针对具有BRAF基因突变的细胞的细胞死亡诱导试剂、该细胞的增殖抑制试剂及用于治疗由该细胞的增殖异常导致的疾病的医药组合物制造技术

本申请涉及针对具有基因突变的细胞的细胞死亡诱导试剂、该细胞的增殖抑制试剂及用于治疗由该细胞的增殖异常导致的疾病的医药组合物。本发明专利技术针对在基因中具有突变的细胞而诱导细胞死亡及或抑制细胞增殖。本发明专利技术含有抑制π的药物作为有效成分。π的药物作为有效成分。π的药物作为有效成分。

【技术实现步骤摘要】
针对具有BRAF基因突变的细胞的细胞死亡诱导试剂、该细胞的增殖抑制试剂及用于治疗由该细胞的增殖异常导致的疾病的医药组合物
[0001]本申请是申请日为2016年4月15日、专利技术名称为“针对具有BRAF基因突变的细胞的细胞死亡诱导试剂、该细胞的增殖抑制试剂及用于治疗由该细胞的增殖异常导致的疾病的医药组合物”的中国专利技术专利申请No.201680021988.7(PCT申请号为PCT/JP2016/062090)的分案申请。


[0002]本专利技术涉及针对具有BRAF基因突变的细胞(例如某种癌细胞)的细胞死亡诱导试剂、该细胞的增殖抑制试剂及用于治疗由该细胞的增殖异常导致的疾病的医药组合物，进而涉及筛选细胞死亡诱导试剂及/或细胞增殖抑制试剂的方法。

技术介绍

[0003]BRAF基因是编码构成RAS
‑
RAF
‑
MAPK途径的丝氨酸/苏氨酸激酶之一的基因。已经报道了各种肿瘤中的BRAF基因突变。例如，在多种癌细胞中可确认到第600位的缬氨酸被取代为谷氨酸的突变(V600E)。已知具有V600E突变的BRAF时常会激活下游的信号，即使没有来自细胞外的刺激，也会导致细胞的增殖。
[0004]例如，在多数大肠癌(5～15％)、黑色素瘤(约60％)中，确认到了具有V600E突变的BRAF基因。需要说明的是，胰腺癌、大肠癌等多种癌症中，以高频率确认到KRAS基因中的突变。KRAS蛋白是局部存在于细胞膜内侧的G蛋白。KRAS等RAS形成了下述级联：其激活CRAF、BRAF等RAF，RAF继而激活MEK，MEK激活MAPK(非专利文献1及2)。同时具有BRAF突变及KRAS突变的情况是罕见的，BRAF突变及KRAS突变彼此为排他性关系(非专利文献3)。
[0005]目前，对于可确认到具有V600E突变的BRAF的癌症而言，利用针对具有V600E突变的BRAF的抑制剂进行的治疗被认为是有效的。作为这样的抑制剂，威罗菲尼(Vemurafenib(PLX4032))、PLX4720等是已知的。然而，存在由于该抑制剂的持续性施予而导致癌细胞获得对该抑制剂的耐性的情况，治疗效果有限。因此，需求可替代这些抑制剂的、对在BRAF基因中具有突变的癌细胞更有效的细胞死亡诱导试剂、增殖抑制试剂。
[0006]另外，谷胱甘肽
‑
S
‑
转移酶(GST)为催化谷胱甘肽缀合的酶之一，其作为使药物等物质与谷胱甘肽(GSH)共轭从而形成水溶性物质的酶而为人们所知。GST基于氨基酸序列而代表性地分类为α、μ、ω、π、θ及ζ这6种同工酶。其中，尤其是GST
‑
π(glutathione S
‑
transferase pi，也称为GSTP1)的表达在各种癌细胞中升高，已指出这可能是针对部分抗癌剂具有耐性的原因之一。实际上，已知在使针对GST
‑
π的反义DNA、GST
‑
π抑制剂作用于过量表达了GST
‑
π而呈现出耐药性的癌细胞系时，耐药性被抑制(非专利文献4～6)。此外，在最近的报道中，报道了在使针对GST
‑
π的siRNA作用于过量表达GST
‑
π的雄激素非依赖性前列腺癌细胞系时，其增殖被抑制、凋亡增多(非专利文献7)。
[0007]另外，已知GST
‑
π会与c
‑
Jun N末端激酶(JNK)形成复合体从而抑制JNK的活性(非
专利文献8)。此外，已知GST
‑
π参与了与细胞应激反应相关的蛋白质的S
‑
谷胱甘肽化(非专利文献9)。进而，还已知GST
‑
π有助于对由活性氧类(ROS)诱导的细胞死亡的保护作用(非专利文献10)。由此可以理解，GST中的GST
‑
π具有各种特征/功能。
[0008]有报道称，使针对GST
‑
π的siRNA作用于在KRAS中具有突变的癌细胞系时，Akt的激活被抑制、自噬增强，但对凋亡的诱导为中等程度(非专利文献11)。专利文献1中公开了通过将抑制GST
‑
π的药物、和3
‑
甲基腺嘌呤等自噬抑制剂作为活性成分，从而能够诱导癌细胞的凋亡。此外，专利文献2中公开了在同时阻遏GST
‑
π和Akt等的表达时，可抑制细胞增殖，诱导细胞死亡，并且，通过同时阻遏Akt等的表达，可更显著地抑制由GST
‑
π的表达阻遏而诱导的自噬。
[0009]然而，关于上述在BRAF基因中具有突变的细胞中的GST
‑
π表达与细胞增殖或细胞死亡之间的关系、与信号转导相关的GST
‑
π的作用等尚无见解。
[0010]现有技术文献
[0011]专利文献
[0012]专利文献1：WO2012/176282
[0013]专利文献2：WO2014/098210
[0014]非专利文献
[0015]非专利文献1：Curr Top Microbiol Immunol.2012；355:83
‑
98
[0016]非专利文献2：Curr Opin Pharmacol.2008Aug；8(4):419
‑
26.
[0017]非专利文献3：British Journal of Cancer(2013)108,1757
‑
1764.
[0018]非专利文献4：Takahashi和Niitsu,Gan To Kagaku Ryoho.1994；21(7):945
‑
51
[0019]非专利文献5：Ban等人,Cancer Res.1996；56(15):3577
‑
82
[0020]非专利文献6：Nakajima等人,J Pharmacol Exp Ther.2003；306(3):861
‑9[0021]非专利文献7：Hokaiwado等人,Carcinogenesis.2008；29(6):1134
‑8[0022]非专利文献8：Adler等人,EMBO J.1999,18,1321
‑
1334
[0023]非专利文献9：Townsend等人,J.Biol.Chem.2009,284,436
‑
445非专利文献10：Yin等人,Cancer Res.2000 60,4053
‑
4057
[0024]非专利文献11：Nishita等人,AACR 102nd Annual Meeting,Abstract No.1065

技术实现思路

[0025]专利技术所要解决的课题
[0026]因此，本专利技术的目的在于，提供针对在BRAF基因中具有突变的细胞而具有细胞死亡诱导作用及/或细胞增殖本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.抑制GST
‑
π的药物和BRAF抑制剂的组合在在BRAF基因中具有突变的细胞的细胞死亡诱导试剂的制造中的用途，其中，所述抑制GST
‑
π的药物为选自由RNAi分子、核酶、反义核酸、DNA/RNA嵌合多核苷酸及表达它们中至少1种的载体组成的组中的物质。2.抑制GST
‑
π的药物和BRAF抑制剂的组合在在BRAF基因中具有突变的细胞的细胞增殖抑制试剂的制造中的用途，其中，所述抑制GST
‑
π的药物为选自由RNAi分子、核酶、反义核酸、DNA/RNA嵌合多核苷酸及表达它们中至少1种的载体组成的组中的物质。3.如权利要求1或2所述的用途，其特征在...

【专利技术属性】
技术研发人员：新津洋司郎，西多裕树，
申请(专利权)人：日东电工株式会社，
类型：发明
国别省市：