花生U6启动子及其在花生CRISPR-Cas9基因编辑中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种花生U6启动子及其在花生CRISPR

【技术实现步骤摘要】
花生U6启动子及其在花生CRISPR
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Cas9基因编辑中的应用


[0001]本专利技术属于分子生物学
，具体涉及一种花生U6启动子及其在花生CRISPR
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Cas9基因编辑中的应用。

技术介绍

[0002]CRISPR/Cas9编辑系统是目前使用最广泛的基因编辑工具，利用该系统可以实现对目标基因的定点编辑，进而改变相关表型性状。运用该技术目前已经在水稻、小麦、玉米三大作物上实现了高效精确的单碱基定点突变，并显著提高了水稻白叶枯病抗性等相应表型性状。利用该技术首先需要构建有效的编辑载体，载体中含有根据靶基因序列设计的sgRNA(guide RNA)以及Cas9蛋白编码序列，Cas9蛋白在sgRNA的引导下可实现对目的基因的精确修饰，因此sgRNA(guide RNA)的转录水平以及Cas9蛋白的翻译水平直接影响到靶基因的编辑效率。
[0003]目前针对单子叶植物的编辑载体主要使用OsU3、AtU6、ZmU6等启动子来驱动sgRNA的转录，而双子叶植物则主要使用AtU3、GmU6等启动子驱动sgR本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种花生U6启动子，其特征在于，所述花生U6启动子为AhA3U6或AhB9U6，所述启动子AhA3U6的核酸序列如SEQ ID NO:1所示，所述启动子AhB9U6的核酸序列如SEQ ID NO:2所示。2.核酸序列如SEQ ID NO:1所示的启动子AhA3U6或核酸序列如SEQ ID NO:2所示的启动子AhB9U6在提高花生CRISPR
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Cas9基因编辑效率中的应用。3.一种花生CRISPR
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Cas9基因编辑载体，其特征在于，所述花生CRISPR
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Cas9基因编辑载体中的启动子为AhA3U6或AhB9U6，所述启动子AhA3U6的核酸序列如SEQ ID NO:1所示，所述启动子AhB9U6的核酸序列如SEQ ID NO:2所示。4.根据权利要求3所述花生CRISPR
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Cas9基因编辑载体，其特征在于，是将pBGK041
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GmU6载体中的GmU6启动子替换为AhA3U6或AhB9U6获得。5.权利要求3或4所述花生CRISPR
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Cas9基因编辑载体在花生基因编辑中的应用。6.一种花生CRISPR
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Cas9基因编辑的方法，其特征在于，步骤如下：将目标基因靶位点的核酸序列构建到权利要求3或4所述花生CRISPR
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Cas9基因编辑载体中，获得CRISPR
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Cas9基因编辑重组质粒；将CRISPR

【专利技术属性】
技术研发人员：赵龙刚，乔利仙，李晶晶，黄建斌，刘文平，唐艳艳，王晶珊，
申请(专利权)人：东营青农大盐碱地高效农业技术产业研究院，
类型：发明
国别省市：