冠状动脉扩张症的诊断生物标志物及其应用制造技术

本发明专利技术公开了冠状动脉扩张症的诊断生物标志物及其应用。用于冠状动脉扩张症诊断的生物标志物为IGSF10。实验证明，通过检测本发明专利技术提供的生物标志物可以诊断受试者是否患有冠状动脉扩张症，具有较高的准确性，本发明专利技术具有较高的应用价值。较高的应用价值。较高的应用价值。

【技术实现步骤摘要】
冠状动脉扩张症的诊断生物标志物及其应用


[0001]本专利技术属于生物
，涉及冠状动脉扩张症的诊断生物标志物及其应用。

技术介绍

[0002]冠状动脉扩张症(Coronary Artery Ectasia，CAE)又称为冠状动脉瘤样扩张，是指冠状动脉弥漫性扩张超过邻近正常冠脉管径1.5倍的罕见异常病症。本病常累及多支血管，以右冠状动脉扩张多见。CAE可以单发也可以多发，形态为囊状或梭状。50％的CAE病例并发冠状动脉粥样硬化。冠状动脉造影是CAE诊断的金标准。单纯性CAE是指排除动脉粥样硬化、血管炎、川崎病、感染性疾病、先天性冠状动脉疾病等病因的不明原因所致的冠脉扩张病例。
[0003]CAE在冠状动脉造影人群中发病率为1.2％～7.4％，男性发病率略高，发病率随年龄的增加而增加，平均发病年龄为(55
±
10)岁。CAE的主要危害是引起冠状动脉慢血流、微循环障碍和促发扩张部位的血栓形成，影响心肌的正常血液供应，以及造成扩张部位的破裂风险，其主要临床表现有：心绞痛、心肌梗死、心律失常、猝死等。
[0004]目前CAE的形态学分类方法有两种：第一种方法是按照扩张血管的直径大小，分为轻、中和重三种程度的扩张，分别对应直径小于5mm、直径5～8mm和直径大于8mm，这种分类方法简单明了，但是对于有多处病变的扩张，则不易准确归类。另一种分类方法则是Markis等，在1976年所提出的Markis分类法，按照受累的血管数目及弥漫程度分为四类，这种分类方法能比较全面地反映CAE的病变。按照Markis分类法，半数以上的CAE为单支血管病变(即MarkisⅣ型扩张)，以右冠状动脉最常受累。

技术实现思路

[0005]为了弥补现有技术的不足，本专利技术的目的之一在于提供包含对于冠状动脉扩张症诊断的生物标志物。
[0006]为了通过改进在整个疾病谱中对冠状动脉扩张症的进展的评估来克服目前的障碍以更好地进行临床试验设计，对冠状动脉扩张症的诊断和进展生物标志物存在着迫切的未满足的需求。本专利技术人鉴定出了作为用于冠状动脉扩张症的生物标志物。
[0007]因此，在本专利技术第一方面提供了一种诊断试剂在制备诊断冠状动脉扩张症的产品中的应用，所述诊断试剂包括能够检测样本中IGSF10标志物的表达水平的试剂。
[0008]其中生物标志物IGSF10(Immunoglobulin Superfamily Member 10，gene ID：285313)，包括基因及其编码的蛋白及其同源物，突变，和同等型。该术语涵盖全长，未加工的生物标志物，以及源自细胞中加工的任何形式的生物标志物。该术语涵盖生物标志物的天然发生变体(例如剪接变体或等位变体)。Gene ID可在https://www.ncbi.nlm.nih.gov/gene/获得。
[0009]在本专利技术中，所述样本包括但不限于组织样本、血液如全血或血液组分、例如血细胞/细胞组分、血清或血浆、尿液样本、体液样本或其他外周来源的样本。
[0010]进一步，所述样本包括血液、组织液、脑脊液、尿液、泪液、唾液、汗液。
[0011]进一步，所述样本为血液。
[0012]进一步，所述诊断试剂选自：
[0013]特异性识别前面所述的IGSF10标志物的寡核苷酸探针；或
[0014]特异性扩增前面所述的IGSF10标志物的引物。
[0015]在本专利技术的实施方案中，IGSF10的序列如转录本ENST00000282466.4所示。
[0016]进一步，所述诊断试剂采用高通量测序方法和/或基因芯片法和/或定量PCR方法和/或探针杂交方法检测样本中IGSF10标志物的表达水平。
[0017]在一个实施方案中，将所述IGSF10基因与对应的参比水平进行比较。上述比较使得能够确定个体是否患有冠状动脉扩张症。
[0018]进一步，所述定量PCR方法中使用的试剂包括特异性扩增前面所述的IGSF10标志物的引物。
[0019]进一步，所述引物包括天然的寡核苷酸或合成的寡核苷酸，引物可以是单链或双链，并且必须足够长以在诱导剂存在下引发合成预期的延伸产物，例如，对于诊断应用，依赖于靶序列的复杂性，寡核苷酸引物通常含有15
‑
25个或更多核苷酸，尽管它可以含有更少核苷酸。
[0020]进一步，所述探针杂交方法中使用的试剂包括特异性识别前面所述的IGSF10标志物的寡核苷酸探针。
[0021]进一步，所述探针包括荧光探针、抗体或基于吸光度的探针。如果是基于吸光度的探针，发色团pNA(对硝基苯胺)可用作检测和/或定量本文公开的靶核酸序列的探针；也可以是包含荧光分子或底物的核酸序列，该荧光分子或底物在暴露于酶时变为发荧光的，并且该核酸序列与一种核酸序列的片段互补。
[0022]进一步，所述探针在一般实时荧光定量PCR检测过程中，被设计成熔解温度超过正向和反向引物10℃，实时荧光定量PCR的反应试剂包括但不限于：目标基因靶序列的正反向引物、Taqman荧光探针、优化的PCR缓冲液、三磷酸脱氧核苷酸以及具有5
’‑3’
外切酶活性的DNA聚合酶。
[0023]在优选的实施方案中，与正常对照相比，IGSF10在冠状动脉扩张症患者中的表达水平下调。
[0024]本专利技术第二方面提供了一种冠状动脉扩张症的诊断产品，所述诊断产品包括前面所述的诊断试剂。
[0025]进一步，所述诊断产品包括试剂盒、芯片、试纸。
[0026]在一些实施方案中，所述诊断试剂包括在mRNA水平确定生物标志物IGSF10表达水平的试剂。在mRNA水平确定生物标志物IGSF10表达水平是指为了诊断冠状动脉扩张症，在从冠状动脉扩张症疑似患者分离的生物学样本中确认用于诊断冠状动脉扩张症的基因的mRNA存在与否和表达程度的过程，用于测量mRNA的表达量。
[0027]进一步，所述mRNA水平确定生物标志物IGSF10表达水平的试剂包括通过聚合酶链反应、实时荧光定量逆转录多聚酶链反应、逆转录聚合酶链反应、竞争性聚合酶链反应、核酸酶保护分析、原位杂交法、核酸微阵列、RNA印迹或DNA芯片的方法进行确定mRNA水平的试剂。
[0028]在一些实施方案中，所述试剂包括在蛋白水平上确定生物标志物IGSF10表达水平的试剂。在蛋白水平确定生物标志物IGSF10表达水平是指为了诊断冠状动脉扩张症，在从冠状动脉扩张症疑似患者分离的生物学样本中确认用于诊断冠状动脉扩张症的基因的蛋白存在与否和表达程度的过程，用于测量蛋白的表达量。
[0029]进一步，所述蛋白水平上确定生物标志物IGSF10表达水平的试剂包括通过免疫印迹、酶联免疫吸附试验、放射免疫分析、放射免疫扩散法、免疫电泳、组织免疫染色、免疫沉淀分析法、补体固定分析法、荧光激活细胞分选、质量分析或蛋白质微阵列的方法进行检测蛋白水平的试剂。
[0030]本专利技术第三方面提供了一种预防或治疗冠状动脉扩张症的药物组合物，所述本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种诊断试剂在制备诊断冠状动脉扩张症的产品中的应用，其特征在于，所述诊断试剂包括能够检测样本中IGSF10标志物的表达水平的试剂；优选地，所述样本包括血液、组织液、脑脊液、尿液、泪液、唾液、汗液；优选地，所述样本为血液。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述诊断试剂选自：特异性识别权利要求1所述的IGSF10标志物的寡核苷酸探针；或特异性扩增权利要求1所述的IGSF10标志物的引物。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述诊断试剂采用高通量测序方法和/或基因芯片法和/或定量PCR方法和/或探针杂交方法检测样本中IGSF10标志物的表达水平；优选地，所述定量PCR方法中使用的试剂包括特异性扩增权利要求1所述的IGSF10标志物的引物；优选地，所述探针杂交方法中使用的试剂包括特异性识别权利要求1所述的IGSF10标志物的寡核苷酸探针。4.一种冠状动脉扩张症的诊断产...

【专利技术属性】
技术研发人员：高学英，肖冰，杨秀春，
申请(专利权)人：河北医科大学第二医院，
类型：发明
国别省市：