一种灵芝单核体菌株及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种灵芝单核体菌株及其应用。所述的灵芝单核体菌株命名为Ganoderma lucidum GL0002_P2，其保藏编号为GDMCC No：63286。本发明专利技术研究发现：将本发明专利技术的Ganoderma lucidum GL0002_P2单核体与其它灵芝菌株的单核或者双核菌株进行单单杂交或单双杂交，杂交子的菌柄长度即可获得显著改良。因此，使用本发明专利技术提供的灵芝单核体菌株Ganoderma lucidum GL0002_P2改良灵芝的菌柄长度，具有周期短，成本低，操作简便，效果显著的优点。效果显著的优点。效果显著的优点。

【技术实现步骤摘要】
一种灵芝单核体菌株及其应用


[0001]本专利技术属于灵芝育种
，具体涉及一种灵芝单核体菌株及其应用。

技术介绍

[0002]灵芝(Ganoderma lucidum)素有“还魂草”、“吉祥草”、“仙草”的美誉，分类上属真菌界、担子菌门、多孔菌目、灵芝科、灵芝属物种，具有极高的营养、保健和药用价值。灵芝在世界各地均有分布，以亚热带及热带地区较多，少数分布在温带。我国灵芝资源非常丰富，现已知灵芝属真菌超过60种，分布于国内的23个省市，如灵芝(G.lucidum)(又名赤芝)、紫芝(G.sinense)、树舌灵芝(G.applanatum)、薄盖灵芝(G.capense)等。
[0003]灵芝的商品外观，如朵形、颜色、质地、菌柄长度等，影响其商业价值。此外，菌柄的长度与子实体发育周期和采收周期息息相关。不同灵芝品种的菌柄长度具有较大的差异，以菌柄为目标的品种选育，可以丰富灵芝的种质资源并优化灵芝人工栽培产业结构。
[0004]原生质体单核体是指通过原生质体单核化的方法得到的单核体菌株。原生质体单核体用于杂交育种有多重优点：原生质体单核体和由孢子萌发形成的单核体不同，前者直接来源于营养菌丝没有经过减数分裂，有利于亲本优良性状的保存和稳定表达；可直接从亲本菌丝体中得到单核体无需进行孢子收集，减少了工作量，缩短育种时间；许多在人工条件下无法形成子实体的野生种质资源，可以利用原生质体单核化技术获得单核体菌株用于后续的育种工作，拓宽了杂交亲本的基因型。

技术实现思路

[0005]本专利技术的第一个目的在于提供一种灵芝单核体菌株Ganoderma lucidum GL0002_P2，其保藏编号为：GDMCC No：63286。
[0006]本专利技术利用双核菌株GL0002，通过原生质体单核化的方法获得了原生质体单核体菌株Ganoderma lucidum GL0002_P2，该单核体菌株与其它灵芝菌株杂交，即可获得长菌柄的灵芝新菌株，可显著改善灵芝的农艺性状。
[0007]所述的原生质体单核体菌株命名为Ganoderma lucidum GL0002_P2。
[0008]本专利技术的第二个目的在于提供上述灵芝单核体菌株Ganoderma lucidum GL0002_P2在改良灵芝菌柄长度中的应用。具体的，是提供上述的灵芝单核体菌株Ganoderma lucidum GL0002_P2在增加灵芝菌柄长度中的应用。
[0009]本专利技术的第三个目的在于提供一种灵芝菌柄长度的改良方法，将上述的灵芝单核体菌株Ganoderma lucidum GL0002_P2与其它灵芝菌株的单核或双核菌株进行单单杂交或单双杂交，杂交子的菌柄长度得到改良。
[0010]本专利技术的有益效果为：
[0011]使用本专利技术提供的灵芝单核体菌株Ganoderma lucidum GL0002_P2改良灵芝的菌柄长度，周期短，成本低，操作简便，效果显著。
[0012]灵芝单核体菌株Ganoderma lucidum GL0002_P2，其于2023年3月21日保藏于广东
省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，地址：广东省广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，邮编：510070，保藏编号为：GDMCC No：63286。
附图说明
[0013]图1为本专利技术所提供的灵芝单核体菌株Ganoderma lucidum GL0002_P2的菌丝(左)及其双核亲本GL0002的子实体(右)。
[0014]图2为使用单单杂交改良目的灵芝菌株的菌柄，改良前(左)，改良后(右)。
[0015]图3为使用单双杂交改良目的灵芝菌株的菌柄，改良前(左)，改良后(右)。
具体实施方式
[0016]以下实施例是对本专利技术的进一步说明，而不是对本专利技术的限制。
[0017]实施例1
[0018]灵芝双核菌株GL0002(图1右)为实验室前期保藏的一个菌柄较长的灵芝菌株，利用GL0002菌株通过原生质体单核化方法获得单核体菌株，命名为Ganoderma lucidum GL0002_P2(图1左)。原生质体单核体的制备方法如下。
[0019]1.培养基：
[0020]PDA培养基：将15.6g Difco
TM Potato Dextrose Agar(Becton,Dickinson and Company,Sparks,MD,USA)溶于400mL ddH2O中，121℃灭菌15min。
[0021]PDB培养基：将2.4g Difco
TM Potato Dextrose Broth(Becton,Dickinson and Company,Sparks,MD,USA)溶于100mL ddH2O中，121℃灭菌15min。
[0022]再生培养基：15.6g Difco
TM Potato Dextrose Agar与82.15g蔗糖溶于400mL ddH2O中，121℃灭菌15min。
[0023]2.灵芝菌株GL0002原生质体制备和再生：
[0024]将PDA平板培养7d的菌丝1
‑
2g使用匀浆仪打碎，分装至PDB培养基中，28℃静置培养3d，期间每天手动摇晃菌丝2
‑
3次；过滤收集菌丝，将菌丝置于2％溶壁酶溶液中，在30℃、60rpm/min条件下酶解2.5h；用灭菌的未脱脂棉花过滤去除酶解液中残留的菌丝片段，滤液于4℃、3000rpm/min条件下离心10min；沉淀用0.6mol/L的甘露醇洗涤2
‑
3次得到纯化的原生质体；使用血球计数板对原生质体计数，稀释浓度至104个/mL，取100μL涂布在再生培养基上，28℃避光倒置培养14d，直至陆续有单菌落再生。
[0025]3.灵芝Ganoderma lucidum GL0002_P2原生质体单核体的获得：
[0026]将上述培养再生的单菌落使用无菌接种针转移至PDA培养基上，28℃插片培养5d。于40倍光学显微镜下观察，如果没有锁状联合，则该菌株为单核体。通过以上方法获得了长势较好的原生质体单核体菌株Ganoderma lucidum GL0002_P2。
[0027]灵芝单核体菌株Ganoderma lucidum GL0002_P2，其于2023年3月21日保藏于广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，地址：广东省广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，邮编：510070，保藏编号为：GDMCC No：63286。
[0028]实施例2
[0029]利用Ganoderma lucidum GL0002_P2与南韩灵芝的原生质体单核体南韩_P8进行单单杂交，获得的杂交子菌柄长度得到显著改善，具体方法如下。
5.0026(图3左)。
[0054]以上仅是本专利技术的优选实施方式，应当指出的是，上述优选实施方式不应视为对本专利技术的限制，本专利技术的保护本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种灵芝单核体菌株Ganoderma lucidum GL0002_P2，其保藏编号为：GDMCC No：63286。2.根据权利要求1所述的灵芝单核体菌株Ganoderma lucidum GL0002_P2，其特征在于，所述的单核体菌株Ganoderma lucidum GL0002_P2是将双核灵芝菌株进行原生质体单核化获得。3.根据权利要求2所述的灵芝单核体菌株Ganoderma lucidum GL0002_P2，其特征在于，所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：王丽宁，平兆华，黄清铧，
申请(专利权)人：广东省科学院生物与医学工程研究所，
类型：发明
国别省市：