一种检查PLGA中丙交酯乙交酯摩尔含量的方法技术

本发明专利技术属于化学分析领域，涉及一种检查PLGA中丙交酯乙交酯摩尔含量的方法。所述方法采用高效液相色谱技术，主要是通过检测PLGA被碱降解后生成的乳酸和羟基乙酸，进一步按外标法以峰面积计算得出丙交酯和乙交酯的摩尔含量。该方法采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以磷酸二氢钠溶液

【技术实现步骤摘要】
一种检查PLGA中丙交酯乙交酯摩尔含量的方法


[0001]本专利技术属于化学分析领域，具体涉及一种检查PLGA中丙交酯乙交酯摩尔含量的方法。

技术介绍

[0002]丙交酯乙交酯共聚物（Poly（lactide
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co
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glycolide），以下简称PLGA）是一种可降解的功能高分子有机化合物，具有良好的生物相容性、无毒、良好的成囊和成膜等性能。在制药领域，PLGA微球可作为载体，具有载药能力强，能控制药物释放时间，实现靶向运输等优点。PLGA中丙交酯和乙交酯的摩尔含量的不同会导致PLGA有不种的型号，不同型号的PLGA作为载体对载药量、包封率和体外释放行为的影响不一致，因此丙交酯和乙交酯的摩尔含量对PLGA型号的判定起到了至关重要的作用。
[0003]中国药典中的检查方法为：取本品10 ~ 20 mg，加含有四甲基硅烷（TMS）的氘代三氯甲烷0.6 ~ 0.8 mL中，溶解。照核磁共振波谱法测定，记录乙交酯单元中亚甲基质子（4.4 ~ 5.0 ppm）及丙交酯单元中次甲基质子（5.1 ~5.5 ppm）的峰面积，计算丙交酯和乙交酯的摩尔含量。该方法虽然准确性高，但是成本高，且普遍性不强。目前国内未见有关用高效液相色谱方法来分析丙交酯和乙交酯的摩尔含量的报道。

技术实现思路

[0004]本专利技术要解决的技术问题是提供一种检查PLGA中丙交酯乙交酯摩尔含量的方法，以填补现有技术中高效液相色谱方法对丙交酯乙交酯摩尔含量的测定的空白。
[0005]本专利技术所述的检查PLGA中丙交酯乙交酯摩尔含量的方法，原理是将PLGA使用碱降解成乳酸和羟基乙酸，通过检查乳酸和羟基乙酸进一步计算得出丙交酯和乙交酯的摩尔含量。因此在用高效液相色谱法测定之前先对样品进行碱降解，具体步骤如下：（1）制备供试品溶液和对照品溶液：称取供试品和对照品分别置于两个量瓶中，各自加入碱性物质的水溶液，在100℃条件下加热并振摇使供试品和对照品全部溶解，在室温条件下放冷，加入酸液调节pH至中性，定容得供试品溶液和对照品溶液；（2）检测与计算：取供试品溶液与对照品溶液分别注入高效液相色谱仪进行检测，按外标法以峰面积计算丙交酯和乙交酯的摩尔含量；（3）高效液相色谱条件：色谱柱：C18色谱柱；柱温：20 ~ 30℃；流速：1.0 mL/min；检测器：紫外线检测器；检测波长：210 nm；进样量：20 μL；流动相：磷酸二氢钠水溶液
‑
乙腈；洗脱方式：等度洗脱。
[0006]其中，步骤（1）中，所述碱性物质的水溶液为氢氧化钠水溶液或氢氧化钾水溶液，浓度为0.1 mol/L；优选地，所述碱性物质的水溶液为氢氧化钠水溶液；步骤（1）中，以质量比计，供试品：碱性物质=1：1 ~ 5；步骤（1）中，所述酸液为磷酸水溶液，体积百分比浓度为85% ~ 95%；步骤（3）中，C18色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；长度为250 mm，内径为
4.6 mm，填充剂粒径为5 μm。
[0007]步骤（3）中，所述磷酸二氢钠水溶液为0.04 mol/L的磷酸二氢钠水溶液，其中含体积百分比浓度为0.05%的四丁基氢氧化铵。
[0008]步骤（3）中，流动相磷酸二氢钠水溶液与乙腈的体积比为93 ~ 97：3 ~ 7；优选地，流动相磷酸二氢钠水溶液与乙腈的体积比为95：5；步骤（3）中，柱温为20 ~ 30℃；优选地，柱温为25 ℃。
[0009]本专利技术具有以下有益效果：1.本专利技术在测定前将PLGA用碱降解，获得稳定可以检测的乳酸和羟基乙酸，采用高效液相色谱技术实现了对丙交酯乙交酯共聚物摩尔含量的测定；2.本专利技术通过高效液相色谱法，采用等度洗脱，便于操作，适用范围广，且具有良好的线性关系，重复性和稳定性，能够有效检查丙交酯乙交酯共聚物的摩尔含量；3.本专利技术耐用性好，在柱温和流速发生微小改变时，测定出丙交酯和乙交酯的摩尔含量与基本条件下测定的结果相差很小。
附图说明
[0010]图1为空白溶液的HPLC图谱；图2为丙交酯对照品溶液的HPLC图谱；图3为乙交酯对照品溶液的HPLC图谱；图4为混合对照品溶液的HPLC图谱；图5为供试品溶液的HPLC图谱；图6为丙交酯乙交酯摩尔含量检查的NMR图谱H谱。
具体实施方式
[0011]实施例11. 色谱条件色谱柱：C18色谱柱（4.6 mm
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250 mm，5 μm），以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；柱温：25 ℃；流速：1.0 mL/min；检测器：紫外线检测器；检测波长：210nm；流动相：0.04 mol/L磷酸二氢钠水溶液（含0.05 %四丁基氢氧化铵）：乙腈（V/V）= 95：5；进样量：20 μL；洗脱方式：等度洗脱。
[0012]2. 溶液的配置（1）制备空白溶液：精密量取0.1mol/L氢氧化钠溶液9mL置10mL量瓶中，加入30 μL磷酸溶液，用0.1mol/L氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀，即得；（2）制备丙交酯对照品溶液：取DL
‑
丙交酯对照品8mg，精密称定，置10mL量瓶中，加0.1mol/L氢氧化钠溶液9mL，100 ℃条件下加热并振摇使全部溶解，在室温下放冷，加入30μL磷酸溶液，用0.1mol/L氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀，即得；（3）制备乙交酯对照品溶液：取乙交酯4mg，精密称定，置20mL量瓶中，加0.1mol/L氢氧化钠溶液18mL，100℃条件下加热并振摇使全部溶解，在室温下放冷，加入60μL磷酸溶液，用0.1mol/L氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀，即得；（4）制备混合对照品溶液：取DL
‑
丙交酯对照品16mg，乙交酯约4mg，精密称定，置
20mL量瓶中，加0.1mol/L氢氧化钠溶液18mL，100℃条件下加热并振摇使全部溶解，在室温下放冷，加入60μL磷酸溶液，用0.1mol/L氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀，即得；（5）制备供试品溶液：取供试品10mg，精密称定，置10mL量瓶中，加0.1mol/L氢氧化钠溶液9mL，100℃条件下加热并振摇使全部溶解，在室温下放冷，加入30μL磷酸溶液，用0.1mol/L氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀，即得。
[0013]3. 实验结果取丙交酯对照品溶液、乙交酯对照品溶液与供试品溶液按色谱条件注入高效液相色谱仪，记录色谱图，如附图2、附图3及附图5所示。按外标法以峰面积计算得出丙交酯和乙交酯的摩尔含量。计算公式如下：式中：W
s
：丙交酯或乙交酯对照品的称样量，g；M
r
：相对分子量，丙交酯为144、乙交酯为116.07；A
s
：对照品溶液中丙交酯或乙交酯峰的峰面积；A
t
：供试品溶液中丙交酯或乙交酯峰的峰面积；V
s
：对照品溶液的稀释倍数；V
t
：供试品溶液的稀释倍数；P
s
：对照品的含量（或纯度），%。
[0014]试验例1方法学考察本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检查PLGA中丙交酯乙交酯摩尔含量的方法，其特征在于，在采用高效液相色谱技术测定前先对样品进行碱降解；其中，所述的碱降解操作为将样品置于量瓶中，加入碱性物质的水溶液，加热并振摇使样品全部溶解。2.根据权利要求1所述的一种检查PLGA中丙交酯乙交酯摩尔含量的方法，其特征在于，包括如下步骤：供试品溶液与对照品溶液的制备：将供试品与对照品分别进行碱降解后于室温条件下放冷，分别加入酸液调节pH至中性，定容得供试品溶液和对照品溶液；检测与计算：将供试品溶液和对照品溶液分别注入高效液相色谱仪中，用高效液相色谱法进行检测，通过外标法以峰面积计算得出丙交酯和乙交酯的摩尔含量。3.根据权利要求2所述的一种检查PLGA中丙交酯乙交酯摩尔含量的方法，其特征在于，具体的色谱条件为：色谱柱：C18色谱柱；柱温：20 ~ 30℃；流速：1.0 mL/min；检测器：紫外线检测器；检测波长：210 nm；进样量：20 μL；流动相：磷酸二氢钠水溶液
‑
乙腈；洗脱方式：等度洗脱。4.根据权利要求1所述的一种检查PLGA中丙交酯乙交酯摩尔含量的方法，其特征在于，所...

【专利技术属性】
技术研发人员：牛自芬，梁新秀，韩丽莹，郭燕，张彩萍，韩灵芝，王春燕，
申请(专利权)人：山东谷雨春生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：