朱顶红组培繁殖方法技术

本发明专利技术涉及植物组织培养技术领域，尤其涉及一种朱顶红组培繁殖方法。所述朱顶红组培繁殖方法包括外植体的消毒，以及对消毒后的外植体进行愈伤组织诱导培养；其中，外植体选择朱顶红花托；愈伤组织诱导培养基中添加有2.5

【技术实现步骤摘要】
朱顶红组培繁殖方法


[0001]本专利技术涉及植物组织培养
，尤其涉及一种朱顶红组培繁殖方法。

技术介绍

[0002]朱顶红(Hippeartrm Herb.)是石蒜科朱顶红属植物，多年生草本鳞茎植物，原产地热带美洲，具有很高的观赏价值和商业价值。目前，朱顶红的繁殖方法包括播种法、分球法、鳞茎切割法和组织培养法等。其中，播种法存在后代分离现象。常规的分球法和鳞茎切割法，每年分栽一次，增殖率非常低。
[0003]组织培养法是指从植物体分离出符合需要的器官、组织或细胞等，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。虽然根据细胞全能性理论上来讲任何组织或者器官都有潜能发育成完整的植株，但从实际操作过程中会发现不同种类的植株以及同一种类不同取材部位的器官或组织对诱导条件的反应有很大差异。对于鳞茎植物来说，通常鳞片外层比内层再生能力强，下段比中、上段再生能力强。因此，目前利用组织培养法繁殖朱顶红，常采用鳞茎和鳞茎盘作为外植体。
[0004]但是，以鳞茎和鳞茎盘作为外植体会对母球造成破坏性伤害。这对种源稀少的种球和新的育种后代来说，存在破坏母球和保存种质之间的矛盾和痛点。而以除鳞茎和鳞茎盘以外的其他部位如花梗、子房等作为外植体繁殖朱顶红，又存在诱导率低，死亡率高，培养周期长等问题。比如，开封市林业局官网公开的朱顶红组织培养繁殖方法经组培后产生愈伤组织，约30天后形成不定根，3至4个月后才能形成不定芽(http://lyj.kaifeng.gov.cn/News.aspx？Pach＝407161010052029)。因此，寻找一种既能不破坏鳞茎和鳞茎盘，又能保证较高诱导率，较低死亡率，较短培养周期的朱顶红组织培养繁殖方法，对朱顶红优稀品种的推广利用具有重要意义。

技术实现思路

[0005]有鉴于
技术介绍
中存在的技术问题，本专利技术提供了一种朱顶红组培繁殖方法，包括外植体的消毒，以及对消毒后的外植体进行愈伤组织诱导培养，所述外植体选择朱顶红花托；所述愈伤组织诱导培养在愈伤组织培养基中进行，所述愈伤组织培养基以MS培养基为基础培养基，添加2.5
‑
3.5mg/L的6
‑
BA、2.0
‑
2.5mg/L的TDZ和0.05
‑
0.15mg/L的NAA。
[0006]优选的，所述TDZ和所述6
‑
BA的用量比例为2.8
‑
3.2:2。
[0007]优选的，所述愈伤组织培养基还添加了28
‑
32g/L的糖和7
‑
9g/L的卡拉胶。
[0008]优选的，所述愈伤组织诱导培养的温度为24
‑
26℃；和/或，所述愈伤组织诱导培养的时间为25
‑
40天。
[0009]优选的，所述朱顶红组培繁殖方法还包括在所述愈伤组织诱导培养后的不定芽诱导培养；所述不定芽诱导培养在不定芽诱导培养基中进行，所述不定芽诱导培养基以MS培养基为基础培养基，添加1.5
‑
2.0mg/L的6
‑
BA、1.0
‑
1.5mg/L的TDZ和0.05
‑
0.15mg/L的NAA。
[0010]优选的，所述不定芽诱导培养的光照时间为10
‑
14h/天，光照强度为1600
‑
1800lx；和/或，所述不定芽诱导培养的培养温度为24
‑
26℃。
[0011]优选的，所述朱顶红组培繁殖方法还包括在所述不定芽诱导培养后的生根培养；所述生根培养在生根培养基中进行，所述生根培养基以MS培养基为基础培养基，添加0.08
‑
0.12mg/L的NAA和0.2
‑
1.5g/L活性炭。
[0012]优选的，所述外植体选择未开花的朱顶红花托；和/或，在所述愈伤组织诱导培养前，将所述消毒后的外植体切成1.5
‑
2.5cm小块。
[0013]优选的，所述外植体的消毒依次包括新洁尔灭消毒、乙醇消毒和升汞消毒。
[0014]优选的，所述升汞消毒采用0.1％升汞消毒处理8min
±
20s；
[0015]优选的，所述升汞消毒后，无菌水洗涤2
‑
4次，每次洗涤时间为45
‑
75s。
[0016]有益效果：
[0017]本专利技术提供了一种朱顶红组培繁殖方法，以朱顶红花托为外植体进行朱顶红的组培繁殖，不会对朱顶红原本的母球造成伤害，进而有助于保护稀优种质资源。同时，本专利技术用于朱顶红花托愈伤组织诱导培养的培养基中添加有2.5
‑
3.5mg/L的6
‑
BA、2.0
‑
2.5mg/L的TDZ和0.05
‑
0.15mg/L的NAA，经愈伤组织诱导培养，朱顶红花托能在30天左右的时间内形成愈伤组织，且外植体样本在愈伤组织诱导的过程中死亡率低，成活率高，诱导率高。
[0018]本专利技术得到的愈伤组织经过不定芽诱导培养、继代培养和生根诱导培养后，不定芽诱导率达85％，继代培养的增殖系数在2.0以上，生根率达100％。另外，本专利技术提供的朱顶红组培繁殖方法还具有培养周期短的优势。本专利技术提供的朱顶红组培繁殖方法可以替代以鳞茎或者鳞茎盘为外植体进行组培繁殖的传统方法，进而能在不伤害种源的前提下快速有效地大量生产优质朱顶红种苗，有助于朱顶红新品种选育及种苗工厂化生产。
附图说明
[0019]为了更清楚地说明本专利技术或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图进行说明。
[0020]图1是本专利技术实施例1步骤1)中经消毒处理的外植体照片；
[0021]图2是本专利技术实施例1步骤2)中经诱导培养得到的愈伤组织照片；
[0022]图3是本专利技术实施例1步骤3)中经诱导培养得到的不定芽照片；
[0023]图4是本专利技术实施例1步骤4)中经继代培养得到的不定芽照片；
[0024]图5是本专利技术实施例1步骤5)中经诱导培养得到的生根苗照片。
具体实施方式
[0025]本专利技术提供了一种朱顶红组培繁殖方法，包括外植体的消毒，以及对消毒后的外植体进行愈伤组织诱导培养的步骤。
[0026]本专利技术所述朱顶红组培繁殖方法包括外植体的消毒。
[0027]在本专利技术中，外植体选择朱顶红花托。以朱顶红花托为外植体进行朱顶红的组培繁殖，不会对朱顶红原本的母球造成伤害，进而有助于保护稀优种质资源。为了避免引入外源污染，提升消毒效果，本专利技术所述朱顶红花托优选为未开花的花托，更优选为饱满未开放的花骨朵内的花托。
[0028]在本专利技术中，所述外植体的消毒优选包括新洁尔灭消毒、乙醇消毒和升汞消毒三个步骤。本专利技术先对外植体进行新洁尔灭消毒，所述新洁尔灭消毒的处理时间优选本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.朱顶红组培繁殖方法，包括外植体的消毒，以及对消毒后的外植体进行愈伤组织诱导培养，其特征在于，所述外植体选择朱顶红花托；所述愈伤组织诱导培养在愈伤组织培养基中进行，所述愈伤组织培养基以MS培养基为基础培养基，添加2.5
‑
3.5mg/L的6
‑
BA、2.0
‑
2.5mg/L的TDZ和0.05
‑
0.15mg/L的NAA。2.根据权利要求1所述朱顶红组培繁殖方法，其特征在于，所述TDZ和所述6
‑
BA的用量比例为2.8
‑
3.2:2。3.根据权利要求1或2所述朱顶红组培繁殖方法，其特征在于，所述愈伤组织培养基还添加了28
‑
32g/L的糖和7
‑
9g/L的卡拉胶。4.根据权利要求1
‑
3任意一项所述朱顶红组培繁殖方法，其特征在于，所述愈伤组织诱导培养的温度为24
‑
26℃；和/或，所述愈伤组织诱导培养的时间为25
‑
40天。5.根据权利要求1
‑
4任意一项所述朱顶红组培繁殖方法，其特征在于，还包括在所述愈伤组织诱导培养后的不定芽诱导培养；所述不定芽诱导培养在不定芽诱导培养基中进行，所述不定芽诱导培养基以MS培养基为基础培养基，添加1.5
‑
2.0mg/L的6
‑
BA、1....

【专利技术属性】
技术研发人员：李贵雨，陈金花，杨光穗，谌振，尹俊梅，
申请(专利权)人：海南热作两院种业科技有限责任公司，
类型：发明
国别省市：