【技术实现步骤摘要】
抗表皮生长因子受体抗体及其制备方法和用途
[0001]本专利技术涉及抗表皮生长因子受体(EGFR)抗体或其抗原结合片段、编码该抗体或其抗原结合片段的多核苷酸、表达载体及宿主细胞、包含该抗体或其抗原结合片段的药物组合物及其用于治疗对象的用途或方法。
技术介绍
[0002]表皮生长因子受体(Epidermal Growth Factor Receptor,EGFR),又称为ErbB
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1或HER1,是ErbB受体酪氨酸激酶超家族成员之一,它是由原癌基因c
‑
erbB编码的一种分子量约为170kDa的多功能跨膜糖蛋白,主要由参与配体结合的胞外区胞、跨膜区和具有酪氨酸激酶活性的胞内区构成,其中胞内区具有酪氨酸激酶活性(Modjtahedi et al.,Br.J.Cancer 73:228
‑
235,1996;Herbst and Shin,Cancer 94:1593
‑
1611,2002)。EGFR的已知配体包括表皮生长因子(EGF)、转化生长因子α(Transforming Growth Factor
‑
α,TGF
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α)、表皮调节素/EREG和HBEGF/肝素结合EGF、双向调节因子、β细胞素/BTC、上皮细胞有丝分裂蛋白(epigen)/EPGN,EGFR与配体结合后引发EGFR同二聚化或异二聚化,导致EGFR胞内酪氨酸激酶活性区发生自体磷酸化,磷酸化的EGFR募集衔接蛋白(例如GRB2)随之激活下游信号传导 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种抗人表皮细胞生长因子(EGFR)抗体或其抗原结合片段,其包含重链可变区和轻链可变区,其中,所述的重链可变区具有CDR1区、CDR2区和CDR3区,所述重链可变区的CDR1区、CDR2区和CDR3区包含当由IMGT编号系统定义时,分别与SEQ ID NOs:1、2和3;或当由Kabat编号系统定义时,分别与SEQ ID NOs:9、10和11;或当由Chothia编号系统定义时,分别与SEQ ID NOs:14、15和11;或当由Contact编号系统定义时,分别与SEQ ID NOs:16、17和18所示的具有至少85%,86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%,99%或100%相同的氨基酸序列;所述的轻链可变区具有CDR1区、CDR2区和CDR3区,所述轻链可变区的CDR1区、CDR2区和CDR3区包含当由IMGT编号系统定义时,分别与SEQ ID NOs:4、5和6;或当由Kabat或Chothia编号系统定义时,分别与SEQ ID NOs:12、13和6;或当与Contact编号系统定义时,分别与SEQ ID NOs:19、20和21所示的具有至少85%,86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%,99%或100%相同的氨基酸序列。2.如权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段,其包含重链可变区和轻链可变区,所述的重链可变区和轻链可变区包含分别与SEQ ID NOs:7和8具有至少85%,86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%,99%或100%相同的氨基酸序列。3.如权利要求1或2所述的抗体或其抗原结合片段,进一步包含免疫球蛋白恒定区,可选的是人IgG的恒定区。4.如权利要求1
‑
3中任一项所述的抗体或其抗原结合片段,其具有以下一个或多个特征,(1)特异性结合至人EGFR胞外结构域(ECD),通过ELISA检测其EC50值不超过1nM,优选的是不超过0.5nM;(2)与其它人ErbB受体酪氨酸激酶不具有交叉反应活性,所述其它人ErbB受体酪氨酸激酶包括HER2、HER3和/或HER4;(3)对表达EGFR的肿瘤细胞增殖活性具有抑制作用,通过ELISA检测所述抗EGFR抗体或其抗原结合片段对肿瘤细胞的IC50值不超过1nM,优选不超过0.1nM;(4)与人EGFR胞外结构域(ECD)结合亲和力常数(KD)数值不超过5
×
10
‑8M,优选的KD值约为10
‑8M。5.如权利要求1
‑
4中任一项所述的抗体或其抗原结合片段,可以是小鼠、人、嵌合或人源化抗体。6.一种核酸,其编码权利要求1
‑
5中任一项所述的抗体或其抗原结合片段。7.一种表达权利要求6所述核酸的表达载体。8.一种宿主细胞,其包含权利要求6所述的核酸或权利要求7所述的表达载体。9.一种使用权利要求8所述的宿主细胞制备权利要求1
‑
5中任一项所述的抗体或其抗原结合片段的方法,其包含以下步骤(1)在所述的宿主细胞中表达所述抗体或其抗原结合
片段,和(2)从所述的宿主细胞或细胞培养物中分离所述的抗体或其抗原结合片段。10.一种双特异性分子或多特异性分子,其包含权利要求1
‑
5中任一项所述的抗体或其抗原结合片段,以及对Fc受体、或者与癌症相关的抗原或免疫检查点蛋白抗原具有结合特异性,其中所述的与癌症相关的抗原选自HER2、HER3、VEGF、VEGFR、c
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Met、TFR(转铁蛋白受体)、IGF
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1R(人胰岛素
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样生长因子I受体);所述免疫检查点蛋白抗原选自PD
‑
1、PD
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L1、CTLA
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4、CD137、CD47。11.如权利要求10所述的双特异性抗体或多特异性抗体,其进一步可以包含第三结合特异性,第三特异性可以是抗增强因子(EF)部分。12.一种免疫缀合物、嵌合抗原受体、工程化T细胞受体、或溶瘤病毒,其特征在于,其包含权利要...
【专利技术属性】
技术研发人员:J,
申请(专利权)人:徕特康苏州生物制药有限公司,
类型:发明
国别省市:
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