合成猫CD19多肽氨基酸序列、结合猫CD19的单克隆抗体及应用制造技术

本发明专利技术合成猫CD19多肽氨基酸序列、结合猫CD19的单克隆抗体及应用，合成猫CD19多肽氨基酸序列偶联KLH蛋白，经DMSO溶解和PBS稀释，加入等体积的弗氏佐剂(200μl)混合乳化后作为小鼠免疫抗原，通过背部左腹皮下多点注射免疫Balb/c小鼠；其中只有首次小鼠免疫用弗氏完全佐剂，二次、三次、四次加强免疫都用弗氏不完全佐剂，最后一次用少量CD19多肽抗原冲击免疫。将ELISA检测中效价高的小鼠脾细胞，通过PEG方法与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合，筛选出细胞融合后的杂交瘤细胞；再通过间接竞争酶联免疫法筛选细胞并进行四次亚克隆，得到猫CD19单克隆抗体细胞株，及其分泌的单克隆抗体。得到的猫CD19单克隆抗体亲和力高，能有效识别细胞表面的CD19蛋白，可用于WesternBlot和流式检测应用。用。用。

【技术实现步骤摘要】
合成猫CD19多肽氨基酸序列、结合猫CD19的单克隆抗体及应用


[0001]本专利技术属于生物技术中的抗体制备领域，特别是涉及合成猫CD19多肽氨基酸序列、结合猫CD19的单克隆抗体及应用。所述单克隆抗体能靶向于猫CD19，并能用于Western Blot和流式应用验证。

技术介绍

[0002]CD19是B细胞表面表达的一种CD分子(即白细胞分化抗原)，属于Ig超家族。除浆细胞外的所有B细胞系，恶性B细胞与FDC都会表达该分子。CD19的作用是参与B细胞的增殖、分化、活化及抗体产生，促进BCR的信号转导，可视为B细胞的标志，帮助鉴定B细胞，在诊断B细胞系肿瘤(白血病、淋巴瘤)上也有重要意义。
[0003]CD19与CD21、CD81及CD225共同形成BCR复合体，能减少BCR介导的B细胞激活阈值，更容易激活B细胞也包括恶性的B细胞，其中，CD21提供与表面免疫球蛋白间的桥梁，CD81调节CD19的表达，CD19则发挥主要的信号传导作用。目前人类临床上以CD19为靶点治疗恶性淋巴肿瘤的手段主要是嵌合抗原受体T细胞(CAR
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.合成猫CD19多肽氨基酸序列，其特征在于，抗原多肽序列为SEQ ID NO.1。2.一种结合猫CD19的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体在制备过程中，免疫小鼠所用的抗原多肽序列为SEQ ID NO.1，所述单克隆抗体的重链和轻链可变区的氨基酸序列分别是SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列。3.根据权利要求2所述的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体的重链和轻链可变区的核苷酸序列分别是SEQ ID NO.4和SEQ ID N...

【专利技术属性】
技术研发人员：沈丽雅，彭玥晗，姜雪，
申请(专利权)人：卫仕宠物营养研究院芜湖有限公司，
类型：发明
国别省市：