一种拮抗皂荚枯萎病的贝莱斯芽孢杆菌及生防菌剂和应用制造技术

本发明专利技术提供了一种拮抗皂荚枯萎病的贝莱斯芽孢杆菌及生防菌剂和应用，涉及功能微生物技术领域。本发明专利技术提供了所述贝莱斯芽孢杆菌JKZ

【技术实现步骤摘要】
一种拮抗皂荚枯萎病的贝莱斯芽孢杆菌及生防菌剂和应用


[0001]本专利技术属于功能微生物
，具体涉及一种拮抗皂荚枯萎病的贝莱斯芽孢杆菌及生防菌剂和应用。

技术介绍

[0002]皂荚又叫皂角，是豆科皂荚属落叶乔木。皂荚在我国很多省份均有栽植，多在平原、山谷及水沟地带生长，喜光、耐旱，喜湿润的气候，在肥沃的土壤上生长较好。皂荚具有观赏、经济、药用和生态价值。皂荚树势优美，叶、花、果、枝、刺均有一定的观赏价值。皂荚木材坚硬耐腐，可作车辆、家具和工艺品。皂荚种子含有大量半乳甘露聚糖胶，可以用于稳定剂和分散剂的制作，经济价值较高。皂荚树的荚果、种子、刺、枝均可入药，有较高的药用价值。皂荚为生态经济型树种，固氮性好、抗逆性强可作为防护林、退耕林和水土保持林。
[0003]皂荚枯萎病是影响皂荚生长并严重影响生态环境的常见病害，由病原真菌(Thyronectria austroamericana)引起，引起主干及侧枝的枯萎、溃疡、腐烂等多种症状，造成木质部变色、萎蔫、落叶等，发病严重时导致植株死亡。皂荚枯萎病自上世纪40年代在美国被发现，该病害最初报道只有3棵树发病，发生率较低，最后该病原菌在美国很多州被发现引起了人们高度重视。课题组于2019年在雄安新区首次发现该病害，并出现逐年严重的趋势。皂荚枯萎病菌严重影响皂荚的健康生长，预防和控制皂荚枯萎病的发生已经成为维护生态环境的重要任务。国内没有对皂荚枯萎病进行研究，更没有皂荚枯萎病的防治措施相关报道。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种拮抗皂荚枯萎病的贝莱斯芽孢杆菌及生防菌剂和应用，所述贝莱斯芽孢杆菌为从健康皂荚组织中分离筛选得到的对皂荚枯萎病具有高效拮抗作用的生防细菌菌株，能够防治皂荚枯萎病，又能促进皂荚生长。
[0005]本专利技术提供了一种拮抗皂荚枯萎病的贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)JKZ
‑
01，所述贝莱斯芽孢杆菌JKZ
‑
01的保藏编号为CGMCC No.25290。
[0006]优选的，所述皂荚枯萎病由皂荚枯萎病菌(Thyronectria austroamericana)引起。
[0007]本专利技术还提供了上述贝莱斯芽孢杆菌JKZ
‑
01在制备拮抗皂荚枯萎病的生防菌剂中的应用。
[0008]本专利技术还提供了一种拮抗皂荚枯萎病的生防菌剂，所述生防菌剂的有效成分包括上述贝莱斯芽孢杆菌JKZ
‑
01的菌体、菌液和菌株培养物中的一种或多种。
[0009]优选的，所述菌液的制备方法，包括将所述贝莱斯芽孢杆菌JKZ
‑
01接种于LB液体培养基上，振荡培养至有效活菌数不低于1
×
108CFU/mL，得所述菌液。
[0010]优选的，所述振荡培养的温度为28℃，摇床转速为200r
·
min
‑1。
[0011]本专利技术还提供了上述贝莱斯芽孢杆菌JKZ
‑
01或上述生防菌剂在促进皂荚生长中
的应用。
[0012]本专利技术还提供了一种促进皂荚生长并拮抗皂荚枯萎病的方法，包括以下步骤：在皂荚的根部接种上述贝莱斯芽孢杆菌JKZ
‑
01或上述生防菌剂。
[0013]优选的，所述促进皂荚生长的指标包括株高、根长、根重、鲜重和地径。
[0014]优选的，包括在每株皂荚的根部接种贝莱斯芽孢杆菌JKZ
‑
01的有效活菌数不低于70
×
108CFU。
[0015]有益效果：本专利技术提供了一种从健康皂荚组织中分离筛选得到的对皂荚枯萎病具有高效拮抗作用的生防细菌菌株，专利技术人根据形态特征鉴定和16 SrDNA序列分析，将菌株JKZ
‑
01鉴定为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)，并在实施例中证实了贝莱斯芽孢杆菌JKZ
‑
01处理植株能显著提高皂荚的长势，处理后株高增加21.85％，根长增加17.88％，鲜重提高42.43％，根重提高52.10％，且具有较好的枯萎病防治效果，防效可达59.81％。因此所述菌株JKZ
‑
01具有拮抗皂荚枯萎病的作用，能够防治皂荚枯萎病，又能促进皂荚生长。
[0016]生物保藏信息
[0017]贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)，菌株编号为JKZ
‑
01，于2022年7月13日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC)，具体地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏编号为CGMCC No.25290。
附图说明
[0018]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0019]图1为贝莱斯芽孢杆菌JKZ
‑
01在LB平板培养基上的菌落形态图；
[0020]图2为本专利技术贝莱斯芽孢杆菌JKZ
‑
01基于16SrDNA序列的系统发育树，其中图中拉丁名后为相应菌株在Genbank的编号；
[0021]图3为本专利技术贝莱斯芽孢杆菌JKZ
‑
01菌液对皂荚枯萎病菌的平板抑制效果图，A为JKZ
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01菌液对皂荚枯萎病菌的平板抑制效果图；B为皂荚枯萎病菌无菌的空白对照组平板培养图；
[0022]图4为为本专利技术贝莱斯芽孢杆菌JKZ
‑
01菌液对皂荚枯萎病菌的含发酵滤液平板抑制效果图，A为JKZ
‑
01菌液对皂荚枯萎病菌的平板抑制效果图；B为皂荚枯萎病菌无菌的空白对照组平板培养图；
[0023]图5为为贝莱斯芽孢杆菌JKZ
‑
01对皂荚枯萎病的室内防治效果图。
具体实施方式
[0024]本专利技术提供了一种拮抗皂荚枯萎病的贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)JKZ
‑
01，所述贝莱斯芽孢杆菌JKZ
‑
01的保藏编号为CGMCC No.25290。
[0025]本专利技术所述贝莱斯芽孢杆菌JKZ
‑
01由健康皂荚组织中分离筛选得到，在LB培养基上，28℃培养24h，菌落圆形凸起呈微黄色，边缘薄且光滑，培养48h，菌落逐渐变干，表面粘稠；其16SrDNA序列如SEQ ID NO.1所示：TGGCGGGGTGCTATAATGCAGTCGAGCGGACAGATGGGAGCT
TGCTCCCTGATGTTAGCGGCGGACGGGTGAGTAACACGTGGGTAACCTGCCTGTAAGACTGGGATAACTCCGGGAAACCGGGGCT本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种拮抗皂荚枯萎病的贝莱斯芽孢杆菌(Bacillusvelezensis)JKZ
‑
01，其特征在于，所述贝莱斯芽孢杆菌JKZ
‑
01的保藏编号为CGMCCNo.25290。2.根据权利要求1所述贝莱斯芽孢杆菌JKZ
‑
01，其特征在于，所述皂荚枯萎病由皂荚枯萎病菌(Thyronectriaaustroamericana)引起。3.权利要求1或2所述贝莱斯芽孢杆菌JKZ
‑
01在制备拮抗皂荚枯萎病的生防菌剂中的应用。4.一种拮抗皂荚枯萎病的生防菌剂，其特征在于，所述生防菌剂的有效成分包括权利要求1或2所述贝莱斯芽孢杆菌JKZ
‑
01的菌体、菌液和菌株培养物中的一种或多种。5.根据权利要求4所述生防菌剂，其特征在于，所述菌液的制备方法，包括将所述贝莱斯芽孢杆菌JKZ
‑
01接种于LB液体培养基上...

【专利技术属性】
技术研发人员：李会平，魏步飞，朱会营，苏筱雨，曾健勇，王华玲，孙彤蕾，张凤娟，
申请(专利权)人：河北农业大学，
类型：发明
国别省市：