捷、无痛，是较理想的脑靶向给药途径。
[0007]目前，研究较多的鼻腔给药剂型主要有：滴鼻剂、气雾剂、喷雾剂、凝胶剂、微球、脂质体、固体脂质体纳米粒、乳剂等。其中，由于纳米载体递药系统具有增加难溶药物溶解度，保护药物避免被各种酶等化学因素破坏，有一定的促渗透作用，促进药物在鼻黏膜的释放，提高药物的安全性、有效性甚至靶向性等优点，已作为鼻腔给药新剂型被大量研究。
[0008]脂质体(liposome)是一种类似生物膜结构的脂质双分子层微小囊泡，1961英国血液学家Alec D Bangham首次发现，于1964年被正式报导。脂质体具有靶向性、缓释性、提高药物稳定性、增加难溶性药物溶解度、降低药物毒性等特点，是良好的药物载体。根据载药机理不同，脂质体载药技术可分为两大类：被动载药法(passive loading)和主动载药法(active/remote loading)。传统上，研究者采用较多的是被动载药法，该法主要适于脂溶性强或水溶性强的药物。对于两亲，如弱酸性或弱碱性药物，其油水分配系数受介质pH和离子强度的影响较大，用被动载药法制得的脂质体包封率低。而主动载药法通过内外水相的不同离子或化合物梯度进行载药，对两亲性药物脂质体的包封率高、渗漏少，克服了被包裹药物的早期突释和泄露现象，特别具有临床价值。
[0009]布美他尼是间氨基苯磺酰胺的衍生物，属强效利尿药，于1983年首次被FDA批准。利尿作用机制与抑制Na
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K
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ATP酶的活性有关。主要是通过抑制髓袢升支粗段对Cl
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的主动重吸收和Na
+
的被动重吸收而影响尿的浓缩和稀释过程起到利尿作用。近期研究表明：布美他尼治疗明显提高了阿尔茨海默模型小鼠在多种认知和空间记忆测试中的表现，并能够缩小β淀粉样蛋白斑块。还有研究认为：布美他尼通过阻断让盐分穿梭于细胞膜的蛋白来减少水滞留。这些蛋白也存在于神经元中，如果这些神经元过度兴奋(如发生在癫痫等情况下)，那么阻断它们就可以恢复平衡。但是，布美他尼的使用也很棘手，因为它可能会让患者脱水，并且电解质失调。而局部靶向给药能够很好的解决这一问题。

技术实现思路

[0010]本专利技术的目的是提供一种靶向脑部的布美他尼脂质体，该脂质体经鼻腔给药，可以提高布美他尼的中枢浓度，从而增强疗效，同时降低药物在外周器官的分布，减少其毒副作用。本专利技术的另一个目的是通过主动载药技术实现布美他尼脂质体的高效制备。本专利技术通过一下技术方案实现上述专利技术目的：
[0011]方面1.一种布美他尼脂质体，包括脂质膜和布美他尼。
[0012]方面2.方面1所述的布美他尼脂质体，特征在于以重量计算，药脂比≤1:1；优选药脂比≤1:5；优选药脂比≤1:7；更优选药脂比≤1:10；更优选药脂比≤1:12；更优选药脂比≤1:15；更优选药脂比≤1:20；更优选1:5≤药脂比≤1:1，1:7≤药脂比≤1:5，1:10≤药脂比≤1:7，1:12≤药脂比≤1:10，1:15≤药脂比≤1:7，1:20≤药脂比≤1:5，1：40≤药脂比≤1:5或1:100≤药脂比≤1:5。
[0013]方面3.前述任一方面所述的布美他尼脂质体，其特征在于脂质体中任选地还包括pH依赖的可离子化的阴离子。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种布美他尼脂质体，包括脂质膜和布美他尼。2.权利要求1所述的布美他尼脂质体，特征在于以重量计算，药脂比≤1:1；优选药脂比≤1:5；优选药脂比≤1:7；更优选药脂比≤1:10；更优选药脂比≤1:12；更优选药脂比≤1:15；更优选药脂比≤1:20；更优选1:5≤药脂比≤1:1，1:7≤药脂比≤1:5，1:10≤药脂比≤1:7，1:12≤药脂比≤1:10，1:15≤药脂比≤1:7，1:20≤药脂比≤1:5，1：40≤药脂比≤1:5或1:100≤药脂比≤1:5。3.前述任一权利要求所述的布美他尼脂质体，其特征在于脂质体中任选地还包括pH依赖的可离子化的阴离子。4.前述任一权利要求所述的布美他尼脂质体，其特征在于脂质体的布美他尼以纳米固体颗粒或溶液形式存在。5.前述任一权利要求所述的布美他尼脂质体，其特征在于构成脂质体脂质膜的脂质包括磷脂、胆固醇和阳离子脂质中的一种或多种。6.前述任一权利要求所述的布美他尼脂质体，其特征在于构成脂质体脂质膜的磷脂包括蛋黄卵磷脂、大豆卵磷脂、氢化大豆卵磷脂、磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰肌醇、二硬脂酰磷脂酰胆碱、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二油酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、二肉豆蔻酰磷脂酰乙醇胺、二棕榈酰磷脂酰乙醇胺、二油酰磷脂酰乙醇胺、二硬脂酰磷脂酰甘油、二肉豆蔻酰磷脂酰甘油、二棕榈酰磷脂酰甘油、二油酰磷脂酰甘油、二硬脂酰磷脂酰丝氨酸、二肉豆蔻酰磷脂酰丝氨酸、二棕榈酰磷脂酰丝氨酸、二油酰磷脂酰丝氨酸、二硬脂酰磷脂酰肌醇、二肉豆蔻酰磷脂酰肌醇、二棕榈酰磷脂酰肌醇、二油酰磷脂酰肌醇；优选蛋黄卵磷脂、大豆卵磷脂、氢化大豆卵磷脂和磷脂酰甘油中的一种或多种。7.前述任一权利要求所述的布美他尼脂质体，其特征在于胆固醇和磷脂的质量比为1:0.5～1:10；优选1：1～1：8；更优选1：2～1：6；更优选1：3～1：5；更优选约为1：4。8.前述任一权利要求所述的布美他尼脂质体，其特征在于阳离子脂质包括2,3
‑
二油酰基
‑
丙基)
‑
三甲胺(DOTAP)、1,2
‑
双十八烯氧基
‑3‑
甲基铵丙烷(DOTMA)中的一种或多种。9.前述任一权利要求所述的布美他尼脂质体，其特征在于pH依赖的可离子化的阴离子为醋酸根或柠檬酸根。10.前述任一权利要求所述的布美他尼脂质体，其特征在于pH依赖的可离子化的阴离子由醋酸、柠檬酸、醋酸钙、醋酸铜、醋酸锌、醋酸镁、柠檬酸钙、柠檬酸铜中的一种或多种提供；优选醋酸钙、醋酸铜、醋酸锌、醋酸镁中的一种或多种提供；优选醋酸钙。11.前述任一权利要求所述的布美他尼脂质体，其特征在于所述pH依赖的可离子化的阴离子的投料浓度为0.1
‑
0.5mol/L；优选0.15
‑
0.45mol/L；更优选0.2
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0.4mol/L；更优选0.2
‑
0.3mol/L。12.前述任一权利要求所述的布美他尼脂质体，其特征在于所述脂质体还任选地包括表面修饰材料，所述表面修饰材料包括PEG化脂质、壳聚糖及其衍生物、海藻酸盐、细胞穿透肽中的一种或多种；优选地，PEG化脂质选自甲氧基聚乙二醇
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二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(mPEG
‑
DSPE)、甲氧基聚乙二醇
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二油酰磷脂酰乙醇胺(mPEG
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DOPE)、甲氧基聚乙二醇
‑
二棕榈酰磷脂酰乙醇胺(mPEG
‑
DPPE)、聚乙二醇
‑
二肉豆蔻酰甘油(PEG
‑
DMG)、硬脂酰聚乙二醇酯、维生素E聚乙二醇琥珀酸酯(TPGS)中的一种或多种；优选地，细胞穿透肽选自多聚精氨
酸或多聚赖氨酸的一种或两种。13.前述任一权利要求所述的布美他尼脂质体，其特征在于所述脂质体还任选地包括等渗调节剂、pH调节剂、缓冲剂、增稠剂、防腐剂、矫味剂、吸收促进剂、表面活性剂中的一种或多种；优选地，所述等渗调节剂选自蔗糖、葡萄糖、甘露糖、半乳糖、乳糖、NaCl中的一种或多种，等渗调节剂优选蔗糖、NaCl中的一种或两种；优选地，pH调节剂选自盐酸、硫酸、磷酸、NaOH、KOH、磷酸钠、磷酸钾中的一种或多种，pH调节剂优选盐酸、NaOH；优选地，所述缓冲剂选自磷酸盐缓冲剂、组氨酸缓冲剂、Hepes缓冲剂、Tris缓冲剂、硼酸盐缓冲剂、柠檬酸盐缓冲剂、醋酸盐缓冲剂中的一种或几种，所述缓冲剂优选为磷酸盐缓冲剂；优选地，所述增稠剂选自透明质酸钠、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、PVP、PVPP、PLGA、海藻酸钠中的一种或多种；优选地，所述防腐剂选自山梨酸、山梨酯、尼泊金酯、苯扎氯铵、苯扎溴铵中的一种或多种。14.前述任一权利要求所述的布美他尼脂质体，其特征在于所述脂质体药物包封率为＞50％；优选＞60％；优选＞70％；优选大于＞80％；优选＞90％；更优选＞95％；更优选＞97％；更优选＞98％。15.前述任一权利要求所述的布美他尼脂质体，其特征在于所述脂质体的布美他尼药物含量为>0.5mg/mL；优选>1.0mg/mL；优选>1.5mg/mL；优选>1.9mg/mL；优选>2.2mg/mL；优选>2.5mg/mL。16.前述任一权利要求所述的布美他尼脂质体，其特征在于所述脂质体粒径为25～1000nm；优选地，脂质体的粒径是25～500nm或500～1000nm；更优选地，脂质体的粒径是25～75nm、75～125nm、125～175nm、175～225nm、225～275nm、275～350nm、350nm～500nm、500～800nm或800～1000nm；更优选地，脂质体的粒径是100
±
10nm，110
±
10nm，120
±
10nm，125
±
10nm，130
±
10nm，140
±
10nm，150
±
10nm，160
±
10nm，170
±
10nm，180
±
10nm，190
±
10nm，200
±
10nm，210
±
10nm，220
±
10nm或250
±
10nm。17.前述任一权利要求所述的布美他尼脂质体，其特征在于所述脂质体相对于口服制剂能够提高布美他尼在脑部药物浓度。18.前述任一权利要求所述的布美他尼脂质体，其特征在于所述布美他尼脂质体以液体药物组合物形式存在，优选为注射剂、鼻喷雾剂、滴鼻剂、口服液、滴眼液、气雾剂、洗鼻剂、洗耳剂、喷雾剂、凝胶剂、微球、固体脂质体纳米粒、乳剂中的一种。19.前述任一权利要求所述的布美他尼脂质体，其特征在于所述布美他尼脂质体为阳离子脂质体、中性脂质体或负电性脂质体。20.前述任一权利要求所述的布美他尼脂质体，其特征在于所述布美他尼脂质体选自：脂质体1：布美他尼含量约2.9mg/mL、包封率约99.4％、投料药脂比约1:3、脂质为卵磷脂和胆固醇、磷脂胆固醇投料质量比为磷脂：胆固醇＝约4：1、pH依赖的可离子化的阴离子由醋酸钙提供、醋酸钙投料浓度为约0.2mol/L、等渗剂为蔗糖的脂质体(实施例1
‑1‑
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【专利技术属性】
技术研发人员：佟淑文，
申请(专利权)人：北京多纳医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：