一种烟酰胺核糖磷酸转移酶的封装工艺制造技术

一种烟酰胺核糖磷酸转移酶的封装工艺，包括步骤：(1)将单链DNA(ssDNA)与三(2

【技术实现步骤摘要】
一种烟酰胺核糖磷酸转移酶的封装工艺


[0001]本专利技术涉及酶修饰领域，具体涉及一种烟酰胺核糖磷酸转移酶的封装工艺。

技术介绍

[0002]烟酰胺单核苷酸(Nicotinamidemononucleotide，简称NMN)在人体细胞能量生成中扮演重要角色，它参与细胞内NAD(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸，细胞能量转化的重要辅酶)的合成，在医药领域具有巨大的应用价值。目前高纯度的β
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NMN主要是通过生物酶法合成，其过程中因为要大量用到烟酰胺核糖磷酸转移酶(NNPT)，导致其生产成本较高。
[0003]固定化酶(Immobilizedenzyme)是通过物理或化学方法将酶固定在特定的区域来保持其活性并降低其回收和重复利用难度的方法。根据酶和载体的结合形式，又可分为两类：表面固定与内部封装。由于经表面固定法处理的酶仍暴露在外界环境中，难以确保其稳定性，所以近年来人们更倾向于使用内部封装法固定化酶。但是，内部封装法存在两个主要的问题，一是载体的存在限制了底物扩散，在一定程度上会影响酶的催化活性；二是原位封装法在载体的选择上具有一定本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种烟酰胺核糖磷酸转移酶的封装工艺，其特征在于：所述封装工艺包括以下步骤：(1)分别将单链DNA(ssDNA)与三(2
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羧乙基)膦(TCEP)、烟酰胺核糖磷酸转移酶(NNPT)与4
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(N
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马来酰亚胺基甲基)环己烷
‑1‑
羧酸
‑3‑
硫代
‑
N
‑
琥珀酰亚胺脂内盐(SMCC)混合反应3h，分别记为ID1与ID2，离心超滤纯化后再将ID1与ID2混合反应12h，然后离心超滤纯化；(2)在十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)与2
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甲基咪唑的水溶液中加入醋酸锌，搅拌溶解后加入步骤(1)中的ssDNA
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NNT复合物，搅拌均匀后静置3h；(3)将步骤(2)中产物离心后收集固体，使用去离子水洗涤，重复2次后将固体涡旋分散均匀，得到混合液M1；(4)将硝酸钴溶解于乙醇与水的混合溶液，搅拌的同时加入步骤(3)中的混合液M1，反应10min后离心收集固体，将其离心洗涤三次后加入HEPES分散溶解，得到最终产物。2.根据权利要求1所述的烟酰胺核糖磷酸转移酶的封装...

【专利技术属性】
技术研发人员：陆致贤，陈鑫，
申请(专利权)人：浙江维泰生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：