一种血清中游离睾酮高灵敏度质谱检测试剂盒及检测方法技术

本发明专利技术提供一种血清中游离睾酮高灵敏度质谱检测试剂盒及检测方法，包括前处理试剂包、定量试剂包和耗材试剂包，所述前处理试剂包为前处理过程中所应用试剂，所述定量试剂包为校准品、内标及质控品，所述耗材试剂包为前处理过程中样本超滤及上机分析使用。本方案通过前处理过程采用萃取后再衍生的方法，使其衍生产物在质谱检测中的响应明显得到提升，显著提高了检测方法的灵敏度，检出限达到0.5pg/mL，相同仪器条件下灵敏度较非衍生方法提高5倍。倍。倍。

【技术实现步骤摘要】
一种血清中游离睾酮高灵敏度质谱检测试剂盒及检测方法


[0001]本专利技术涉及质谱检测
，具体为一种血清中游离睾酮高灵敏度质谱检测试剂盒及检测方法。

技术介绍

[0002]睾酮是由睾丸间质细胞产生的主要雄激素，肾上腺和卵巢有少量产生。游离的睾酮属于活性状态，游离睾酮的测定能克服睾酮结合蛋白浓度变化产生的影响，直接反映具有生物学活性的激素，游离睾酮比总睾酮更能灵敏地反映某些疾病的特征，在临床诊断上，具有更重要的意义。临床进行游离睾酮检测主要方式为使用试剂盒产品。
[0003]目前游离睾酮检测试剂盒有酶联免疫检测试剂盒和化学发光免疫检测试剂盒，这两种试剂盒的检测原理均基于抗原与相应抗体之间的特异性结合反应。这两种试剂盒目前存在基质干扰大导致定量结果不准确，灵敏度低，专属性差等技术问题无法满足临床需要，未应用于临床检测，仅用于科研样本检测使用。目前临床游离睾酮检测缺乏特异性强、灵敏度高、定性定量结果准确的试剂盒产品。本专利技术的游离睾酮试剂盒检测基于高效液相色谱串联质谱技术，检测物质在液相系统实现分离，进入质谱中进行MRM检测，即根据各本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种血清中游离睾酮高灵敏度质谱检测试剂盒，其特征在于：包括前处理试剂包、定量试剂包和耗材试剂包，所述前处理试剂包为前处理过程中所应用试剂，所述定量试剂包为校准品、内标及质控品，所述耗材试剂包为前处理过程中样本超滤及上机分析使用。2.根据权利要求1所述的一种血清中游离睾酮高灵敏度质谱检测试剂盒，其特征在于：所述前处理试剂包包括缓冲液、萃取液、复溶液、衍生液，所述耗材试剂包包括0.5mL超滤离心管、2mL进样瓶、300μL内衬管。3.根据权利要求2所述的一种血清中游离睾酮高灵敏度质谱检测试剂盒，其特征在于：所述缓冲液为HEPPS缓冲溶液，所述萃取液为甲基叔丁基醚，所述复溶液为30％甲醇水，所述衍生液为盐酸羟胺甲醇溶液。4.根据权利要求1所述的一种血清中游离睾酮高灵敏度质谱检测试剂盒，其特征在于：所述校准品由一定浓度的游离睾酮标准溶液制备而成，所述校准品浓度控制在S1
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S8之间，所述内标由游离睾酮内标标准物质溶液制备而成，所述内标浓度为0.5ng/mL。5.根据权利要求1所述的一种血清中游离睾酮高灵敏度质谱检测试剂盒，其特征在于：所述质控品包括低值质控和高值质控，所述低值质控和高值质控均为牛血清白蛋白缓冲液中加入一定浓度的游离睾酮标准溶液制备而成，所述低质控浓度控制在线性S3浓度，所述高质控浓度控制在线性S6浓度。6.根据权利要求3所述的一种血清中游离睾酮高灵敏度质谱检测试剂盒，其特征在于：所述HEPPS缓冲溶液pH在7.2—7.4之间，所述HEPPS缓冲溶液浓度为238.3g/L，所述盐酸羟胺甲醇溶液的盐酸羟胺浓度为0.1mol/L。7.根据权利要求5所述的一种血清中游离睾酮高灵敏度质谱检测试剂盒，其特征在于：所述牛血清白蛋白缓冲液中的缓冲液为PBS缓冲液，所述PBS缓冲液pH在7.2—7.4之间,所述牛血清白蛋白浓度为5％。8.一种血清中游离睾酮高灵敏度质谱检测方法，其特征在于：使用权利要求1
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【专利技术属性】
技术研发人员：马良，刘宇，陈佳，许佳彬，拓文娟，
申请(专利权)人：杭州汉科生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：