一种高活性的重组人纤连蛋白及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种高活性的重组人纤连蛋白及其制备方法和应用。本发明专利技术提供的重组人纤连蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。设计的功能结构域截短体极大地保留了纤连蛋白与细胞相作用区段及相关功能结构域，其最终蛋白大小约为150KD，收获高纯度且能够更好激活细胞黏附、细胞活力以及增殖能力的重组人纤连蛋白。白。白。

【技术实现步骤摘要】
一种高活性的重组人纤连蛋白及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及生物医药领域，特别涉及一种高活性的重组人纤连蛋白及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]纤连蛋白（Fibronectin，FN）是高分子量糖蛋白，含糖4.5%
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9.5%，其亚单位相对分子质量为22万－25万，是一种多功能的糖蛋白，在血浆中含量丰富，广泛分布于细胞外基质中，主要功能是介导细胞粘着。纯化的纤连蛋白可增强细胞间粘连及细胞与基质的粘连。通过粘着，纤连蛋白可以通过细胞信号转导途径调节细胞的形状和细胞骨架的组织，促进细胞铺展。在胚胎发生过程中，纤连蛋白对于许多类型细胞的迁移和分化是必需的。在创伤修复中，纤连蛋白亦是重要的。在血凝块形成过程中，纤连蛋白促进血小板附着于血管受损部位。因此，纤连蛋白在医学、美容、护肤领域有广泛的应用前景。虽然动物组织、血液中含有纤连蛋白，但是含量极为有限，因此，组织来源的纤连蛋白存在产量低、成本高、产品纯度低的缺点。重组DNA技术通过构建线路蛋白基因的表达载体，在原核或者真核生物中表达、制备高纯度的纤连蛋白。纤连蛋白单本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1. 一种高活性的重组人纤连蛋白，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。2. 一种高活性的重组人纤连蛋白的编码序列，其特征在于：其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。3.权利要求1所述的高活性的重组人纤连蛋白的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：对人纤连蛋白全长进行大肠杆菌密码子优化，并进行全基因合成，设计的功能结构域截短体的编码序列如SEQ ID NO.2所示，利用宿主表达系统进行诱导表达，用标签进行纯化，收获所述高活性的重组人纤连蛋白。4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述的诱导表达步骤如下：挑取重组菌种单克隆至含有抗生素的培养基中，37℃摇床孵育过夜，稀释菌液，37℃摇床孵育至菌液OD值为1
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2，加入诱导剂诱导蛋白的表达，加入诱导剂后，摇床的温度降为16
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30℃，诱导过夜；离心收集菌体，用裂解缓冲液重悬菌体，重悬后对菌体进行均质破碎；破碎后，裂解溶液进行离心取上清，滤膜过滤去除杂质，对裂解液上清进行超滤浓缩。5. 根据权利要求4所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：王雪云，何智敏，吴灼斌，梁富，叶才文，徐江波，刘璐，周维，黄致翔，赖婵丹，
申请(专利权)人：深圳市卫光生物制品股份有限公司，
类型：发明
国别省市：