一种miR-122-5p的应用制造技术

本发明专利技术涉及一种检测miR

【技术实现步骤摘要】
一种miR
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5p的应用


[0001]本专利技术涉及特发性肺动脉高压诊断
，尤其涉及一种检测miR
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5p的制剂在制备诊断特发性肺动脉高压的试剂盒中的应用。

技术介绍

[0002]特发性肺动脉高压(IPAH)是一种罕见但具有破坏性的疾病，其特征是肺动脉壁血管重构，导致肺血管阻力增加，右心室肥厚，并最终导致右心衰。发病率约为6/1000000，病死率较高。据统计，全世界每年有4万多人患有肺动脉高压，死亡率高达15％。即使经过常规治疗，肺动脉高压患者3年生存率也只有55％
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65％。目前市场上的药物对肺动脉高压的治疗效果并不理想。多数患者预后较差，生活质量无明显改善。因此，寻找一种准确、特异、低成本、易操作、安全的肺动脉高压诊断和有效监测方法，改善肺动脉高压患者的预后，具有重要的临床意义。虽然目前在了解肺血管过度收缩的原因方面取得了重要进展，现代化治疗逐渐改善了患者的功能和生存时间，但其具体的发病机制尚不清楚，死亡率仍然很高，在表观遗传基因调控水平上，特别是通过对非编码RNA的探索，目前还不清楚。
[0003]小分子核糖核酸(microRNA)是内源性RNA，其长度约为19nt
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25nt，主要协调信使RNA的翻译抑制，减少或退化，并在重要过程中发挥作用，例如细胞生长发育、器官形成、细胞增殖和凋亡、脂肪代谢、DNA甲基化和促进mRNA转录。microRNA(miRNA)广泛存在于人体各种组织和体液中，其中，外周血中miRNA的表达随个体生理和病理条件的改变而改变。血液miRNA的变化可以反映人类病理生理状况的变化；miRNAs可以稳定且不依赖于血液中的血细胞，血浆中的特定miRNAs可能成为诊断某些肿瘤或疾病的分子生物标志物。miRNA具有高度保守性，在外周血中稳定，易于采集和检测，使其有可能成为多种疾病的非侵入性诊断标志物。从外周血单个核细胞(PBMCs)中提取miRNA进行定量检测和比较，探索血液miRNA是诊断IPAH的新途径。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是针对现有技术中的不足，提供一种检测miR
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5p的制剂在制备诊断特发性肺动脉高压的试剂盒中的应用。
[0005]为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案是：
[0006]提供一种检测miR
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5p的制剂在制备诊断特发性肺动脉高压的试剂盒中的应用。
[0007]优选地，所述miR
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5p为血浆外泌体中的miR
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5p。
[0008]优选地，所述miR
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5p为外周血单个核细胞中的miR
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5p。
[0009]优选地，特发性肺动脉高压患者的miR
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5p显著地表达上调。
[0010]本专利技术采用以上技术方案，与现有技术相比，具有如下技术效果：
[0011]本专利技术提供一种检测miR
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5p的制剂在制备诊断特发性肺动脉高压的试剂盒中的应用；特发性肺动脉高压患者血浆外泌体和外周血单个核细胞中只有miR
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5p均表
达上调；与常氧组相比，miR
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5p在缺氧的PMECs、PASMCs、PCs和肺组织中显著表达，即miR
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5p可作为IPAH的分子诊断标志物。
附图说明
[0012]图1为PBMCs(A)和外泌体(B)中miRNA表达的火山图；
[0013]图2为采用无监督分层聚类分析IPAH和健康对照组之间差异表达的miRNAs；
[0014]图3为不同miRNA的前30个Gene Ontology(GO)富集通路主要集中在PBMCs(A)和血浆外泌体(B)中miRNA的生物学过程(Biological Process，BP)、细胞学组分(Cellular Components，CC)和分子生物学功能(Molecular Function，MF)；
[0015]图4为PBMCs(A)和外泌体(B)中miRNA相关的Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes(KEGG)通路分析；
[0016]图5为PBMCs的miRNA
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mRNA相互作用网络；
[0017]图6为血浆外泌体的miRNA
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mRNA相互作用网络；
[0018]图7为miR
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5p分别在缺氧和常氧下PMECs(A)、PASMCs(B)、PCs(C)中qPCR表达的比较结果，SuHx(D)和MCT(E)大鼠肺组织中与对照组中qPCR表达的比较结果，IPAH(F)患者肺组织与正常人中qPCR表达的比较结果(p Value<0.05)；
[0019]图8为PBMCs(A)和血浆外泌体(B)中miR
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5p对IPAH的ROC曲线分析。
具体实施方式
[0020]下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0021]需要说明的是，在不冲突的情况下，本专利技术中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。
[0022]下面结合附图和具体实施例对本专利技术作进一步说明，但不作为本专利技术的限定。
[0023]实施例
[0024]①
样本选择
[0025]患者组：2010年5月至2016年4月上海市肺科医院IPAH患者6例，3男3女(平均年龄：18岁)。纳入标准：IPAH诊断依据最新NICE临床分型。排除了结缔组织病、先天性心脏病、门脉高压、肺部疾病、慢性血栓栓塞和左心疾病引起的PAH；还排除了可能影响激素代谢的急慢性疾病患者，这些疾病包括急性或慢性感染、慢性自身免疫疾病、以前确定的原发性内分泌紊乱，以及在过去或过去接受激素(甲状腺激素、合成代谢类固醇、皮质类固醇)或药物显著抑制激素生产的患者。
[0026]对照组：从健康体检中心同时选取与患者组年龄、性别匹配的健康体检者6例，3男3女(平均年龄：18岁)。纳入标准：(1)既往无其他肺部疾病及相关疾病史；(2)家庭成员无相关肺部疾病史；(3)身体健康，无药物、酒精依赖等。...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测miR
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5p的制剂在制备诊断特发性肺动脉高压的试剂盒中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述miR
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5p为血浆外泌体中的miR
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5p。3.根据权利要求1所...

【专利技术属性】
技术研发人员：袁平，赵慧，吴文汇，姜蓉，王岚，刘锦铭，赵勤华，宫素岗，李慧婷，
申请(专利权)人：上海市肺科医院，
类型：发明
国别省市：