来源于乳铁蛋白的抗菌肽及其应用制造技术

本发明专利技术涉及本发明专利技术属于生物医药领域，具体涉及来源于乳铁蛋白的抗菌肽及其应用。所述来源于乳铁蛋白的抗菌肽，其氨基酸序列如SEQID NO：1至98任一所示，其具有广谱的抗菌作用，尤其是对恶臭假单胞菌、红平红球菌、枯草芽孢杆菌、糠秕马拉色菌、新型隐球酵母和白色念珠菌具有显著的抑菌作用，具有较大应用价值。具有较大应用价值。

【技术实现步骤摘要】
来源于乳铁蛋白的抗菌肽及其应用


[0001]本专利技术属于生物医药领域，具体涉及来源于乳铁蛋白的抗菌肽及其应用。

技术介绍

[0002]抗生素的耐药性已成为影响抗感染治疗和畜牧业发展的严重问题，新的抗菌物质的研究和开发是解决这一问题的关键。为保障人与动物的健康，可使用抗生素替代物。抗菌肽以其广谱高效的抗细菌、真菌、病毒、寄生虫、肿瘤作用,且无残留、不易产生耐药性,同时能够促进伤口愈合及血管新生，被认为是抗生素的最佳替代物(Fischbach M A,Walsh C T.Antibiotics for emerging pathogens[J].Science,2009,325(5944):1089
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1093.)。抗菌肽也称宿主防御肽或肽抗生素，广泛存在于自然界，是天然免疫系统的重要组成部分，近年来成为国际生命科学领域研究的热点之一(李杰，杭柏林，秦爱建,等.牛血红蛋白源抗菌肽P3及其类似肽的生物信息学分析[J].中国畜牧兽医,2017,44(1):59
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64.)。目前大量天然来源或人工合成的抗菌肽正被进行广泛深入的研究，截至2022年5月，已有3000多种抗菌肽被收录至抗菌肽数据库(https://aps.unmc.edu)中(张书会，罗璐，孙雪言，等.虎奶菇菌丝体抗菌肽提取工艺优化及活性研究[J].食品与机械,2022,38(08):158
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165.&Browne K,Chakraborty S,Chen R,et al.A new era of antibiotics:The clinical potential of antimicrobial peptides[J].International Journal of Molecular Sciences,2020,21(19):7047.)。
[0003]传统抗菌肽多数是从微生物或动植物体内分离得到，分离过程操作繁琐、流程长、周期长、成本高、风险高，在随机筛选过程中带有很大的盲目性，且容易使一些抗菌肽的活性受到影响。如何高效的发现更多的高活性、高稳定性和低毒性的抗菌肽也是目前研究的热点之一。而通过半理性设计获得的多肽的蛋白来源不明确，后续的应用需要解决其安全性问题。随着对抗菌肽活性和相关理化性质的研究不断积累以及生物信息学技术的发展，仍然需要研发更新、更具应用价值的广谱抗菌多肽。
[0004]乳铁蛋白(Lactoferrin，LF)是一种多功能铁结合糖蛋白，属于转铁蛋白家族。它大量存在于牛奶中，是人类外分泌物中的一种主要蛋白质，具有多种生物活性(Fernandes K E,Carter D A.The antifungal activity of lactoferrin and its derived peptides:mechanisms of action and synergy with drugs against fungal pathogens[J].Frontiers in Microbiology,2017,8:2.)。LF不仅具有广谱抗菌、抗炎症、调节机体免疫等多种功能，而且天然、无毒。来自牛乳的乳铁蛋白(bovine lactoferrin,bLF)容易获取，适合大规模生产，且不存在伦理道德问题，具有更好的临床应用意义。目前商业中使用的乳铁蛋白大多来源于牛乳，每毫升牛乳中能提取0.23mg乳铁蛋白，纯度为95％(杨安树,高金燕,李欣,等.牛乳中乳铁蛋白的分离纯化研究[J].食品科技,2005(3):17
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19.)。2015年，欧盟食品安全局(EFSA)批准牛乳铁蛋白作为新型食品配料(王楠楠,蔡婷婷,朱婉萍.乳铁蛋白抗菌作用研究进展[J].食品科技,2020,45(08):233
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237.)。除了是一种活性的完整蛋白外，LF还是多种蛋白水解酶从多肽链上切割出来的抗菌肽的丰富来源(Sinha M,
Kaushik S,Kaur P,et al.Antimicrobial lactoferrin peptides:the hidden players in the protective function of amultifunctional protein[J].International Journal of Peptides,2013,2013.)，甚至许多已被证明具有超过整个LF的抗菌活性(Fernandes K E,Payne R J,Carter D A.Lactoferrin
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derived peptide lactofungin is potently synergistic with amphotericin B[J].Antimicrobial Agents and Chemotherapy,2020,64(10):e00842
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20.)，然而其抗菌肽的获取途径有限，且制备工艺复杂。随着生物信息学分析和大数据分析技术的发展，通过半理性设计获得的抗菌肽的蛋白来源不明，其后续应用考虑到安全性问题，因此本专利技术通过对乳铁蛋白序列和功能进行深度挖掘以获得新的潜在抗菌活性肽。到目前为止，尚未见到以乳铁蛋白序列为基础全序列建立重叠肽库直接进行分析得到的抗菌肽。

技术实现思路

[0005]本专利技术采用生物信息学的方法，基于重叠肽库设计乳铁蛋白肽文库，借助Antimicrobial Peptide Scanner vr.2服务器预测和筛选评分较高的抗菌肽，可作添加剂在食品、保健品、化妆品或医药领域得到广泛的应用。
[0006]本专利技术解决目前通过天然成分分离提取抗菌肽成本高、效率低、成功率低的问题，基于现有的乳铁蛋白序列，利用生物信息学手段完成筛选，并通过实验验证，能够高效快速地筛选出抗菌肽。本专利技术的抗菌肽来源于乳铁蛋白序列，实现来源良好生物兼容性、绿色、安全的目标。
[0007]为了达到上述目的，本专利技术提供的技术方案为：
[0008]本专利技术提供来源于乳铁蛋白的抗菌肽，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO：1至98任一所示；优选地，其氨基酸序列如SEQ ID NO：1至8、31
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36、64
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77、86
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89任一所示；更优选地，其氨基酸序列如SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:31
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32、SEQ ID NO.36、SEQ ID NO:64、SEQ ID NO:67
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73、SEQ ID NO:77、SEQ ID NO.86和SEQ ID NO.88任一所示。
[0009]本专利技术还提供编码所述的抗菌肽的核酸，以及含所述的核酸的表达载体或重组细胞。
[0010]本专利技术进一步提供所述的抗菌肽在抗菌或抑菌中的应用。其中，抗菌或抑菌是指大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌、恶臭假单胞菌、金黄色葡萄球菌、痤疮丙酸杆菌、红平红球菌、枯草芽孢杆菌、糠秕马拉色菌、新型隐球本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.来源于乳铁蛋白的抗菌肽，其特征在于，其氨基酸序列如SEQID NO：1至98任一所示。2.如权利要求1所述的抗菌肽，其特征在于，其氨基酸序列如SEQID NO：1至8、31
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36、64
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77、86
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89任一所示。3.如权利要求1所述的抗菌肽，其特征在于，其氨基酸序列如SEQID NO:2、SEQID NO:31
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32、SEQID NO.36、SEQID NO: 64、SEQ.ID NO: 67
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73、和SEQID NO:77、SEQID NO.86和SEQID NO.88任一所示。4.编码如权利要求1或2或3所述的抗菌肽的核酸。5.含如权利要求4所述的核酸的表达载体或重组细胞。6.如权利要求1至3任一项所述的抗菌肽在抗菌或抑菌中的应用。7.如权利要求6所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈冰冰，汪佳瑞，李华珍，章家泉，
申请(专利权)人：百葵锐深圳生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：