NAP-3、LFT及CCL2在糖尿病肾病发病风险预测和诊断的应用制造技术

NAP

【技术实现步骤摘要】
NAP
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3、LFT及CCL2在糖尿病肾病发病风险预测和诊断的应用


[0001]本专利技术涉及疾病检测诊断
，特别涉及NAP
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3、LFT及CCL2在糖尿病肾病发病风险预测和诊断的应用。

技术介绍

[0002]糖尿病肾病(diabetic kidney disease，DKD)是指由糖尿病引起的慢性肾脏疾病，是糖尿病的一种严重的并发症，它会影响肾脏的正常运作，可能在数月或数年后逐渐导致体液潴留、血钾升高、心血管疾病、眼部微血管损伤、贫血、勃起功能障碍、腹泻以及血液钙磷失衡而引起的骨骼和矿物质紊乱问题,如不加以防治，最终可发展为终末期肾病。肾脏衰竭可危及生命,早期治疗可预防或延迟疾病进展，降低并发症的几率。
[0003]目前糖尿病肾病的实验室检查主要包括尿常规检查和肾功能检查。尿常规检查主要包括蛋白尿(尿微量白蛋白、尿转铁蛋白、尿免疫球蛋白G、尿α1微球蛋白、尿β2微球蛋白、尿视黄醇结合蛋白)和血尿检查。肾功能检查包括肌酐、血尿素氮、尿酸、胱抑素C等指标。其中，肌酐最通用，可以用来计算肾小球滤过率，这是最准确的肾功能指标，但是这种检测灵敏度底和特异性底，且检测结果准确度也低。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供糖尿病肾病标志物及其用途，为糖尿病肾病的诊断和疗效评估提供新的、高灵敏度和高特异性的特异标志物和检测手段，可以解决上述
技术介绍
中提出的问题。
[0005]为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：NAP
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>3、LFT及CCL2在糖尿病肾病发病风险预测和诊断的应用，NAP
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3、LFT及CCL2基因在糖尿病肾病患者的血细胞以及肾组织中特异性高表达，用作糖尿病肾病诊断的特异性标志物。
[0006]一种诊断糖尿病肾病的试剂盒，其特征在于，所述包括NAP
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3、LFT及CCL2的特异性抗体、特异性结合分子，和/或NAP
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3、LFT及CCL2的mRNA或cDNA的引物或引物对、探针或芯片，芯片包括核酸芯片和蛋白质芯片，核酸芯片包括基片和点样在基片上的特异性寡核苷酸探针，所述特异性寡核苷酸探针包括与NAP
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3、LFT及CCL2特异性结合的探针，所述多核苷酸为mRNA或cDNA，蛋白质芯片包括基片和点样在基片上的特异性抗体，所述特异性抗体包括与NAP
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3、LFT及CCL2特异性结合的特异性抗体。
[0007]与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：
[0008]1、本专利技术提出的NAP
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3、LFT及CCL2在糖尿病肾病发病风险预测和诊断的应用，NAP
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3对糖尿病肾病具有一定的诊断价值，单独作为诊断标志物的准确度已经能达到90.4％以上，而在此基础上NAP
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3、CCL2及LFT联合用于诊断糖尿病肾病时，准确度比NAP
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3独立诊断糖尿病肾病的准确度进一步提高，高达95.2％，效果显著。
[0009]2、本专利技术提出了将上述三种标志基因作为糖尿病肾病诊断的生物标志物，并根据这三种基因制备一种新的糖尿病肾病检测试剂盒，可广泛用于公共医疗中，能够有效提高
糖尿病肾病的诊断效率，且灵敏度高，特异性强。
附图说明
[0010]图1为本专利技术中高通量GEO芯片中糖尿病肾病患者和正常人群的肾组织匀浆中的关键炎症因子NAP
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3的基因表达量。
[0011]图2为本专利技术中高通量GEO芯片中糖尿病肾病患者和正常人群的外周血单核细胞中的关键炎症因子NAP
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3的基因表达量。
[0012]图3为本专利技术中以NAP
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3基因表达量单独作为诊断手段诊断糖尿病肾病患者时的ROC曲线。
[0013]图4为本专利技术中以NAP
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3为核心分子的蛋白互作网络，其中包括LTF和CCL2。
[0014]图5为本专利技术中高通量GEO芯片中糖尿病肾病患者和正常人群的外周血单核细胞中的关键炎症因子LTF的基因表达量。
[0015]图6为本专利技术中高通量GEO芯片中糖尿病肾病患者和正常人群的外周血单核细胞中的关键炎症因子CCL2的基因表达量。
[0016]图7为本专利技术中以LTF基因表达量单独作为诊断手段诊断糖尿病肾病患者时的ROC曲线。
[0017]图8为本专利技术中以CCL2基因表达量单独作为诊断手段诊断糖尿病肾病患者时的ROC曲线。
[0018]图9为本专利技术中NAP
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3、CCL2及LFT联合用于诊断糖尿病肾病时的ROC曲线。
具体实施方式
[0019]下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0020]NAP
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3、LFT及CCL2在糖尿病肾病发病风险预测和诊断的应用，糖尿病肾病标志物在糖尿病肾病患者的血细胞以及肾组织中特异性高表达，因此可用作糖尿病肾病诊断的特异性标志物。
[0021]NAP
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3(中性粒细胞激活蛋白3)是一种介导炎症反应的趋化因子，在炎症反应中，NAP
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3参与血管通透性增加、血管重塑、中性粒细胞趋化、免疫细胞的激活和炎症细胞的吞噬、氧化应激等多种生物学过程。一些动物模型和细胞模型的实验结果显示，NAP
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3在糖尿病肾病病程进展中表达升高，与肾小管细胞脱落、管腔扩大、纤维化增加和肾小管间质损伤等病理过程密切相关。NAP
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3促进肾小管上皮细胞的凋亡，并通过诱导白细胞的浸润和炎症反应，进一步加重肾脏损伤的程度。此外有结果表明，NAP
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3可能也与肾小球硬化相关，CCL2也是趋化因子，能够引导白细胞移向炎症部位，研究表明，在糖尿病肾病中，NAP
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3和CCL2的表达均升高，参与了炎症反应和肾脏损伤的过程，L IX1是一个编码蛋白的基因，它的全称是Limb and CNS Expressed 1，即肢体和中枢神经系统表达1。据研究显示，L IX1基因可能参与自噬体成熟过程，并在细胞质中活跃。此外，L IX1基因与3
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甲基戊二酸尿症IV型和皮肤炭疽病有关。
[0022]本专利技术涉及定量检测人糖尿病肾病标志物NAP
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3、LFT及CCL2的蛋白水平或mRNA水平的诊断试验方法。试验中所检测的人糖尿病合并结核病标志物NAP
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3、LFT及CCL2蛋白水平或mRNA水平，可以用于诊断是否存在糖尿病肾病。
[0023]其中诊断试验的方法可以为对mRNA或cDNA，进行PCR定量检测、对mRNA或cDNA，进本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.NAP
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3、LFT及CCL2在糖尿病肾病发病风险预测和诊断的应用。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，NAP
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3、LFT及CCL2基因在糖尿病肾病患者的血细胞以及肾组织中特异性高表达，用作糖尿病肾病诊断的特异性标志物。3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，NAP
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3基因的表达量在糖尿病肾病病人的外周血单核细胞以及肾组织匀浆中存在显著增加，NAP
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3用作检测或诊断糖尿病肾病的标志物。4.如权利要求1所述的应用，其特征在于，LFT基因的表达量在糖尿病肾病病人的外周血单核细胞以及肾组织匀浆中存在显著增加，LFT用作检测或诊断糖尿病肾病的标志物。5.如权利要求1所述的应用，其特征在于，CCL2基因的表达量在糖尿病肾病病人的外周血单核细胞以及肾组织匀浆中存在显著增加，CCL2用作检测或诊断糖尿病肾病的标志物。6.一种诊断糖尿病肾病的试剂盒，其特征在于，所述包括NAP
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3、LFT及CCL2的特异性抗体、特异性结合分子，和/或NAP
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【专利技术属性】
技术研发人员：高家林，胡鑫，王李卓，
申请(专利权)人：皖南医学院第一附属医院皖南医学院弋矶山医院，
类型：发明
国别省市：