一种小麦抗逆性基因TaBSL3与应用制造技术

技术编号:38218470 阅读:10 留言:0更新日期:2023-07-25 11:29
本发明专利技术提供了一种小麦抗逆性基因TaBSL3与应用,属于基因工程技术领域,所述TaBSL3的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,本发明专利技术将基因TaBSL3过表达转化到拟南芥中进行功能验证,结果表明,过表达TaBSL3基因的拟南芥相比于野生型拟南芥的抗旱性显著提高,对于植物激素脱落酸(ABA)的敏感性显著增强,因此TaBSL3基因在植物生长发育和抗旱过程中扮演着正向调控作用,为小麦分子育种提供理论基础和基因资源,为今后获得抗旱高产的株系,提高小麦抗旱性具有十分重要的意义。有十分重要的意义。有十分重要的意义。

【技术实现步骤摘要】
一种小麦抗逆性基因TaBSL3与应用


[0001]本专利技术属于基因工程
,尤其涉及一种小麦抗逆性基因TaBSL3与应用。

技术介绍

[0002]植物作为一种不可自主移动的生物,在生长过程中会面临复杂的环境,包括各种逆境胁迫,比如高温、冷害、干旱等。干旱条件会降低植物光合作用,气孔不能正常开张,抑制叶绿素形成,对于作物的产量和品质都造成了巨大的影响。小麦是我国三大粮食作物之一,对小麦进行抗旱基因挖掘对培育抗旱小麦品种并提高小麦产量具有重要意义。
[0003]拟南芥BSL家族作为一种蛋白磷酸酶,包括四个成员:BSU1、BSL1、BSL2、BSL3。BSL家族成员响应激素油菜素类固醇(BR),同时还参与植物应对生物胁迫的免疫反应。在植物应答激素油菜素类固醇(BR)的研究中,认为以BSU1为代表的BSL家族在响应过程中表现为功能冗余,其作用于胞质激酶BSK1的下游,能去磷酸化并促进胞质激酶BIN2的降解,从而促进BR应答转录因子的表达,启动植物对BR的响应。然而,小麦中BSL家族成员在植物抗逆包括抗旱在内的逆境胁迫中的功能仍未报道。

技术实现思路

[0004]有鉴于此,本专利技术的目的在于提供一种小麦抗逆性基因TaBSL3与应用,该抗逆性基因TaBSL3能够显著提高植物抗旱性,促进植物的生长发育。
[0005]为了实现上述专利技术目的,本专利技术提供了以下技术方案:
[0006]本专利技术提供了一种小麦抗逆性基因TaBSL3,所述TaBSL3的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。
[0007]本专利技术还提供了一种上述抗逆性基因TaBSL3编码的蛋白质。
[0008]本专利技术还提供了一种含有上述抗逆性基因TaBSL3的生物材料,为以下任意一种:
[0009]A1)包含上述抗逆性基因TaBSL3的重组表达载体;
[0010]A2)包含上述抗逆性基因TaBSL3的重组菌;
[0011]A3)包含A1)所述的重组表达载体的重组菌。
[0012]优选的,所述重组表达载体的空载体包括pENTR、pCAMBIA1300

EGFP、pCAMBIA1307

FLAG或pC336。
[0013]本专利技术还提供了一种上述抗逆性基因TaBSL3、蛋白质或生物材料在抗逆性转基因植物育种中的应用。
[0014]本专利技术还提供了一种上述抗逆性基因TaBSL3、蛋白质或生物材料在提高转基因植物抗逆性中的应用。
[0015]优选的,所述抗逆性包括耐旱性。
[0016]优选的,所述植物包括单子叶植物或双子叶植物。
[0017]本专利技术还提供了一种培育抗逆性提高的转基因植物的方法,包括提高受体植物中如上述的抗逆基因TaBSL3的表达量和/或活性,得到转基因植物的步骤。
[0018]优选的,所述抗逆性包括耐旱性;所述植物包括单子叶植物或双子叶植物。
[0019]相对于现有技术,本专利技术具有如下有益效果:
[0020]本专利技术提供了一种小麦抗逆性基因TaBSL3与应用,本专利技术将基因TaBSL3过表达转化到拟南芥中进行功能验证,结果表明,过表达TaBSL3基因的拟南芥相比于野生型拟南芥的抗旱性显著提高,对植物激素脱落酸(ABA)的敏感性显著增强,因此TaBSL3基因在植物生长发育和抗旱过程中扮演着正向调控作用,为小麦分子育种提供理论基础和基因资源,为今后获得抗旱高产的株系,提高小麦抗旱性具有十分重要的意义。
附图说明
[0021]图1为DH5α大肠杆菌菌落PCR鉴定小麦TaBSL3基因表达的电泳图结果,其中泳道:1~9为鉴定的编号为1~9的大肠杆菌单克隆,10为plus DNA marker(TRANS),其中泳道1,4,8的结果表明编号为1,4,8的单克隆为阳性克隆;
[0022]图2为TaBSL3

FLAG序列扩增产物的琼脂糖凝胶电泳图,其中泳道:1~4为编号为1~4的TaBSL3

FLAG基因扩增产物,5为plus DNA marker(TRANS);
[0023]图3为pCAMBIA

1307

TaBSL3

FLAG重组表达载体中小麦TaBSL3基因表达的电泳图结果,其中泳道:1~4为编号为1~4的转化重组表达载体的大肠杆菌单克隆,5为plusⅡDNAmarker(TRANS),其中编号3的单克隆为阳性克隆;
[0024]图4为pCAMBIA

1307

TaBSL3

FLAG重组表达载体转化至GV3101农杆菌后的小麦TaBSL3基因表达的电泳图结果,其中泳道:1~13为编号为1~13的转化pCAMBIA

1307

TaBSL3

FLAG的GV3101农杆菌单克隆,14为DNA marker(TRANS),其中1~13均为阳性克隆,后续挑选阳性克隆4进行农杆菌侵染试验;
[0025]图5为转化成功的农杆菌侵染拟南芥得到TaBSL3转基因过表达株系中的小麦TaBSL3基因表达的电泳图结果,其中泳道从左至右依次为1~3为TaBSL30E 4

1转基因株系,4~6为株系TaBSL30E 4

2转基因株系,7~9为TaBSL30E 15

37转基因株系,10~12为TaBSL30E 15

35转基因株系,13

15为TaBSL30E 15

39转基因株系,16~18为TaBSL30E 10

19转基因株系,19~21为TaBSL30E 10

18转基因株系,22~24为TaBSL30E 10

14转基因株系,25为DNAmarker(TRANS);
[0026]图6为野生型拟南芥Col

0和TaBSL3转基因过表达株系分别在干旱前、干旱后和复水后的植株的存活情况;
[0027]图7为不同浓度的ABA分别对野生型拟南芥Col

0和TaBSL3转基因过表达株系的影响。
具体实施方式
[0028]本专利技术提供了一种小麦抗逆性基因TaBSL3,所述TaBSL3的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。
[0029]本专利技术通过质谱分析鉴定到小麦磷酸酶基因,该基因通过序列比对发现其与拟南芥中AtBSL3同源,因此将其命名为TaBSL3,并克隆得到小麦TaBSL3基因,所述TaBSL3基因全长编码框核苷酸序列长度为2964bp,所述TaBSL3的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本专利技术
所述TaBSL3基因的获得方法包括:通过提取小麦花穗部位的RNA并反转录扩增得到TaBSL3基因。
[0030]本专利技术还提供本文档来自技高网
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种小麦抗逆性基因TaBSL3,其特征在于,所述TaBSL3的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。2.权利要求1所述抗逆性基因TaBSL3编码的蛋白质。3.一种含有权利要求1所述抗逆性基因TaBSL3的生物材料,其特征在于,为以下任意一种:A1)包含权利要求1所述抗逆性基因TaBSL3的重组表达载体;A2)包含权利要求1所述抗逆性基因TaBSL3的重组菌;A3)包含A1)所述的重组表达载体的重组菌。4.根据权利要求3所述的生物材料,其特征在于,所述重组表达载体的空载体包括pENTR、pCAMBIA1300

EGFP、pCAMBIA1307

FLAG或pC336。5.根据权利要求1所...

【专利技术属性】
技术研发人员:王存王恬
申请(专利权)人:西北农林科技大学
类型:发明
国别省市:

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