越南蔷薇菌YZS02及其应用制造技术

本发明专利技术涉及微生物技术领域，特别涉及产蛋白酶和脂肪酶菌株及其应用。本发明专利技术提供了一种产蛋白酶和脂肪酶菌株YZS02，该菌株的分类命名为越南蔷薇菌(Rossellomorea vietnamensis)，保藏编号为GDMCC No.62920。本发明专利技术提供了一种该菌株制备菌剂的方法，以及上述菌株YZS02在降解有机污染物上的应用，具有良好的应用前景。良好的应用前景。良好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
越南蔷薇菌YZS02及其应用


[0001]本专利技术涉及环境微生物
，具体而言，涉及一种越南蔷薇菌YZS02及其应用。

技术介绍

[0002]方斑东风螺(Babylonia areolata)俗称花螺，属于软体动物门、腹足纲、前鳃亚纲、新腹足目、蛾螺科、东风螺属。方斑东风螺具有生长速度快、养殖周期短、肉味鲜美、软体部不饱和脂肪酸含量丰富、养殖经济价值高及便于运输等优点，深受养殖户和消费者喜爱，其已成为福建、广东、海南等地海水贝类养殖的重要种类。
[0003]目前，我国方斑东风螺工厂化养殖方式以水泥池流水沙层自净养殖为主，池内大块饵料残渣可依靠人工清理，而小块残饵及东风螺排泄废物等不能得到有效清理，极易污染养殖水体和沙层，恶化养殖环境，进而引起东风螺病害的发生。因此，底沙环境恶化成为制约东风螺产业发展的瓶颈。
[0004]当前常采用洗沙、换沙的方式改善底质，但存在工作强度大、生产效率低、对养殖对象扰动大等问题。目前利用微生物降解池塘残饵、粪便等有机污染物来改善养殖环境制成为国内外研究热点。因此从自然环境中分离、筛选高产蛋白酶和脂肪酶菌株，用于解决方斑东风螺养殖中底沙恶化问题，具有投资少、见效快、操作简单等特点，可广泛应用于水产养殖中，具有良好的发展前景。

技术实现思路

[0005]有鉴于此，本专利技术提供了可产蛋白酶和脂肪酶菌株及其应用。本专利技术的菌株能高效降解蛋白质和脂肪，可应用于降解池塘底沙中残饵、粪便等有机污染物，在水产健康养殖和生态环境保护领域具有应用潜力。
[0006]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
[0007]本专利技术提供了一株越南蔷薇菌菌株YZS02，该菌株能够有效降解东风螺养殖底沙中的蛋白质和脂肪等有机污染物，进而可作为一种的降解池塘有机污染物的菌株。
[0008]本专利技术所述的越南蔷薇菌菌株YZS02，分类地位为蔷薇菌属(Rossellomorea)，保藏号为GDMCC No.62920，保藏日期为2022年10月26日，保藏单位为广东省微生物菌种保藏中心，保藏地址为：广州市先烈中路100号大院59号楼广东省微生物研究所。
[0009]本专利技术还提供了一种液体菌剂，所述液体菌剂包含越南蔷薇菌Rossellomorea vietnamensis YZS02，越南蔷薇菌Rossellomorea vietnamensis YZS02的浓度至少为1
×
108CFU/mL。
[0010]本专利技术还提供了液体菌剂的制备方法，包括如下步骤：将越南蔷薇菌Rossellomorea vietnamensis YZS02菌株接种于液体培养基中多级扩大培养，培养结束后即得到液体菌剂。
[0011]上述的液体菌剂的制备方法，优选包括以下步骤：
[0012](1)菌株活化：将菌株接种于固体培养基，于28～37℃培养24～48h，得活化的菌株；
[0013](2)液体培养：将所述的活化的菌株接入液体种子培养基中，于28～37℃、120～200r/min振荡培养12～24h，制成种子液；
[0014](3)发酵培养：将所述的种子液按体积百分含量2～10％接种于液体发酵培养基中，于28～37℃、150～200r/min振荡培养24～40h，离心，收集菌体，获得菌剂。
[0015]在该菌剂的制备方法中：
[0016]步骤(1)中所述的固体培养基为LB固体培养基。
[0017]该LB固体培养基的组成是：氯化钠5～35g/L，酵母粉0.5～5g/L，胰蛋白胨3～10g/L，琼脂18～20g/L，pH 6.5～7.8，以蒸馏水配制。
[0018]步骤(2)中所述液体种子培养基包括：蛋白胨2～10g/L，酵母粉0.5～4g/L，氯化钠10～30g/L，pH 6.5～8.0；接种方法为：将菌体从平板上刮下一环，接种到装有30mL种子培养基的摇瓶中，28～37℃、120～200r/min振荡培养，OD600控制在0.8～1.2之间。
[0019]步骤(3)中所述液体发酵培养基包括可溶性淀粉5～25g/L，酵母粉5～25g/L，氯化钠10～30g/L，氯化镁2～8g/L，pH 6.5～8.0。
[0020]本专利技术具有如下优点：
[0021](1)本专利技术中菌株YZS02能高效降解蛋白质和脂肪。
[0022](2)本专利技术中菌株YZS02可应用于解决东风螺养殖中底沙恶化这一产业瓶颈问题。
[0023](3)本专利技术中菌剂具有投资少、见效快、操作简单等特点，在水产健康养殖和生态环境保护领域具有良好的应用潜力。
[0024]生物保藏说明
[0025]Rossellomorea vietnamensis YZS02，分类命名：Rossellomorea vietnamensis，于2022年10月26日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，地址为广州市先烈中路100号大院59号楼5楼广东省科学院微生物研究所，保藏编号为GDMCC No：62920。
附图说明
[0026]构成本申请的一部分的说明书附图用来提供对本专利技术的进一步理解，本专利技术的示意性实施例及其说明用于解释本专利技术，并不构成对本专利技术的不当限定。在附图中：
[0027]图1为实施例2中菌株YZS02的菌落形态和细胞形态；
[0028]图2为实施例2中菌株YZS02基于16S rDNA的系统发育树；
[0029]图3为实施例5中菌株YZS02对底沙总氮的影响；
[0030]图4为实施例5中菌株YZS02对底沙有机碳的影响；
[0031]图5为实施例5中菌株YZS02对养殖水体氨氮的影响；
[0032]图6为实施例5中菌株YZS02对养殖水体COD浓度的影响。
具体实施方式
[0033]本专利技术公开了越南蔷薇菌YZS02及其应用，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本专利技术。本专利技术的方法及应用已经通过较佳实施例进
行了描述，相关人员明显能在不脱离本
技术实现思路
、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本专利技术技术。
[0034]实施例1：越南蔷薇菌YZS02 GDMCC No.62920的分离与筛选
[0035]底沙样品采集于海南省海尾镇进董村水产养殖场。称取10g底沙样品，置于装有90mL无菌海水及玻璃珠的250mL锥形瓶中，200r/min振荡30min，使样品分散均匀。置80℃水浴处理15min，杀死非芽孢菌。取100μL经热处理的菌悬液均匀涂布于脱脂奶粉平板，28℃培养48h，根据菌落形状、颜色、边缘状态、透明度、表面干湿状态等表型特征，挑取透明圈较大的单菌落划线纯化，获得纯培养。经初步排重后，编号，保存。
[0036]对分离获得的菌株进行蛋白酶和脂肪酶活力测定，筛选出酶活力高的菌株YZS0本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种越南蔷薇菌YZS02，其特征在于，所述越南蔷薇菌YZS02的分类命名为Rossellomoreavietnamensis，于2022年10月26日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏地址为中国，广州，广东省微生物研究所，保藏编号为GDMCC No：62920。2.根据权利要求1所述的越南蔷薇菌YZS02，其特征在于，所述越南蔷薇菌YZS02的16SrDNA基因序列如SEQ ID NO：1所示。3.一种微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌剂包括权利要求1或2所述的越南蔷薇菌YZS02。4.一种权利要求3所述的微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：S1，...

【专利技术属性】
技术研发人员：鲍时翔，武慧宇，朱军，葛东振，黄惠琴，邹潇潇，
申请(专利权)人：中国热带农业科学院热带生物技术研究所，
类型：发明
国别省市：