一种肿瘤疫苗佐剂及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种肿瘤疫苗佐剂及其应用；所述疫苗佐剂为二核苷酸重复序列(CA)n。本发明专利技术发现CA二核苷酸重复序列作为特异性配体，在激活cGAS

【技术实现步骤摘要】
一种肿瘤疫苗佐剂及其应用


[0001]本专利技术属于生物医药
，具体涉及一种肿瘤疫苗佐剂及其应用。

技术介绍

[0002]近些年免疫治疗取得突破性进展，其对疫苗佐剂的要求也越来越高。尽管已经开发出多种来型的佐剂，但多数佐剂还处于临床试验阶段。疫苗佐剂有以下4种：第一类为抗原保留载体，如铝盐、水包油乳剂MF59；第二类为抗原摄取介质，如免疫刺激复合物、铝盐、脂质体、皂苷QS21；第三类为激活免疫反应的免疫调节分子，如聚胞鸟嘧啶(CpG)、单磷酰糖脂MLP等；第四类为活化免疫细胞功能的细胞因子，如粒细胞
‑
巨噬细胞集落刺激因子(GM
‑
CSF)、白介素2(IL
‑
2)、白介素18(IL
‑
18)等。
[0003]目前虽然疫苗佐剂类型繁多，但其有效性及安全性未能达到很好的平衡。如前临床实验应用较多的Toll样受体3(TLR3)的配体分子聚肌胞苷酸(polyI:C)，虽然通过体外实验验证了其在激活树状突细胞功能及T细胞功能方面的效能，但是在动物实验及前临床试验中都观察到了机体产生较为严重的炎症副作用，如发热，肺部炎症及肾小球炎症等。免疫治疗佐剂激活的信号通路有所不同，导致了其在发挥有效抗肿瘤效应的同时，不可避免地产生各种各样的不良反应。因此，目前缺乏既能够强效激活抗肿瘤免疫又具有良好的生物安全性即副作用较小的生物疫苗佐剂。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种可以强效激活抗肿瘤免疫又具有良好的生物安全性即副作用较小的生物疫苗佐剂。
[0005]本专利技术所采取的技术方案是：
[0006]本专利技术的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供强效且副作用小的疫苗佐剂在肿瘤免疫治疗的应用，发现二核苷酸重复序列片段(CA)n(n>13)可以辅助现有的肿瘤免疫治疗尤其是肿瘤疫苗疗法，抑制肿瘤生长。
[0007]本专利技术的第一方面，提供二核苷酸重复序列片段(CA)n在(a1)～(a3)至少一种中的应用；其中n＞13；n为整数；
[0008](a1)制备疫苗佐剂；
[0009](a2)提升疫苗保护力的产品；
[0010](a3)制备激活机体免疫应答的产品。
[0011]在本专利技术的一些优选实施方式中，所述n＝15～30。
[0012]在本专利技术的一些实施方式中，所述疫苗为肿瘤疫苗。
[0013]在本专利技术的一些优选实施方式中，所述肿瘤包括乳腺癌、卵巢癌、肺癌、胰腺癌、肾癌、胃癌、淋巴瘤、结肠癌、肝癌、黑色素瘤、膀胱癌、子宫颈癌或前列腺癌。
[0014]本专利技术的第二方面，提供一种产品，所述产品包括本专利技术第一方面所述的核苷酸重复序列(CA)n；所述产品具有如下(b1)～(b3)中至少一种功能：
[0015](b1)疫苗佐剂；
[0016](b2)提升疫苗保护力；
[0017](b3)激活机体免疫。
[0018]在本专利技术的一些实施方式中，所述疫苗为肿瘤疫苗。
[0019]在本专利技术的一些优选实施方式中，所述肿瘤包括乳腺癌、卵巢癌、肺癌、胰腺癌、肾癌、胃癌、淋巴瘤、结肠癌、肝癌、黑色素瘤、膀胱癌、子宫颈癌或前列腺癌。
[0020]在本专利技术的一些实施方式中，所述产品包括载体。
[0021]在本专利技术的一些实施方式中，所述二核苷酸重复序列(CA)n与载体的质量体积比0.02～0.5g/L。
[0022]其中，所述药用载体为甘露糖修饰的纳米颗粒、基于阳离子脂质的市售转染试剂、非病毒载体、高分子膜、仿生膜、生物膜或病毒载体。
[0023]在本专利技术的一些优选实施方式中，所述转染试剂，包括但不限于Lipofectamine2000、Lipofectamine3000、Lipofectamine8000、Lipofectamine LTX、Lipofectamine RNAiMAX、Lipofectamine MessengerMAX、Invivofectamine 3.0。
[0024]在本专利技术的一些优选实施方式中，所述非病毒载体包括但不限于阳离子聚合物、阳离子脂质体、阴离子脂质体、胶束、无机纳米颗粒或微球。
[0025]在本专利技术的一些优选实施方式中，所述高分子膜、仿生膜或生物膜，包括但不限于细胞膜、外泌体或细胞外囊泡。
[0026]在本专利技术的一些优选实施方式中，所述病毒载体，包括但不限于腺病毒载体、逆转录病毒、慢病毒、疱疹病毒或病毒样颗粒。
[0027]在本专利技术的一些优选实施方式中，所述纳米载体包括但不限于多聚阳离子肽、阳离子脂质、阴离子脂质、中性脂质、辅助脂质或两亲性化合物。
[0028]在本专利技术的一些实施方式中，所述甘露糖修饰的纳米颗粒具体为甘露醇修饰聚乙二醇纳米粒子。
[0029]在本专利技术的一些实施方式中，所述甘露糖修饰的纳米颗粒的具体制备方法为：
[0030]S1：将1,2
‑
二植酰基
‑
sn
‑
甘油
‑3‑
磷酸乙醇胺、3β
‑
[N
‑
(N',N'
‑
二甲基氨基乙烷)
‑
氨基甲酰]胆固醇、1,2
‑
二油酰
‑
sn
‑
甘油
‑3‑
磷酸胆碱和1,2
‑
二棕榈酰
‑
sn
‑
甘油
‑3‑
磷酸((乙基
‑
1'，2'，3'
‑
三唑)三乙二醇甘露糖)溶解在氯仿中；
[0031]S2：除去氯仿，并将剩余液体脱水成脂质薄膜，然后用4
‑
(2
‑
羟乙基)
‑1‑
哌嗪乙磺酸缓冲液再水化，超声处理后收集上清液。
[0032]在本专利技术的一些实施方式中，所述1,2
‑
二植酰基
‑
sn
‑
甘油
‑3‑
磷酸乙醇胺、3β
‑
[N
‑
(N',N'
‑
二甲基氨基乙烷)
‑
氨基甲酰]胆固醇、1,2
‑
二油酰
‑
sn
‑
甘油
‑3‑
磷酸胆碱和1,2
‑
二棕榈酰
‑
sn
‑
甘油
‑3‑
磷酸((乙基
‑
1'，2'，3'
‑
三唑)三乙二醇甘露糖)的摩尔比为：(1～2)：(2～3)：(5.5～6.5)：1。
[0033]在本专利技术的一些优选实施方式中，所述1,2
‑
二植酰基
‑
sn
‑
甘油
‑3‑
磷酸乙醇胺、3β
‑
[N<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.二核苷酸重复序列(CA)n在(a1)～(a3)至少一种中的应用；(a1)制备疫苗佐剂；(a2)提升疫苗保护力的产品；(a3)制备激活机体免疫应答的产品；其中n＞13，优选为15～30，n为整数。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述疫苗为肿瘤疫苗；优选地，所述肿瘤包括乳腺癌、卵巢癌、肺癌、胰腺癌、肾癌、胃癌、淋巴瘤、结肠癌、肝癌、黑色素瘤、膀胱癌、子宫颈癌或前列腺癌。3.一种产品，其特征在于，所述产品包括权利要求1所述的二核苷酸重复序列(CA)n；所述产品具有如下(b1)～(b3)中至少一种功能：(b1)疫苗佐剂；(b2)提升疫苗保护力；(b3)激活机体免疫；优选地，所述疫苗为肿瘤疫苗；优选地，所述肿瘤包括乳腺癌、卵巢癌、肺癌、胰腺癌、肾癌、胃癌、淋巴瘤、结肠癌、肝癌、黑色素瘤、膀胱癌、子宫颈癌或前列腺癌。4.根据权利要求3所述的产品，其特征在于，所述产品包括载体。5.根据权利要求4所述的产品，其特征在于，所述载体包括转染试剂、非病毒载体、高分子膜、仿生膜、生物膜或病毒载体；优选地，所述转染试剂包括甘露糖修...

【专利技术属性】
技术研发人员：宋尔卫，苏士成，张晓倩，陈嘉宁，陈惠萍，
申请(专利权)人：中山大学孙逸仙纪念医院，
类型：发明
国别省市：