一种抗流感、呼吸道合胞病毒的甘草总皂苷颗粒的制备方法和应用技术

本发明专利技术属于制药工程领域，具体涉及一种甘草总皂苷的提取方法。该甘草总皂苷颗粒的制备工艺富集纯化了甘草总皂苷，该甘草总皂苷颗粒符合中医药传统理论，有利于阐释甘草物质基础及作用机制，疗效确切、服用安全可靠、毒副作用低，质量更为稳定可控。质量更为稳定可控。

【技术实现步骤摘要】
一种抗流感、呼吸道合胞病毒的甘草总皂苷颗粒的制备方法和应用


[0001]本专利技术属于本专利技术属于制药工程领域，具体涉及一种甘草总皂苷的提取方法。

技术介绍

[0002]呼吸道病毒可经呼吸道感染具备易传播、易感染、易流行、易变异的特点。目前用于临床的治疗呼吸道病毒感染的药物有磷酸奥司他韦、利巴韦林、金刚烷胺类等药物，但此类药物大多存在不良反应大、易产生耐药的缺点；中药具有多成分多靶点的协同作用，不易产生耐药性，不良反应小的优点在治疗呼吸道病毒感染的疾病中具有广阔的应用前景。
[0003]甘草被历代名医尊为众药之王，是豆科植物甘草G l ycyrrhi za ura l ens i s Fi sch.、胀果甘草G lycyrrhi za i nf l ata Bat.或光果甘草G lycyrrhi za g l abra L.的干燥根和根茎，性味甘,平。归心、肺、脾、胃经。具有补脾益气，清热解毒，祛痰止咳，缓急止痛，调和诸药的功效。甘草的主要化学成分以三萜皂苷类和黄酮类为主；药理活性广泛，具有免疫调节、抗炎、抗病毒、抗溃疡、抗菌、解痉、抗心律失常、抗肿瘤等作用。其成分较为复杂不利于阐明其物质基础及作用机制。
[0004]有效部位是指从单味药材或复方中提取到的相近化学性质的一类化合物。有效部位制剂符合中医药传统理论，有利于阐释中药物质基础及作用机制，疗效确切、服用安全可靠、毒副作用低，质量更为稳定可控。甘草可归肺经，具有祛痰止咳的功效；甘草总皂苷是甘草中含量较高的成分群，且具备较强的抗呼吸道病毒、抗炎、免疫调节作用，具备有效部位制剂的条件，目前尚无上市的甘草总皂苷制剂。因此本专利技术对甘草总皂苷进行提取、纯化、制剂研究提供一种可靠的甘草总皂苷颗粒的制备工艺及抗流感、呼吸道合胞病毒的应用。有利于阐明甘草的物质基础及作用机制，不易产生耐药，不良反应小。

技术实现思路

[0005]本专利技术提供了一种甘草总皂苷颗粒的加工工艺，包括以下步骤：
[0006](1)甘草总皂苷颗粒的提取：以12倍量50％乙醇提2次，每次1.5h；(2)甘草总皂苷颗粒的纯化：以HPD300型大孔树脂纯化甘草总皂苷，上样液浓度为2～4mg/mL，上样量为3BV，流速为2BV/h，上样完成后，先以超纯水2BV，3BV/h的流速洗脱除杂，再用60％乙醇以2BV/h的流速洗脱4BV；
[0007](3)甘草总皂苷颗粒的制粒：甘草总皂苷颗粒的制粒工艺优化：辅料为糊精:乳糖＝1:5，药辅比为1:1，润湿剂为80％乙醇，制软材，制粒，60℃干燥一小时，整粒。
[0008]本专利技术有益效果为：该甘草总皂苷颗粒的制备工艺富集纯化了甘草总皂苷，该甘草总皂苷颗粒符合中医药传统理论，有利于阐释甘草物质基础及作用机制，疗效确切、服用安全可靠、毒副作用低，质量更为稳定可控。最终该甘草总皂苷颗粒中甘草总皂苷的含量为344.05
±
5.48mg/g，甘草酸的含量为112.04
±
4.84mg/g，甘草苷的含量为49.62
±
2.69mg/g，甘草皂苷G2的含量为15.89
±
0.57mg/g。该甘草总皂苷颗粒可以多成分多靶点抑制流感、
呼吸道合胞病毒。该甘草总皂苷颗粒可改善H1N1所引起的小鼠体重下降、肺组织病理变化情况，降低小鼠肺指数、肺部病毒载量；抑制RSV复制周期的入侵阶段及复制阶段，降低RSV感染小鼠肺指数，降低小鼠肺中病毒载量，改善小鼠肺部病变情况，降低RSV感染小鼠血清中NF
‑
κB、TNF
‑
α水平减轻其炎症反应，提高小鼠血清中I FN
‑
β水平。
附图说明
[0009]图1H1N1感染小鼠每日体重变化率与空白组比较，##P<0.01；与模型组比较，**P<0.01，*P<0.05
[0010]图2H1N1感染小鼠肺指数情况注：与空白组比较，##P<0.01；与模型组比较，**P<0.01，*P<0.05
[0011]图3H1N1感染小鼠肺组织病理变化情况(
×
200)A空白对照组；B模型对照组；C甘草总皂苷颗粒低剂量组；D甘草总皂苷颗粒高剂量组；E磷酸奥司他韦组
[0012]图4H1N1感染小鼠肺组织病毒载量注：与空白组比较，##P<0.01；与模型组比较，**P<0.01，*P<0.05
[0013]图5甘草总皂苷颗粒体外抗RSV作用
[0014]图6利巴韦林体外抗RSV作用
[0015]图7甘草总皂苷颗粒体外抗RSV作用机制注：红色箭头代表药物持续存在的时间，与之相对应的条形图代表在该段时间内病毒的复制能力强弱，l og
10
(TCI D
50
/mL)值越大表明在病毒复制能力越强。
[0016]图8利巴韦林体外抗RSV作用机制红色箭头代表药物持续存在的时间，与之相对应的条形图代表在该段时间内病毒的复制能力强弱，l og
10
(TCI D
50
/mL)值越大表明在病毒复制能力越强。
[0017]图9RSV感染小鼠肺指数的变化与空白组比较，##P<0.01；与模型对照组比较，**P<0.01
[0018]图10RSV感染小鼠肺组织病理变化情况(
×
200)A空白对照组；B模型对照组；C甘草总皂苷颗粒低剂量组；D甘草总皂苷颗粒高剂量组；E利巴韦林组
[0019]图11RSV感染小鼠肺组织病毒载量与空白组比较，##P<0.01；与模型组比较，**P<0.01、*P<0.05
[0020]图12RSV感染小鼠血清中NF
‑
κB水平与空白组比较，##P<0.01；与模型组比较，*P<0.05
[0021]图13RSV感染小鼠血清中TNF
‑
α水平与空白组比较，##P<0.01；与模型组比较，**P<0.01、*P<0.05
[0022]图14RSV感染小鼠血清中I FN
‑
β水平与空白组比较，#P<0.05；与模型组比较，**P<0.01、*P<0.05
具体实施例
[0023]实施例1
[0024]本实施例进行体内抗H1 N1实验，用于验证甘草总皂苷颗粒的抗流感功效。将6周龄的BALB/c雌性小鼠分为5组，每组6只，分别为空白对照组、模型对照组、磷酸奥司他韦组
(阳性药，每天25.6mg/kg)组、甘草总皂苷颗粒低剂量(每天60mg/kg)组、甘草总皂苷颗粒高剂量(每天300mg/kg)组。小鼠适应性饲养3天后，每天灌胃给药本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种甘草总皂苷颗粒的加工工艺，其特征在于，包括以下步骤：(1)甘草总皂苷颗粒的提取：以12倍量50％乙醇提2次，每次1.5h；(2)甘草总皂苷颗粒的纯化：以HPD300型大孔树脂纯化甘草总皂苷，上样液浓度为2～4mg/mL，上样量为3BV，流速为2BV/h，上样完成后，先以超纯水2BV，3BV/h的流速洗脱除杂，再用60％乙醇以2BV/...

【专利技术属性】
技术研发人员：崔清华，田景振，李忠原，李保宏，
申请(专利权)人：山东中医药大学，
类型：发明
国别省市：