一种活性肽、活性肽组合物及其在制备具有抗衰老作用的产品中的应用制造技术

本发明专利技术涉及医学技术领域，具体公开了一种活性肽、活性肽组合物及其在制备具有抗衰老作用的产品中的应用。所述的活性肽，其具有SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列；其中，SEQ ID NO:1的氨基酸序列为：Gly

【技术实现步骤摘要】
一种活性肽、活性肽组合物及其在制备具有抗衰老作用的产品中的应用


[0001]本专利技术涉及生物医学
，具体涉及一种活性肽、活性肽组合物及其在制备具有抗衰老作用的产品中的应用。

技术介绍

[0002]机体衰老的诱发因素复杂多样，其中氧化应激、氧化损伤是机体衰老的重要诱发因素。因此，缓解、减轻氧化应激、氧化损伤是应对机体衰老的重要措施。而大量研究发现，定植于体内的益生菌及其代谢产物等具有优秀的抗氧化活性，更深入的研究发现，益生菌及其代谢产物对肠道微生物群的调节可以很好的提高肠道的抗氧化能力，进而延缓机体衰老。
[0003]γ
‑
氨基丁酸(γ
‑
aminobutyric acid)作为一种益生菌分泌的短链脂肪酸，具有降压助眠、增强肝功等活性；γ
‑
氨基丁酸在护肤品中具有抗皱、抗衰老活性。大量研究表明活性肽，尤其是活性寡肽也具有抗氧化、抗衰老等生理活性，加之其具有易溶于水、易吸收等优点，被广泛应用于食品、医药和护肤品等领域。
[0004]罗伊氏乳杆菌对肠黏膜具有很强的黏附能力，可改善肠道菌群分布，拮抗有害菌定植，是常见的益生菌之一。然而，现有已知的罗伊氏乳杆菌其分泌γ
‑
氨基丁酸的量较小，抗衰老作用有待进一步提高；现有技术更鲜有对从罗伊氏乳杆菌中制备具有抗衰老活性肽的报道。

技术实现思路

[0005]为了克服现有技术中存在的至少之一的技术问题，本专利技术首先提供了一种活性肽。该活性肽首次从罗伊氏乳杆菌(Limosilactobacillus reuteri)HCLR01细胞裂解产物中制备得到；具有抗衰老活性。
[0006]本专利技术的技术方案如下：
[0007]本专利技术首先提供了了一种活性肽，其具有SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列；
[0008]其中，SEQ ID NO:1的氨基酸序列为：Gly
‑
Phe
‑
Glu
‑
Tyr；
[0009]SEQ ID NO:2的氨基酸序列为：Ala
‑
Glu
‑
Phe
‑
Gly；
[0010]SEQ ID NO:3的氨基酸序列为：Val
‑
Glu
‑
Phe
‑
Ala
‑
His。
[0011]本专利技术提供了一种全新的活性肽；研究表明，SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2以及SEQ ID NO:3所示氨基酸序列的活性肽均具有抗衰老活性；尤其是SEQ ID NO:2所示氨基酸序列的活性肽其抗衰老活性最显著，其抗衰老活性显著优于SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示氨基酸序列的活性肽。
[0012]本专利技术还提供了一种上述活性肽的制备方法，所述的活性肽从罗伊氏乳杆菌(Limosilactobacillus reuteri)HCLR01细胞裂解产物中分离得到。
[0013]所述的罗伊氏乳杆菌(Limosilactobacillus reuteri)HCLR01，其保藏编号为GDMCC No：63144。
[0014]该菌株已于2023年1月13日保藏于广东省微生物菌种保藏中心(地址是广州市先烈中路100号大院59号楼5楼广东省科学院微生物研究所)。
[0015]所述的罗伊氏乳杆菌(Limosilactobacillus reuteri)HCLR01的形态呈棒状，末端呈圆形；经分析其16s rDNA序列(如SEQ ID NO:1所示)，利用测序结果在NCBI数据库中进行比对；因此，最终鉴定为罗伊氏乳杆菌(Limosilactobacillus reuteri)。
[0016]优选地，所述的活性肽为具有抗衰老作用的活性肽。
[0017]本专利技术提供了一种全新的具有抗衰老作用的活性肽的制备方法；该方法首次从罗伊氏乳杆菌(Limosilactobacillus reuteri)HCLR01细胞裂解产物中制备得到具有抗衰老作用的活性肽。
[0018]优选地，所述罗伊氏乳杆菌(Limosilactobacillus reuteri)HCLR01细胞裂解产物通过如下方法制备得到：
[0019](1)取罗伊氏乳杆菌(Limosilactobacillus reuteri)HCLR01与水混合，然后进行超声破碎，得破碎液；将破碎液冻干后再经脱脂得冻干产物A；
[0020](2)将冻干产物A与水混合，接着用孔径为0.8～1.2kD的透析膜进行透析，取透析液冻干后的冻干产物B，即得所述的罗伊氏乳杆菌(Limosilactobacillus reuteri)HCLR01细胞裂解产物。
[0021]优选地，所述超声破碎的时间为10～30min。
[0022]优选地，所述超声破碎的超声功率为500～1000W，超声破碎的超声频率为20～40KHz。
[0023]优选地，步骤(1)中所述的罗伊氏乳杆菌(Limosilactobacillus reuteri)HCLR01为罗伊氏乳杆菌(Limosilactobacillus reuteri)HCLR01冻干粉。
[0024]优选地，步骤(1)中罗伊氏乳杆菌(Limosilactobacillus reuteri)HCLR01冻干粉与水的重量比为1：8～15。
[0025]最优选地，步骤(1)中罗伊氏乳杆菌(Limosilactobacillus reuteri)HCLR01冻干粉与水的重量比为1：10。
[0026]优选地，步骤(2)中用孔径为1kD的透析膜进行透析。
[0027]优选地，步骤(2)中冻干产物A与水的重量比为1：8～15。
[0028]最优选地，步骤(2)中冻干产物A与水的重量比为1：10。
[0029]优选地，所述的活性肽的制备方法，具体包含如下步骤：
[0030]将罗伊氏乳杆菌(Limosilactobacillus reuteri)HCLR01细胞裂解产物上葡聚糖凝胶柱；然后进行洗脱，收集洗脱液浓缩干燥后得葡聚糖凝胶柱洗脱物；
[0031]将葡聚糖凝胶柱洗脱物用制备型HPLC进行分离，即得所述的活性肽。
[0032]优选地，葡聚糖凝胶柱中采用浓度为1.0～1.5mM的(NH4)2SO4缓冲液进行洗脱。
[0033]最优选地，葡聚糖凝胶柱中采用浓度为1.2mM的(NH4)2SO4缓冲液进行洗脱。
[0034]优选地，葡聚糖凝胶柱中的具体洗脱条件为：
[0035]将罗伊氏乳杆菌(Limosilactobacillus reuteri)HCLR01细胞裂解产物上葡聚糖凝胶柱；然后用浓度为1.20mM的(NH4)2SO4缓冲液进行洗脱，每洗脱1/20柱体积的洗脱液作
为1个流份，并进行编号；将流份20～30合并后浓本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种活性肽，其特征在于，具有SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列；其中，SEQ ID NO:1的氨基酸序列为：Gly
‑
Phe
‑
Glu
‑
Tyr；SEQ ID NO:2的氨基酸序列为：Ala
‑
Glu
‑
Phe
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Gly；SEQ ID NO:3的氨基酸序列为：Val
‑
Glu
‑
Phe
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Ala
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His。2.权利要求1所述活性肽的制备方法，其特征在于，所述的活性肽从罗伊氏乳杆菌(Limosilactobacillus reuteri)HCLR01细胞裂解产物中分离得到。3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，具体包含如下步骤：将罗伊氏乳杆菌(Limosilactobacillus reuteri)HCLR01细胞裂解产物上葡聚糖凝胶柱；然后进行洗脱，收集洗脱液浓缩干燥后得葡聚糖凝胶柱洗脱物；将葡聚糖凝胶柱洗脱物用制备型HPLC进行分离，即得所述的活性肽。4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，葡聚糖凝胶柱中采用浓度为1.0～1.5mM的(NH4)2SO4缓冲液进行洗脱；最优选地，葡聚糖凝胶柱中采用浓度为1.2mM的(NH4)2SO4缓冲液进行洗脱。5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘晓宇，刘杰，牛文芳，林燕玲，张渐麒，郭奕彤，单紫庆，
申请(专利权)人：深圳海创生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：